一种四氧化三铁表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种Fe

Preparation method of adriamycin targeting medicine with double surface modified magnetite

The invention discloses a Fe

【技术实现步骤摘要】
一种四氧化三铁表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法
本专利技术涉及阿霉素靶向药物的制备，具体涉及一种Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法。
技术介绍
磁性靶向给药系统（magneticdrugtargeting，MDT）可通过外部磁场对磁性纳米粒的磁性起到导向作用，提高化疗药物到达病灶部位的效率，增强靶向性。阿霉素靶向药物是针对肿瘤细胞定向的靶向性药物，可以降低化疗药物对正常细胞的毒副作用。Fe3O4磁性纳米粒子表面修饰的化学物质包括：柠檬酸、聚乙二醇、壳聚糖、聚苯胺、聚山梨醇酯等有机小分子或高分子化合物，以及金、碳、二氧化硅等无机化合物。其中，聚乙二醇（PEG）已被美国食品和药品管理局（FDA）批准使用。如公开号为CN104623658的专利技术专利申请，就公开了以壳聚糖或壳聚糖和聚乙二醇嫁接修饰Fe3O4表面的阿霉素磁靶向药物制备技术，该技术通过Fe3O4纳米粉体用油酸分散，再与单甘酸阿霉素混合液混合，在超声条件下，加入壳聚糖水溶液或壳聚糖和聚乙二醇嫁接水溶液进行表面修饰，得到阿霉素磁靶向药物。虽然该阿霉素磁靶向药物也有壳聚糖-聚乙二醇Fe3O4表面双修饰，但敏感性不足，因为肿瘤部位的酸性环境与正常组织之间存在着明显的差异（正常组织的pH值一般为7.4左右，而肿瘤部位为4.5~6.0），将磁靶向与酸敏感双重作用机制联合，此类双重靶向机制，Fe3O4纳米颗粒作为磁靶向部位具有磁控导向作用，通过外部磁场定向到达病灶，在肿瘤部位浓集，而肿瘤酸性环境同时促使腙键发生断裂，从而释放出药物，克服肿瘤的耐药性，减少化疗药物的毒副作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种具有良好的超顺磁性能和酸敏感的药物缓释行为的Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法，其步骤如下：a、柠檬酸修饰的四氧化三铁纳米粒子的制备：在三颈瓶中加入5~10mL氨水、2~5mL水合肼和50~70mL去离子水，升温至80~100℃反应温度，加入由1~2gFeCl2·4H2O和2~3gFeCl3·6H2O溶于20~30mL水中的溶液，搅拌反应至反应液变为黑色，再搅拌反应30~60min，然后在反应液pH9~10条件下，边搅拌边滴加浓度为0.3g/mL的柠檬酸10~20mL，柠檬酸滴加完毕，在85~95℃反应温度下，搅拌反应1.5~2h，冷却至室温，利用外部强力磁铁收集黑色沉淀物，黑色沉淀物用丙酮水溶液洗涤，除去未反应完全的柠檬酸，黑色沉淀物在30~50℃下真空干燥12~24h，得到柠檬酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；b、柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子的制备：在超声作用下，将5~10g上述柠檬酸修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子分散于20~40mL水中，再滴加8~15g二环己基碳二亚胺（DCC）和3~8g4-二甲氨基吡啶（DMAP）偶联剂，然后加入5~10mg双羧基聚乙二醇，再超声30~60min后转入两颈瓶中，室温下搅拌反应24~48h，搅拌反应完毕，加入1~3mL水合肼，然后再搅拌反应24~48h，反应完毕利用外部强力磁铁收集黑色沉淀物，黑色沉淀物用丙酮水溶液洗涤，除去未反应完全的双羧基聚乙二醇，黑色沉淀物在30~50℃下真空干燥12~24h，得到柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子；c、Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备：将10~30mg上述柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子溶于5~10mL甲醇溶液中，再边搅拌边加入5~10mg阿霉素，室温下搅拌反应48~96h，反应完毕用磁铁外部沉降，沉淀物用丙酮水溶液洗涤，然后在30~50℃下真空干燥12~24h，得到Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物。与现有技术相比，本专利技术的优点在于一种Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法，先用FeCl2·4H2O、FeCl3·6H2O和柠檬酸为原料，在氨水、水合肼和水为反应媒介下，反应和干燥得到柠檬酸修饰的Fe3O4纳米粒子，然后在偶联剂和水合肼作用下与双羧基聚乙二醇反应和干燥，得到檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子，然后在甲醇溶液中与阿霉素反应，干燥后得到得到Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物；先用柠檬酸修饰Fe3O4可以提高其分散性和水溶性，然后用双羧基聚乙二醇修饰Fe3O4可以使双羧基聚乙二醇通过表面羧基与柠檬酸羟基成酯连接到Fe3O4磁性纳米粒子表面，并在水合肼作用下能形成成酰肼，阿霉素可以在酰肼作用下，腙键键合在柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子中，这样反应设计合理，可以得到磁靶向和酸敏感双重作用机制联合的Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物，载药能力高达89%，具有良好的超顺磁性能（饱和磁化率达到68.3emu/g）和pH敏感的药物，在给药中，腙键逐渐解键，药物缓慢释放，大大增加药物作用部位如细胞质和细胞核中的浓度，克服肿瘤的耐药性，减少化疗药物的毒副作用。因此本专利技术是一种具有良好的超顺磁性能和酸敏感的药物缓释行为的Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术作进一步详细描述。实施例1量取5~10mL氨水和2~5mL水合肼，50~70mL去离子水溶解于三颈瓶中，升温至80~100℃，再称取1~2gFeCl2·4H2O和2~3gFeCl3·6H2O，溶于20~30mL水中，加入到三颈瓶中形成反应溶液体系反应，到溶液体系变为黑色，80~95℃强力搅拌30~60min，然后在溶液pH在9~10下，边搅拌边滴加浓度为0.3g/mL的柠檬酸10~20mL，滴加完毕继续搅拌1.5~2h，冷却至室温后，利用外部强力磁铁收集黑色产物，所得产物用去离子水和丙酮混合液洗涤数遍，除去未反应完全的柠檬酸，黑色产物30~50℃下真空干燥12~24h，制得柠檬酸修饰的四氧化三铁（Fe3O4）纳米粒子。取5~10g柠檬酸修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子超声分散于20~40mL水中，使得成均匀分散体系，再称取8~15gDCC和3~8gDMAP偶联剂，在超声作用下缓慢滴加，然后加入5~10mg双羧基聚乙二醇（COOH-PEG-COOH），加入完毕超声30~60min后转入两颈瓶中，室温下搅拌反应24~48h，搅拌反应完毕，加入1~3mL水合肼，然后再搅拌反应24~48h，反应完毕利用外部强力磁铁收集黑色沉淀物，黑色沉淀物用丙酮水溶液洗涤，除去未反应完全的双羧基聚乙二醇，黑色沉淀物在30~50℃下真空干燥12~24h，得到柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子。将10~30mg上述柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子溶于5~10mL甲醇溶液中，再边搅拌边加入5~10mg阿霉素，室温下搅拌反应48~96h，反应完毕用磁铁外部沉降，沉淀物用丙酮水溶液洗涤，然后在30~50℃下真空干燥12~24h，得到Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物。经测定饱和磁化率达到68.3emu/g，载药能力高达89%。实施例2精密称取具有最大载药率的Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物适量分散于pH=7.4的PBS缓冲溶液中，溶液体积为2~4mL，置于透析袋中，投于装有8~10mL的棕色小瓶中，3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Fe

【技术特征摘要】
1.一种Fe3O4表面双修饰的阿霉素靶向药物的制备方法，其特征在于步骤如下：a、柠檬酸修饰的四氧化三铁纳米粒子的制备：在三颈瓶中加入5~10mL氨水、2~5mL水合肼和50~70mL去离子水，升温至80~100℃反应温度，加入由1~2gFeCl2·4H2O和2~3gFeCl3·6H2O溶于20~30mL水中的溶液，搅拌反应至反应液变为黑色，再搅拌反应30~60min，然后在反应液pH9~10条件下，边搅拌边滴加浓度为0.3g/mL的柠檬酸10~20mL，柠檬酸滴加完毕，在85~95℃反应温度下，搅拌反应1.5~2h，冷却至室温，利用外部强力磁铁收集黑色沉淀物，黑色沉淀物用丙酮水溶液洗涤，除去未反应完全的柠檬酸，黑色沉淀物在30~50℃下真空干燥12~24h，得到柠檬酸修饰的四氧化三铁纳米粒子；b、柠檬酸/聚乙二醇双修饰的四氧化三铁纳米粒子的制备：在超声作用下，将5~10g上述柠檬酸修饰的四氧...

【专利技术属性】
技术研发人员：季帆，张剑锋，张坤，张婷婷，
申请(专利权)人：宁波大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33