REGⅢ蛋白的抑制剂作为哮喘的治疗剂制造技术

提供筛选用于治疗哮喘的试剂的方法。该方法包括筛选降低ＲｅｇⅢ蛋白产生或活性的试剂，已经发现ＲｅｇⅢ蛋白在产生与哮喘有关的症状或病理并发症中发挥作用。也提供治疗哮喘的方法，以及筛选和用ＲｅｇⅢ蛋白的抑制剂治疗。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的一个目的是提供筛选用于治疗哮喘的试剂的方法。本专利技术的另一个目的是提供治疗哮喘的方法。本专利技术的这些和其它目的和优点从下文的描述中将会显而易见。
技术介绍
本专利技术一般涉及哮喘的治疗。具体地，本专利技术涉及筛选用于治疗哮喘的试剂的方法和治疗哮喘的方法。哮喘是一种以可逆性气道阻塞和气道高反应性(AHR)的重复发作为特征的气道慢性炎性疾病。其典型的临床表现包括，呼吸短促、喘鸣、咳嗽和胸部紧迫感，其可以变成威胁生命或致命的疾病。当现在的治疗都关注于降低症状性支气管痉挛和肺部炎症时，人们越来越注意到长期的气道改变在患哮喘的患者的加速的肺部恶化中发挥作用。气道改变涉及很多的病理特征，包括上皮平滑肌和成肌纤维细胞增生和/或组织转化，上皮下的纤维化和基质沉积。这些过程共同导致在致命性哮喘中气道高达约300％的肥厚。尽管对于阐述哮喘的病理生理学已经有了重大的进步，但在过去的20年间，该疾病的流行、发病率、和死亡率却一直在上升。2000年单是在美国，直接由哮喘就导致了近180万人到急诊室就诊，465,000人住院治疗并有4,487人死亡。每年与哮喘有关的医疗保健费用估计达140亿美元。一般公认，变应性哮喘是由对空气变应原的不当炎性反应引发的。哮喘者的肺表现出了淋巴细胞、肥大细胞，尤其是嗜酸性细胞的强烈渗透。大量的证据表明，该免疫应答是由表达TH2细胞因子分布的CD4+T-细胞驱动的。哮喘的一个鼠类模型包括，使动物对卵白蛋白(OVA)致敏，然后在气管内传输OVA激发。该方法在小鼠肺中产生了TH2免疫应答，并模拟在人哮喘中可见的4种主要的病理生理学应答，包括血清IgE(特应性)向上调节，嗜酸性粒细胞增多、粘液过度分泌、和AHR。由嗜碱粒细胞、肥大细胞表达，由T细胞和NK细胞激活的细胞因子IL-l 3在小鼠肺对OVA的免疫应答中发挥了重要的作用。鼠IL-l 3的直接肺部滴入引发了全部4种与哮喘相关的病理，相反地，可溶性IL-l 3拮抗剂(sIL-l 3Rα2-Fc)的存在会完全阻断OVA-激发诱导的杯状细胞粘液合成和AHR转变成乙酰胆碱。Wills-Karp，M.，等人，″Interleukin-13central mediator of allergic asthma，″Science282(5397)(1998)；Grunig，G.，等人，″Requirement for IL-l 3independently of IL-4 in experimental asthma，″Science 282(5397)2261-2263(1998)。因此，IL-l 3介导的信号足以引发全部4种与哮喘有关的病理生理学表型，这正是小鼠模型中粘液分泌过多和诱导AHR所需要的。生物学激活的IL-l 3特异性地与低亲和力结合链IL-l 3Rα1和高亲和力的多聚体复合物结合，其中所述多聚体复合物包含IL-l3Rα1和IL-4R，IL-4R是IL-4信号复合物的共有组分。Wills-Karp，M.，″IL-12/IL-l 3 axis in allergic asthma，″J Allergy Clin Immunol 107(1)9-18(2001)。IL-l 3途径级联的激活引起转录激活因子Stat6补充、磷酸化及最终的核转位。大量的生理学研究表明，肺的OVA-激发不会在与Stat6-/-无效等位基因同型结合的小鼠中引起主要的病理学相关表型，包括嗜酸性粒细胞渗透、粘液分泌过多和气道高反应性。Kuperman，D.，等人，″Signal transducer and activator of transcription factor 6(Stat6)-deficient mice are protected from antigen-induced airwayhyperresponsiveness and mucus production，″J Exp Med 187(6)939-48(1998)。近来的遗传学研究表明，在IL-l 3的特异性人等位基因和其哮喘和特应性信号组分之间的结合，在人疾病的此种途径中显示了关键性的作用。Shirakawa等人，″Atopy and asthmagenetic variants ofIL-4 and IL-l 3 signaling，″Immunol.Today 21(2)60-64(2000)。IL-l 3也与其它的受体链IL-l 3Rα2结合，后者在人和小鼠中表达，其生物学功能迄今尚未确定。鼠IL-l 3Rα2以相对于IL-l 3Rα1约100倍的更大亲和力(Kd为0.5到1.2nM)与IL-l 3结合，其允许构成有效的可溶性IL-l 3拮抗剂sIL-l 3Rα2-Fc。sIL-l 3Rα2-Fc作为拮抗剂已经用于多种疾病模型，以在血吸虫诱导的肝纤维化和肉芽肿形成，肿瘤免疫监督、以及OVA-激发的哮喘模型中证明IL-l 3的作用。Wills-Karp，M.，等人，″Interleukin-13central mediator of allergicasthma，″Science 282(5397)2258-2261(1998)；Grunig，G.，等人，″Requirement for IL-l 3 independently of IL-4 in experimental asthma，″Science 282(5397)2261-2263(1998)。RegIII蛋白是Reg基因家族的一个子类，该基因家族是一个多基因家族，还包括作为β细胞生长因子的RegI和RegII。Okamoto，H.，J.Hepatobiliary Pancreat.Surg.6254-262(1999)。在人中，RegIII家族包括HIP-一种在肝细胞癌、肠、和胰腺、和胰腺炎相关蛋白(PAP)中表达的基因。出处同前。其他在人中发现的REG家族基因是RegIα、RegIβ和Reg相关序列。出处同前。小鼠REG基因包括RegI、RegII、RegIIIα、RegIIIβ、RegIIIγ、和RegIIIδ。出处同前。在大鼠、牛和仓鼠中也观测到了Reg基因。根据其他Reg家族成员细胞的促有丝分裂活性和家族成员之间的同源性，人们相信，Reg蛋白是生长因子。出处同上。由于RegIII子类成员间序列同源性的程度，本专利技术者相信，这些基因和蛋白在生理结构和功能上是相关的。当前治疗支气管痉挛和气道炎症的哮喘疗法包括，使用支气管扩张剂、皮质类固醇、和白细胞三烯抑制剂。在使用了一段时间后，很多这样的治疗会包括不希望的副作用并丧失有效性。此外，在治疗性介入中使用的仅有有限的药物可以有效地减少在哮喘中发生的气道改变过程。因此，仍然存在增加对哮喘的分子理解，相应地识别出对该复杂疾病的新治疗策略的需要。本专利技术正是满足了这种需要。专利技术简述我们发现，与对照的非哮喘动物相比，在哮喘的动物模型中RegIII蛋白的信使RNA(mRNA)在统计学上显著地增加。具体地，我们发现，通过气管内的卵白蛋白激发或直接在肺部滴注IL-l 3会使编码RegIII的mRNA增加，因此发现其可以作为哮喘治疗的靶点。因此，在本专利技术的一个方面，提供筛选用于治疗哮喘的试本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选用于在哺乳动物中治疗哮喘的试剂的方法，包括：（ａ）将ＲｅｇⅢ蛋白与受试试剂接触；和（ｂ）确定受试试剂是否抑制ＲｅｇⅢ蛋白的活性，其中减除ＲｅｇⅢ蛋白活性的受试试剂在治疗哮喘中是有用的。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：M福莱蒂，DD唐纳森，
申请(专利权)人：惠氏公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]