一种用于免疫层析试纸条的包被液及其制备方法技术

本发明专利技术公开一种用于免疫层析试纸条的包被液及其制备方法，所述包被液包括如下按重量分数计的各组分：BSA 0.5％‑2％；海藻糖0.5％‑2％；蔗糖1％‑5％；NaN3 0.05％‑0.1％；余量的缓冲液。本发明专利技术提供了一种用于免疫层析试纸条的包被液；通过添加较高浓度的BSA封闭硝酸纤维素膜；添加较高含量的蔗糖和一定量的海藻糖能够保护抗体；本发明专利技术所提供的包被液具有灵敏度高、有效期长的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医学检验领域，具体地，涉及一种免疫层析试纸条的包被缓冲液及其制备方法。
技术介绍
在制备免疫层析试纸条的过程中，包被缓冲液用于包被抗体包被在硝酸纤维素膜上，能有效保护抗体的效价和减少抗体的非特异结合，提高免疫层析试纸条的稳定性和分辨率。目前，在免疫层析试纸条的制备上，都是采用传统的包被缓冲液将抗体包被在硝酸纤维素膜上，烘干后再用封闭液对包被膜进行封闭。传统的包被缓冲液的配方为：1％BSA，余量为0.025M、pH＝7.4的PBS。使用传统的包被缓冲液存在以下缺陷：(1)抗体包被于硝酸纤维素膜后，需再配制封闭液对其进行封闭，操作步骤繁琐，增加成本，延长生产时间。(2)抗体一经包被固化后，抗体效价降低，反应荧光信号大幅下降，从而使整个试剂的检测灵敏度和精密度降低，有效期缩短。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种用于免疫层析试纸条的包被液；本专利技术所添加的BSA含量较传统配方含量高，对硝酸纤维素膜起到一定程度的封闭作用；添加较高含量的蔗糖和一定量的海藻糖能够保护抗体；有利于提高试剂测试的灵敏度和延长试剂有效期。本专利技术的第二个目的是为了提供一种上述用于免疫层析试纸条的包被液的制备方法。实现本专利技术的目的可以通过采取如下技术方案达到：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：优选地，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液或者磷酸盐缓冲液。优选地，所述缓冲液的浓度为10mM-50mM。优选地，所述缓冲液的pH值为7.0–7.4。优选地，所述的包被液包括如下按重量分数计的各组分：所述磷酸盐缓冲液的浓度为10mM-50mM，pH为7.0-7.4。优选地，所述的包被液包括如下按重量分数计的各组分：所述磷酸盐缓冲液的浓度为30mM，pH为7.2。优选地，所述的包被液包括如下按重量分数计的各组分：所述磷酸盐缓冲液的浓度为30mM，pH为7.4。本专利技术还提供一种用于免疫层析试纸条的包被液的制备方法，包括如下步骤：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.0-7.4；3)采用滤膜过滤除菌获得包被液。优选地，步骤3)所述滤膜的过滤孔径为0.22～0.25μm。优选地，步骤2)所述的pH为7.2；步骤3)所述的滤膜的孔径为0.22μm。相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：1、本专利技术的包被缓冲液配方中，BSA含量较传统配方含量高，对硝酸纤维素膜起到一定程度的封闭作用，节省了包被膜再封闭的步骤，可显著降低抗体与样品发生非特异反应，从而有利于提高测试的精密度和灵敏度。2、本专利技术的包被缓冲液加入了较高含量的蔗糖和一定量的海藻糖，能进一步提高抗体耐热能力，有保护包被抗体效价的作用，可显著降低抗体包被后，效价和反应荧光信号大幅下降的问题，从而有利于提高试剂测试的灵敏度和延长试剂有效期。附图说明图1为用实施例1包被液制备的CRP定量检测免疫层析试纸条的检测结果。图2为用实施例2包被液制备的CRP定量检测免疫层析试纸条的检测结果。图3为用实施例3包被液制备的CRP定量检测免疫层析试纸条的检测结果。图4为用传统技术的包被液制备的CRP定量检测免疫层析试纸条的检测结果。具体实施方式下面，结合附图以及具体实施方式，对本专利技术做进一步描述：实施例1：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为磷酸盐缓冲液，浓度为10mM，pH为7.0。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.0；3)采用孔径为0.22μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例2：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为Tris-HCl缓冲液，浓度为50mM，pH为7.2。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.2；3)采用孔径为0.22μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例3：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液的浓度为30mM，pH为7.2。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.2；3)采用孔径为0.23μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例4：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为磷酸盐缓冲液，浓度为20mM，pH为7.2。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.2；3)采用孔径为0.22μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例5：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为磷酸盐缓冲液，浓度为20mM，pH为7.4。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.4；3)采用孔径为0.25μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例6：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为Tris-HCl缓冲液，浓度为50mM，pH为7.4。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.4；3)采用孔径为0.22μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。实施例7：一种用于免疫层析试纸条的包被液，包括如下按重量分数计的各组分：所述缓冲液为缓冲液为磷酸盐缓冲液，浓度为30mM，pH为7.4。所述的包被液由以下方法制备而成：1)用纯水配置缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA、海藻糖、蔗糖、NaN3，溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.4；3)采用孔径为0.25μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。对比例11％BSA，余量为0.025M、pH＝7.4的磷酸盐缓冲液。制得传统技术的包被液。本对比例所述的包被液由一下方法制得：1)用纯水配置磷酸盐缓冲液作为基础液；2)称取配方量的BSA溶于配方量的基础液中，混匀，调节pH至7.4；3)采用孔径为0.22μm孔径的滤膜过滤除菌获得包被液。验证实施例以CRP定量检测免疫层析试纸条为例来说明本专利技术的包被液与传统技术的包被液灵敏度、精密度和稳定性对比。所述CRP定量检测免疫层析试纸条包括底衬及设在所述底衬上的包被膜，所述包被膜的两端分别搭接有样品垫和吸水纸，所述样品垫上喷有荧光胶乳标记CRP单克隆抗体和兔IgG抗体，包被膜上设置有包被线区，所述包被线区包括从靠近所述样品垫端至靠近所述吸水纸端依次平行设置的包被羊抗兔IgG抗体的质控线、包被能与待检抗原CRP特异性结合的另一株CRP单克隆抗体的检测线。C本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于包括如下按重量分数计的各组分：

【技术特征摘要】
1.一种用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于包括如下按重量分数计的各组分：2.根据权利要求1所述的用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于：所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液或者磷酸盐缓冲液。3.根据权利要求1所述的用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于：所述缓冲液的浓度为10mM-50mM。4.根据权利要求3所述的用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于：所述缓冲液的pH值为7.0–7.4。5.根据权利要求1所述的用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于包括如下按重量分数计的各组分：所述磷酸盐缓冲液的浓度为10mM-50mM，pH为7.0-7.4。6.根据权利要求1所述的用于免疫层析试纸条的包被液，其特征在于包括如下按重量分数计的各组分：所述磷酸盐缓冲液的浓度为30mM，...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈洁娜，何明深，
申请(专利权)人：广州科方生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44