一种体外扩增CD8+T细胞及其细胞亚群的方法技术

本发明专利技术建立了一种体外快速扩增CD8+T细胞及其功能性细胞亚群的方法。在常规培养扩增CD8+T细胞的体外培养体系中，增加TLR1/2激动剂、TLR2/6激动剂、TLR5激动剂或联合使用上述激动剂可显著提升CD8+T细胞的扩增效率；此外，TLR激动剂的使用可以使常规培养条件下难以扩增的功能性CD8+T细胞亚群得以扩增，如PD‑1+CD8+T细胞、T

【技术实现步骤摘要】
一种体外扩增CD8+T细胞及其细胞亚群的方法
本专利技术属细胞生物学领域，具体涉及一种体外诱导扩增CD8+T细胞及其功能性细胞亚群的方法。
技术介绍
CD8+T细胞是参与抗肿瘤与抗感染免疫的重要效应细胞，活化的CD8+T细胞可以迅速释放高浓度的IFN-γ、IL-2等细胞因子，具有广泛的免疫调节作用。在急性感染中，CD8+T细胞接受抗原刺激后，活化并大量增殖，分化成效应性CD8+T细胞（CTL），通过分泌穿孔素和颗粒酶（GranzymeB）杀伤被感染的细胞，或通过Fas-FasL通路诱导被感染的细胞凋亡。当病原清除后，一小部分效应性CD8+T细胞分化成记忆性CD8+T细胞，当相同抗原再次出现时，机体里的记忆性CD8+T细胞会迅速增殖、分化成为效应CTL，进而清除感染的病原体。CD8+T细胞也是机体抗肿瘤免疫的主要效应细胞之一，通过疫苗主动免疫诱导针对肿瘤特异抗原的CD8+T细胞应答是现代肿瘤免疫治疗的发展方向之一。然而，在正常机体能激发有效的CD8+T细胞应答的疫苗，在荷瘤机体中效果并不理想，这与多种免疫调节细胞或因子在肿瘤局部高度富集或高表达，导致肿瘤局部CD8+T细胞无能或耗竭进而本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种体外诱导扩增CD8+T细胞及其功能性CD8+T细胞亚群的方法，其特征在于，在CD8+T细胞及功能性CD8+T细胞亚群培养体系中添加一种Toll样受体激动剂或联合使用多种Toll样受体激动剂，配合抗人CD3抗体或抗人CD28抗体以及各种细胞因子刺激，能够显著提升CD8+T细胞及其功能性细胞亚群的扩增效率与功能修复。

【技术特征摘要】
1.一种体外诱导扩增CD8+T细胞及其功能性CD8+T细胞亚群的方法，其特征在于，在CD8+T细胞及功能性CD8+T细胞亚群培养体系中添加一种Toll样受体激动剂或联合使用多种Toll样受体激动剂，配合抗人CD3抗体或抗人CD28抗体以及各种细胞因子刺激，能够显著提升CD8+T细胞及其功能性细胞亚群的扩增效率与功能修复。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，Toll样受体激动剂包括但不限于TLR1/2激动剂、TLR2/6激动剂、TLR5激动剂，以及TLR3、TLR4、TLR7、TLR8、TLR9激动剂，所述激动剂可单独使用，也可联合使用。3.根据权利要求2所述方法，所述TLR1/2激动剂包括但不限于Pam3CK4，TLR2/6激动剂包括但不限于FSL-1与Pam2CGDPKHPKSF，TLR5激动剂包括但不限于Flagellin。4.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述抗人CD3抗体或抗人CD28抗体包被于磁珠上进行使用。5.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述抗人CD3抗体可单独与TLR激动剂联合使用，也可与抗CD28抗组合后与TLR激动剂联合使用。6.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述细胞因子包括但不限于IL-2、IL-7、IL-15，所述细胞因子可单独使用，也可联合使用，可同一时间加入培养，也可时间上先后加入培养体系。7.根据权利要求1所述方法，其特征在于：所述功能性CD8+T细胞亚群为分选纯化的PD-1+CD8+T细胞、分选纯化的CD137+CD8+T细胞、分选纯化的CD160+CD8+T细胞、分选纯化的纯真CD8+T细胞、分选纯化的中央记忆型CD8+T细胞、分选纯化的效应记忆型CD8+T细胞、分选纯化的效应CD8+T细胞、分选纯化的过渡记忆型CD8+T细胞、分选纯化的效应干细胞CXCR5+CD8+T细胞、分选纯化的组...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐建青，张晓燕，邱趁丽，
申请(专利权)人：上海市公共卫生临床中心，
类型：发明
国别省市：上海,31