抑制嘌呤吸收的乳酸菌及其用途制造技术

提供了用于抑制嘌呤吸收的乳酸菌及其用途。本发明专利技术涉及筛选具有增强的将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的能力的乳酸菌的方法，所述方法包括在包含腺嘌呤、5‑磷酸‑D‑核糖‑1‑二磷酸和Mg2+的溶液中培养乳酸菌，以及将产生的将腺嘌呤转化成腺苷酸的活性与加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC 33323菌株的活性比较作为该能力的指标；用于将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的转化剂，所述转化剂包含根据所述方法可得的乳酸菌作为活性组分，及所述转化剂的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及抑制嘌呤吸收的乳酸菌及其用途。
技术介绍
最近几年在日本，随着饮食的改变，患有痛风的患者或高尿酸血症个体的数目每年增加。高尿酸血症包括尿酸的减少的排泄或过量尿酸的产生，并且血清尿酸水平的增加经常诱发痛风，其发展成伴随剧痛的急性关节炎。当前在日本，估计患有痛风的患者的数目是一百万，并且估计高尿酸血症个体的数目是一千万。现在，主要通过饮食疗法、运动疗法和药物治疗的组合，控制血清尿酸水平预防或治疗高尿酸血症。饮食疗法中，通过限制卡路里的摄取量减少最终降解形成尿酸的膳食嘌呤的摄取量。然而，继续严格限制卡路里的摄取量不一定容易。因此，需要用于痛风或高尿酸血症的更加有效的治疗方法。对于痛风或高尿酸血症，还需要对症状的预防或缓解有效的食物产品的开发。已经报道了在减少高尿酸血症中的血清尿酸水平中示出疗效的微生物和发酵产品(专利文献1至5)。专利文献1，例如，公开了，乳酸菌具有将嘌呤核苷降解成嘌呤碱基的高的能力。专利文献4和5，例如，公开了，乳酸菌具有降解嘌呤的能力。已经相信这些具有减少血清尿酸水平作用的常规的微生物和发酵产品，通过促进肠道中的嘌呤核苷转化成嘌呤碱基，抑制嘌呤吸收或促进嘌呤排泄，即将易于从肠道吸收的嘌呤核苷转化成从肠道吸收不良的嘌呤碱基。然而，对人类测试结果几乎没有可得的报道，并且获得具有减少血清尿酸水平作用的乳酸菌的有效的方法是未知的。引用列表专利文献专利文献1：日本专利公布(Kokai)号2008-005834A专利文献2：国际公布号WO2011/102310专利文献3：国际公布号WO2004/112809专利文献4：国际公布号WO2008/129802专利文献5：日本专利公布(Kokai)号2013-048636A专利技术概述技术问题本专利技术的目标是提供抑制嘌呤吸收的乳酸菌及其用途。问题解决方案为了解决以上描述的问题，作为本专利技术人的深入研究的结果，他们发现，乳杆菌属(Lactobacillus)属的某些细菌物种具有将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的高能力，从而完成了本专利技术。即，本专利技术包括以下。[1]筛选具有将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的增强的能力的乳酸菌的方法，所述方法包括在含有腺嘌呤、5-磷酸-D-核糖-1-二磷酸和Mg2+的溶液中培养乳酸菌，以及将产生的将腺嘌呤转化成腺苷酸的活性与加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)ATCC33323菌株的活性比较作为所述能力的指标。[2]根据以上[1]所述的方法，所述方法还包括测量5’-核苷酸酶活性，及选择与加氏乳杆菌ATCC33323菌株相比具有降低的5’-核苷酸酶活性的乳酸菌。[3]根据以上[1]或[2]所述的方法，其中所述乳酸菌是乳杆菌属(Lactobacillus)细菌。[4]根据以上[1]至[3]中任一项所述的方法，其中所述溶液是缓冲溶液。[5]用于将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的转化剂，所述转化剂包括通过根据以上[1]至[4]中任一项所述的方法可获得的乳酸菌作为活性组分。[6]根据以上[5]所述的转化剂，其用于在将腺嘌呤转化成腺苷酸或将鸟嘌呤转化成鸟苷酸中使用。[7]根据以上[5]或[6]所述的转化剂，其中所述乳酸菌是加氏乳杆菌OLL2959菌株(登录号：NITEBP-224)。[8]一种食物或饮料产品或药物制剂，所述食物或饮料产品或药物制剂包含根据以上[5]至[7]中任一项所述的转化剂。[9]根据以上[8]所述的食物或饮料产品或药物制剂，其用于在降低血清尿酸水平中使用。[10]根据以上[9]所述的食物或饮料产品或药物制剂，其中降低血清尿酸水平包括在肠道中促进腺嘌呤到腺苷酸的转化和促进鸟嘌呤到鸟苷酸的转化。[11]根据以上[9]或[10]所述的食物或饮料产品或药物制剂，其用于在向具有6至8mg/dL血清尿酸水平的人类受试者施用中使用。[12]根据以上[8]至[11]中任一项所述的食物或饮料产品或药物制剂，包含每剂量1x108至1010cfu的以上描述的乳酸菌。[13]从嘌呤碱基产生嘌呤核苷酸的方法，包括在5-磷酸-D-核糖-1-二磷酸和Mg2+的存在下，将根据以上[5]至[7]中任一项所述的转化剂与嘌呤碱基反应。[14]根据以上[13]所述的方法，其用于从腺嘌呤产生腺苷酸或用于从鸟嘌呤产生鸟苷酸。专利技术的有益效果通过使用根据本专利技术的乳酸菌或转化剂，可将嘌呤碱基有效地转化成嘌呤核苷酸，从而降低向其施用乳酸菌或转化剂的受试者中的血清尿酸水平。本说明书包括日本专利申请号2014-134973、2014-234050和2015-064201的内容，本申请从其要求优先权。附图简述[图1]图1是示出用加氏乳杆菌OLL2959菌株获得的从腺嘌呤到AMP的转化率(AMP/腺嘌呤转化率)随着时间变化的图。[图2]图2是示出用加氏乳杆菌OLL2959菌株获得的从鸟嘌呤到GMP的转化率(GMP/鸟嘌呤转化率)随着时间变化的图。[图3]图3是示出加氏乳杆菌OLL2959菌株的嘌呤核苷酶活性的图。左侧柱示出从腺苷到腺嘌呤的转化率，中央柱示出从肌苷到次黄嘌呤的转化率，及右侧柱示出从鸟苷到鸟嘌呤的转化率。[图4]图4是示出加氏乳杆菌OLL2959菌株的5'-核苷酸酶活性的图。左侧柱示出从AMP到腺苷的转化率，中央柱示出从IMP到肌苷的转化率，及右侧柱示出从GMP到鸟苷的转化率。[图5]图5是示出连续摄取加氏乳杆菌OLL2959菌株的人类受试者中血清尿酸水平随着时间变化的图。[图6]图6示出摄取用于研究的食物产品之后(从摄取前检查到在第8周的检查)，每个受试者中血清尿酸水平的变化率。[图7]图7是示出加氏乳杆菌OLL2959菌株的嘌呤摄取能力的图。[图8]图8是示出在嘌呤的存在下加氏乳杆菌OLL2959菌株的增殖能力的图。[图9]图9示出多个乳酸菌菌株的腺嘌呤摄取能力。[图10]图10是示出在腺嘌呤的存在下多个乳酸菌菌株的增殖能力的图。[图11]图11是示出在向其同时施用加氏乳杆菌OLL2959菌株和嘌呤的动物中加氏乳杆菌OLL2959菌株的嘌呤摄取能力的图。[图12]图12是示出比较乳酸菌菌株的物种间的腺嘌呤摄取能力的结果的图。[图13]图13是示出比较乳酸菌菌株的物种间在腺嘌呤的存在下乳酸菌菌株的增殖能力的结果的图。实施方案的描述在下文中，将详细描述本专利技术。“嘌呤”共同地指具有嘌呤骨架并且被分类为嘌呤碱基、嘌呤核苷和嘌呤核苷酸的物质。嘌呤主要在活体细胞中起着多种功能，并且作为核酸的成分发挥例如传递遗传信息的作用。主要的嘌呤碱基的实例包括腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤。嘌呤核苷是其中糖与嘌呤碱基结合的化合物，并且其实例包括其中核糖与嘌呤碱基结合的腺苷、鸟苷、肌苷和黄苷；和其中脱氧核糖与嘌呤碱基结合的脱氧腺苷、脱氧鸟苷、脱氧肌苷和脱氧黄苷。嘌呤核苷酸是其中磷酸与嘌呤核苷结合的化合物，并且其实例包括腺苷酸(AMP)、鸟苷酸(GMP)、肌苷酸(IMP)和黄苷酸(XMP)。嘌呤从食物通过肠道吸收供给身体作为饮食嘌呤，或是从氨基酸等经由从头途径从头生物合成。嘌呤还经由补救途径生物合成，通过其由嘌呤核苷酸的降解产生的嘌呤碱基被循环利用以合成嘌呤核苷酸。在人类的情况中，嘌呤核苷酸最终代谢成尿酸。例如，腺苷酸通过5’-核苷酸酶(5’-NT)活性代谢成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种筛选具有将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的增强的能力的乳酸菌的方法，所述方法包括在含有腺嘌呤、5‑磷酸‑D‑核糖‑1‑二磷酸和Mg2+的溶液中培养乳酸菌，以及将产生的将腺嘌呤转化成腺苷酸的活性与加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)ATCC 33323菌株的活性比较作为所述能力的指标。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.06.30 JP 2014-134973;2014.11.18 JP 2014-234051.一种筛选具有将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的增强的能力的乳酸菌的方法，所述方法包括在含有腺嘌呤、5-磷酸-D-核糖-1-二磷酸和Mg2+的溶液中培养乳酸菌，以及将产生的将腺嘌呤转化成腺苷酸的活性与加氏乳杆菌(Lactobacillusgasseri)ATCC33323菌株的活性比较作为所述能力的指标。2.根据权利要求1所述的方法，所述方法还包括测量5’-核苷酸酶活性，及选择与加氏乳杆菌ATCC33323菌株相比具有降低的5’-核苷酸酶活性的乳酸菌。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述乳酸菌是乳杆菌属(Lactobacillus)细菌。4.根据权利要求1至3中的任一项所述的方法，其中所述溶液是缓冲溶液。5.用于将嘌呤碱基转化成嘌呤核苷酸的转化剂，包含通过根据权利要求1至4中的任一项所述的方法可获得的乳酸菌作为活性组分。6.根据权利要求5所述的转化剂，所述转化剂用于在将腺嘌呤转化成腺苷酸或将鸟嘌呤转化成鸟苷酸中...

【专利技术属性】
技术研发人员：山田成臣，大柴幸男，坪井洋，狩野宏，岩本千鹤，浅见幸夫，伊藤裕之，
申请(专利权)人：株式会社明治，
类型：发明
国别省市：日本;JP