用于治疗癌症和炎症性疾病的偶联物和前药制造技术

本发明专利技术涉及癌症和炎症性疾病的领域。更具体地说，本发明专利技术的目的是提出属于多拉司他汀家族并且具有下式的活性成分的新颖的偶联形式：还涉及这些偶联物的前药形式。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及癌症和炎症性疾病的领域。更具体地说，本专利技术的目的是提出属于多拉司他汀家族的活性成分的新颖的偶联形式(conjugatedform)。
技术介绍
癌症和炎症性疾病是当前最常见的病理疾病。具体地，目前癌症是法国和大多数工业化国家的死亡率的主要原因之一。在可以设想的各种治疗模式中，化疗是能够用于对抗循环肿瘤如淋巴瘤和白血病，和转移瘤的唯一一种。可以在化疗中设想的活性剂是某些天然的肽类，例如，特别是，多拉司他汀10，从海洋世界衍生的线性天然化合物，由四个氨基酸形成，其中三个是其特有的。多拉司他汀10的合成衍生物目前也是可以获得和首选的。尤其是澳瑞他汀(auristatin)PE，澳瑞他汀E或单甲基澳瑞他汀E(MMAE)。多拉司他汀，澳瑞他汀E及其衍生物具有抑制微管蛋白聚合和因此防止细胞分裂(抗有丝分裂)的性质。然而，不幸的是，类似于临床使用的其它抗癌活性剂，多拉司他汀家族的这些活性剂缺乏令人满意的对肿瘤细胞的选择性。事实上，它们还针对健康组织。这种非选择性的破坏导致严重的副作用并在大多数情况下导致治疗的过早停滞。因此，能够选择性地破坏肿瘤而不影响健康器官的新的抗癌剂的开发代表了对抗癌症的主要关注。为了克服这种选择性的缺乏而保留的其中一个方法基于这些活性剂的偶联物的开发。因而，这些偶联物(conjugate)，也被称为前药，通常通过将考虑中的活性剂与实体接枝获得，所述实体的功能是当活性剂为前药形式时将其灭活，将其运送到靶组织或细胞，并促使其在所述靶组织或细胞处释放，然后重新建立其治疗的生物活性。这种方法更具体地是基于肿瘤组织特有的特异性的观察。因此，已知的是，肿瘤微环境与健康组织的区别在于更酸性的pH，更大的还原电位，增加的对大分子的渗透性，或是相对高浓度的某些酶的存在，例如，β-葡糖醛酸酶。同样地，已经显示，患病的组织与健康组织的区别在于恶性细胞在使其区别于健康细胞的表面膜受体或抗原如叶酸受体或CD33抗原处过表达。因此，已经开发了常规的活性剂的衍生物以利用这些差异实现增加，尤其是，它们对肿瘤细胞的选择性的目的。因此，单甲基澳瑞他汀E(MMAE)已通过可裂解臂与抗-CD30抗体偶联(US7829531)。然而，这样的偶联物对其靶点具有太大的特异性并证明对于非CD30依赖性的癌症和/或炎症性疾病勉强有效或甚至无效。Teming等人(2006，BioconjugateChem)已经通过可切割的连接将单甲基澳瑞他汀E(MMAE)分子偶联到白蛋白单元，以靶向肿瘤组织。最近，Legigan等人(2013，Eur.J.Med.Chem.)和Tranoy-Opalinski等人(2014，Eur.J.Med.Chem.)已通过自反应臂将单甲基澳瑞他汀E(MMAE)分子偶联到葡糖醛酸单元。MMAE的该偶联形式，也被称为前药，是无效的，并且只有在肿瘤水平通过β-葡糖醛酸酶的裂解，其主要是细胞外的，使得MMAE能够执行其抗有丝分裂的生物活性。然而，观察到肾脏快速消除这种前药。由于该前药的半衰期显著降低，结果是必须增加剂量，这伴随有害的副作用。Legigan等人(2012，Angew.Chem.Int.Ed.)还提出了用半乳糖苷基和结合叶酸受体的基团双官能化的单甲基澳瑞他汀E(MMAE)，这两个基团由自反应臂承载。然而，这种前药在通过细胞内β-半乳糖苷酶裂解并释放单甲基澳瑞他汀E(MMAE)之前需要细胞内化步骤。因此，虽然单甲基澳瑞他汀E的这些前药形式被特异性地运送到肿瘤，然而它们的细胞毒效力仍然是相对的，并且不使人们有可能设想肿瘤的有效的临床治疗。因此，仍然需要一种能够以非常高的特异性并且以非活性形式运送这种类型的活性剂到患病的组织或细胞的多拉司他汀家族的前药。还需要一种在肿瘤微环境的水平下特异性地有效表达细胞毒性的多拉司他汀家族的前药。还需要这样一种多拉司他汀家族的前药，其肿瘤效力不需要过量的活性剂，以防止特别是对健康的细胞，组织或器官的有害的副作用的发生。
技术实现思路
本专利技术的目的正是为满足这些需求。根据第一个方面，本专利技术涉及通式(I)的偶联物：其中：-A代表多拉司他汀家族或其衍生物的基团(radical)，-L代表能够与氨基，羟基或硫醇官能团，优选硫醇官能团反应的基团，-G包括并优选代表葡糖醛酸(glucuronyl)基或其衍生物，-Y代表H或吸电子基，尤其是选自NO2，CF3和卤素，-R1和R2彼此独立地代表H或直链或支链，饱和或不饱和的C1至C10烷基，-Z代表基于烃的间隔基团，在其每一端包括共价键官能团，-X代表-O-或-NR3COO-，其中R3可能代表氢原子或直链或支链，饱和或不饱和C1至C10烷基，与G基团的键由氧原子(-O)提供，其异构体和/或其药学上可接受的盐。出乎意料的是，本专利技术人实际上观察到通式(I)的并且从单甲基澳瑞他汀E衍生的偶联物相比于非官能化的单甲基澳瑞他汀E具有显著改善的体内治疗效果。因此，经证明根据本专利技术的偶联物在其选择性和其治疗剂量方面对于临床治疗癌症特别有利。根据第二方面，本专利技术涉及一种前药或它们的衍生物，所述前药包括根据本专利技术的通式(I)的偶联物的至少一种分子，所述偶联物的所述分子通过共价键与白蛋白分子(特别是内源性的白蛋白分子)连接。如下文详述的，根据本专利技术的偶联物的化学结构最特别适合于与白蛋白分子，特别是内源性的白蛋白分子，更尤其是血清白蛋白分子相互作用。甚至更具体地，这种相互作用特别建立在体内，并且通过促成对内源性白蛋白的34位的半胱氨酸的硫原子具有亲和性的类型的L基团实现。与半胱氨酸的硫原子的相互作用可尤其来自迈克尔反应。经由迈克尔反应的偶联物分子和白蛋白分子之间的共价连接的建立从而使得有可能利用白蛋白在肿瘤微环境中积累的现象并获得根据本专利技术的偶联物的改进的靶向。根据另一个方面，本专利技术还涉及一种药物组合物，其包含至少有效量的至少一种根据本专利技术的通式(I)的偶联物，或所述偶联物的耦合形式，其中后者与至少一个白蛋白分子耦合，并且优选通式(VI)的前药，如根据本专利技术限定的。根据另一个方面，本专利技术涉及根据本专利技术的通式(I)的偶联物，其用于预防和/或治疗癌症和/或炎症性疾病。根据另一个方面，本专利技术涉及所述偶联物的耦合形式，其中所述偶联物与至少一个白蛋白分子耦合，并且优选根据本专利技术的通式(VI)的前药，其用于预防和/或治疗癌症和/或炎症性疾病。根据另一个方面，本专利技术涉及根据本专利技术的组合物，其用于预防和/或治疗癌症和/或炎症性疾病。根据另一个方面，本专利技术涉及一种用于治疗癌症和/或炎症性疾病的方法，其包括施用根据本专利技术的通式(I)的偶联物。根据另一个方面，本专利技术还涉及一种用于治疗癌症和/或炎症性疾病的方法，其包括施用所述偶联物的耦合形式，其中所述偶联物与至少一个白蛋白分子耦合，特别是根据本专利技术的通式(VI)的前药。最后，根据最后一个方面，本专利技术还涉及一种用于治疗癌症和/或炎症性疾病的方法，其包括施用根据本专利技术的药物组合物。附图说明图1示出了用于式(III)的偶联物的合成的反应方案。图2示出在小鼠中原位移植的MiaPaca型的胰腺的人类肿瘤的体积的演变。在移植后在D7和D14两次注射非官能化的MMAE(0.3mg/kg)或式(Ⅲ)的偶联物，即双官能化本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式(I)的偶联物：其中：‑A代表多拉司他汀家族或其衍生物的基团，‑L代表能够与氨基，羟基或硫醇官能团，且优选硫醇官能团反应的基团，‑G包括并优选代表葡糖醛酸基或其衍生物，‑Y代表H或吸电子基，尤其是选自NO2，CF3和卤素，‑R1和R2彼此独立地代表H或直链或支链，饱和或不饱和的C1至C10烷基，‑Z代表基于烃的间隔基团，在其每一端包括共价键官能团，‑X代表‑O‑或‑NR3COO‑，其中R3可能代表氢原子或直链或支链，饱和或不饱和C1至C10烷基，与G基团的键由氧原子(‑O)提供，其异构体和/或其药学上可接受的盐。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.07 FR 14509561.通式(I)的偶联物：其中：-A代表多拉司他汀家族或其衍生物的基团，-L代表能够与氨基，羟基或硫醇官能团，且优选硫醇官能团反应的基团，-G包括并优选代表葡糖醛酸基或其衍生物，-Y代表H或吸电子基，尤其是选自NO2，CF3和卤素，-R1和R2彼此独立地代表H或直链或支链，饱和或不饱和的C1至C10烷基，-Z代表基于烃的间隔基团，在其每一端包括共价键官能团，-X代表-O-或-NR3COO-，其中R3可能代表氢原子或直链或支链，饱和或不饱和C1至C10烷基，与G基团的键由氧原子(-O)提供，其异构体和/或其药学上可接受的盐。2.根据权利要求1所述的偶联物，其中，Y代表X的邻位的NO2，并且R1和R2代表H。3.根据权利要求1或2所述的偶联物，其中，A代表从多拉司他汀10，从澳瑞他汀PE，从澳瑞他汀E，从单甲基澳瑞他汀E及其衍生物衍生的基团，优选从单甲基澳瑞他汀E或其衍生物衍生的基团。4.根据权利要求1至3中任一项所述的偶联物，其中，L包括能够与大分子携带的游离的氨基，羟基或硫醇官能团，优选游离的硫醇官能团反应的单元。5.根据权利要求1至4中任一项所述的偶联物，其中，L代表马来酰亚胺基己酰基类型的单元。6.根据权利要求1至5中任一项所述的偶联物，其中，Z代表-Z1-Z2-(Z3)m基团，其中：-m代表0或1，-Z1代表带有R1和R2官能团的碳和Z2官能团之间的L点击连接官能团，-Z2代表直链或支链、饱和或...

【专利技术属性】
技术研发人员：塞巴斯蒂安·帕波，伊莎贝尔·奥帕林斯基，布丽奇特·勒努，蒂博·莱吉甘，
申请(专利权)人：国家科学研究中心，普瓦捷大学，
类型：发明
国别省市：法国;FR