定量检测Lp‑PLA2的时间分辨荧光免疫分析试纸条及其制备方法技术

技术编号:15704212 阅读:149 留言:0更新日期:2017-06-26 06:17
本发明专利技术公开了一种定量检测Lp‑PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,包括底板以及依次粘覆在底板上相互交错排列的样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸,结合垫上包被有稀土离子微球标记的Lp‑PLA2单克隆抗体I和稀土离子微球标记的鸡IgY抗体,包被膜上包被有检测带和质控带,检测带固定有识别不同抗原表位的Lp‑PLA2单克隆抗体II,质控带固定有羊抗鸡IgY抗体。本发明专利技术的试纸条具有操作简便,适合大规模生产,能够快速精确的测定Lp‑PLA2的含量。

【技术实现步骤摘要】
定量检测Lp-PLA2的时间分辨荧光免疫分析试纸条及其制备方法
本专利技术涉及医学检验领域,具体涉及一种可定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的时间分辨荧光免疫分析试纸条及其制备方法。
技术介绍
脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)是磷脂酶A2超家族的一个亚类,又称血小板活化因子乙酰水解酶,分子量45kDa,是一种Ca2+依赖性蛋白质。血液中的Lp-PLA2主要由单核/巨噬细胞、T淋巴细胞和肥大细胞分泌,在动脉粥样斑块内的巨噬细胞也能产生Lp-PLA2。血液循环中的约80%的Lp-PLA2黏附在低密度脂蛋白(LDL)上,并且和低密度脂蛋白一起转运到血管内膜。一小部分Lp-PLA2与高密度脂蛋白(HDL)、超低密度脂蛋白(VLDL)和脂蛋白a[Lp(a)]结合。Lp-PLA2能够水解氧化低密度脂蛋白,导致动脉粥样硬化部分产生大量的溶血卵磷脂和游离的氧化脂肪酸等水解产物,后两者在动脉粥样硬化斑块病变发展和坏死核心形成中起到重要作用。引起单核细胞趋化,内皮功能障碍,诱导内皮细胞表达白细胞黏附因子、血小板源性生长因子和表皮生长因子,这些物质可通过趋化炎症细胞进一步产生自我强化的循本文档来自技高网...
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【技术保护点】
一种定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp‑PLA2)时间分辨荧光免疫分析试纸条,包括底板以及依次粘覆在所述底板上相互交错排列的样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸,其特征在于,所述结合垫上包被有稀土离子微球标记的Lp‑PLA2单克隆抗体I和稀土离子微球标记的鸡IgY抗体,所述包被膜上包被有检测带和质控带,所述检测带固定有识别不同抗原表位的Lp‑PLA2单克隆抗体II,所述质控带固定有羊抗鸡IgY抗体。

【技术特征摘要】
1.一种定量检测脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)时间分辨荧光免疫分析试纸条,包括底板以及依次粘覆在所述底板上相互交错排列的样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸,其特征在于,所述结合垫上包被有稀土离子微球标记的Lp-PLA2单克隆抗体I和稀土离子微球标记的鸡IgY抗体,所述包被膜上包被有检测带和质控带,所述检测带固定有识别不同抗原表位的Lp-PLA2单克隆抗体II,所述质控带固定有羊抗鸡IgY抗体。2.根据权利要求1所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述结合垫为聚酯膜。3.根据权利要求1所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述包被膜为硝酸纤维素膜。4.根据权利要求1所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述检测带和所述质控带相互平行,所述检测带靠近所述结合垫,所述质控带靠近所述吸水纸。5.根据权利要求1所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述试纸条还包括一壳体,所述试纸条装入壳体内,露出样品垫、结合垫、包被膜上的检测带和质控带、以及吸水垫。6.根据权利要求1所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述稀土离子微球为用于标记的任何镧系金属元素微球。7.根据权利要求6所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条,其特征在于,所述稀土离子微球表面带有活性基团,且所述稀土离子微球的直径为100-300nm。8.一种根据权利要求1-7中任一项所述一种定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)、在包被膜的不同位置分别固定Lp-PLA2单克隆抗体II和羊抗鸡IgY抗体,形成检测带和质控带;(2)制备稀土离子微球标记的Lp-PLA2单克隆抗体I和稀土离子微球标记的鸡IgY抗体,并喷涂在结合垫上;(3)在底板上依次相互交错的黏贴上样品垫、结合垫、包被膜和吸水纸,然后装入壳体。9.根据权利要求8所述定量检测Lp-PLA2时间分辨荧光免疫分析试纸条的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述包被膜的制备方法为:使用含有1%-10%蔗糖的0.01-0.02mol/L的pH为7.2-7.6的磷酸盐缓冲液,分别将Lp-PLA2单克隆抗体II和羊抗鸡IgY抗体稀释到1mg/mL-1.5mg/mL的浓度,使用定量喷膜仪以1μL/cm-2μL/cm的量将二者以0.5cm-1.0cm的间隔喷于包被膜上,35-38℃烘干1-2h,加入干燥剂封存备用。1...

【专利技术属性】
技术研发人员:陶剑周颖兰成杰高玉兰
申请(专利权)人:天津欧尔克医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:天津,12

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