树鼩在制备阿尔茨海默病模型中的应用制造技术

本发明专利技术公开了树鼩在制备阿尔茨海默病模型中的应用。本发明专利技术提供了以下技术方案：S1、树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备阿尔茨海默病动物模型中的应用。S2、树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备具有下述至少一种特性的树鼩疾病模型中的应用：1)胶质细胞增生；2)神经元纤维缠结；3)学习记忆能力下降。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及树鼩在制备动物疾病模型中的应用，特别涉及树鼩在制备阿尔茨海默病模型中的应用。
技术介绍
树鼩(Tupaiabelangeri)属树鼩目树鼩科树鼩属的动物，分布在东南亚各国。在中国大陆，分布于广西、海南、贵州、云南、四川、西藏等地，主要生活于热带和亚热带森林、灌丛、村落附近。阿尔茨海默病(Alzheimer’sDisease,AD)是一种威胁人类健康的神经系统疾病。目前对于AD的治疗还没有十分明确的方法。建立良好的AD动物模型，有助于对AD的病因病机的认识，并可以指导AD的预防和治疗。目前的AD模型按动物种类划分主要有灵长类动物模型和啮齿类动物模型两大类。灵长类动物模型价格十分昂贵，啮齿类动物模型则与人类神经系统差别较大。建立一种费用相对低廉，但是比啮齿类动物更接近人类的动物模型对于AD等神经系统疾病究很有意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何获得费用相对低廉，但是比啮齿类动物更接近人类的阿尔茨海默病动物模型。为了解决以上技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：S1、树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)、鹅膏蕈氨酸(IBO)和戊巴比妥钠在制备阿尔茨海默病动物模型中的应用。S2、树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备具有下述至少一种特性的树鼩疾病模型中的应用：1)胶质细胞增生；2)神经元纤维缠结；3)学习记忆能力下降。S3、树鼩在制备阿尔茨海默病动物模型中的应用。S4、树鼩在制备具有下述至少一种特性的树鼩疾病模型中的应用：1)胶质细胞增生；2)神经元纤维缠结；3)学习记忆能力下降。上述应用中，用于制备阿尔茨海默病动物模型或树鼩疾病模型的树鼩可为雄性。上述应用中，用于制备阿尔茨海默病动物模型或树鼩疾病模型的树鼩的月龄可为3月龄。上述S1或S2的应用中，树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠的配比为1kg体重:1.5g:83μg:83μg:20mg。上述应用均包括：1)连续30天给树鼩给药D-半乳糖，D-半乳糖每天的给药剂量均为50毫克每千克体重，以开始给药D-半乳糖的当天记为第1天，第31天用1％(质量百分含量)戊巴比妥钠溶液进行麻醉，1％戊巴比妥钠溶液的给药剂量为2mL·kg-1体重；2)将β淀粉样蛋白1-42和鹅膏蕈氨酸注入树鼩的海马区，得到所述阿尔茨海默病动物模型或所述树鼩疾病模型；所述β淀粉样蛋白1-42和鹅膏蕈氨酸的给药剂量均为83μg/1kg体重。实验证明，与对照组(给药生理盐水的树鼩)和空白组相比，对树鼩给药D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠得到的树鼩模型(模型组)具有如下阿尔茨海默病表现：学习记忆能力下降，并出现神经胶质细胞增生和神经元纤维缠结。Morris水迷宫测试结果表明模型组树鼩(给药D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠的树鼩)出现了明显的学习记忆功能障碍。病理检测结果表明，模型组树鼩脑海马区出现明显胶质细胞增生和神经元纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFT)，对照组(给药生理盐水的树鼩)和空白组无明显病理改变。树鼩的遗传学研究表明其生物学上比啮齿类动物更接近灵长类动物(LiRX,XuW,WangZ,etal.2012.ProteomiccharacteristicsoftheliverandskeletalmuscleintheChinesetreeshrew(Tupaiabelangerichinensis)[J].ProteinCell,3(9):691-700；许凌,范宇,蒋学龙,等.2013.树鼩进化分类地位的分子证据[J].动物学研究,34(2):70-76)，有着明显大于大鼠的大脑和更高级的神经系统，应用树鼩进行神经系统疾病研究有着良好的前景。但与其他灵长类动物相比，又具有体型小，繁殖能力强的特点，同时，树鼩有着远低于非人灵长类动物的价格，在实验操作上也更为简便。开发树鼩模型，有助于减少非人灵长类动物的实验用量。附图说明图1为树鼩海马HE病理组织图片。A.空白组树鼩海马，未见异常；B.对照组树鼩海马，未见异常；C.模型组树鼩，海马见胶质细胞增生。图2为树鼩海马Bieloschsky镀银法病理组织切片。A.空白组树鼩海马，未见异常；B.对照组树鼩海马，未见异常；C.模型组树鼩，海马见神经元纤维缠结(NFT)。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本专利技术，而不是为了限制本专利技术的范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的树鼩均为滇西亚种。1材料1.1实验动物树鼩(滇西亚种)，雄性，30只，3月龄，体质量120g±10g，昆明医学院实验动物中心提供。实验动物生产许可证号：SCXK(滇)2013-0002。1.2主要试剂和仪器β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)，鹅膏蕈氨酸(ibotenicacid，Ibo)，D半乳糖(D-gal)美国Sigma公司生产；Aβ1-42浓度为2g/L，用灭菌生理盐水配制，在37℃下孵育72h，使其成为凝聚态的Aβ1-42。脑立体定向仪:RWD68002,深圳市瑞沃德生命科技有限公司；微量注射器:上海安亭微量进样器厂；电子天平:ML204，瑞士梅特勒-托利多公司。2方法2.1动物分组将30只树鼩按体重随机分为3组：模型组，对照注射组，空白组，每组10只动物。模型组:给药D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠。树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠的配比为1kg体重:1.5g:83μg:83μg:20mg。对照注射组:操作与模型组相同，所有药物改为生理盐水，注射剂量和部位与模型组相同。空白组，不做任何处理。2.2动物模型的建立:动物实验在广西医科大学实验动物中心进行。实验动物使用许可证号：SYXK桂2009-0004。每只模型组树鼩连续30d腹腔注射D-Gal50mg·(kg·d)-1，使其早衰。第31天用1％(质量百分含量)戊巴比妥钠溶液，2mL·kg-1体重，腹腔注射麻醉。麻醉成功后，将树鼩固定于大鼠脑立体定向仪上。沿头顶部正中切开皮肤暴露矢状缝，以矢状本文档来自技高网...

【技术保护点】
树鼩、D‑半乳糖、β淀粉样蛋白1‑42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备阿尔茨海默病动物模型中的应用。

【技术特征摘要】
1.树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备阿尔
茨海默病动物模型中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述树鼩为雄性。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述树鼩的月龄为3月龄。
4.树鼩、D-半乳糖、β淀粉样蛋白1-42、鹅膏蕈氨酸和戊巴比妥钠在制备具有
下述至少一种特性的树鼩疾病模型中的应用：
1)胶质细胞增生；
2)神经元纤维缠结；
3)学习记忆能力下降。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：用于制备所述树鼩疾病模型的树鼩
为雄性。
6.根据权利要求4或...

【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳轶强，梁振鑫，
申请(专利权)人：广西医科大学，
类型：发明
国别省市：广西;45