一种安年颗粒鉴别及含量测定方法技术

本发明专利技术涉及一种安年颗粒鉴别及含量测定方法，包括：(1)鉴别仙茅；(2)鉴别当归；(3)鉴别知母；(4)鉴别黄柏；(5)检测淫羊藿含量。本发明专利技术综合的质量控制方法能使安年颗粒的活性成分得到有效控制，且方法稳定可靠，专一性强，大大提升了安年颗粒的整体质量，保证了疗效，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药制剂质量标准领域，特别涉及一种安年颗粒鉴别及含量测定方法。
技术介绍
更年期综合征是指妇女绝经前后由于内分泌系统失去平衡导致雌激素分泌减少，由此所致的一系列躯体及精神心理症状。近年来由于生活、工作压力的增大，其发病年龄有所提前，且发病率呈逐年升高的趋势；更年期妇女的症状明显，患者背负了沉重的精神压力，严重影响了家庭生活的和谐。目前对于更年期综合征多采用补充雌激素治疗或服用具有安神镇静功效类药物，但其临床症状改善率并不理想，而且长期服用对身体还有一定的毒副作用。安年颗粒是一种针对更年期综合征的中药制剂，具有温肾阳、补肾精、泻相火、调冲任的功能。安年颗粒的处方为：淫羊藿714g、仙茅714g、当归714g、巴戟天714g、知母714g、黄柏714g。制法为取以上六味药材，加水煎煮两次。第一次加12倍量水，浸泡30分钟，煮沸1小时，滤过；第二次加10倍量水，煎煮30分钟，滤过，滤液合并，浓缩至相对密度1.12～1.13(50℃～60℃)，冷却至室温，加入乙醇使含醇量至60％，搅匀，静置使沉淀，取上清液，减压回收乙醇(温度：65℃±2，真空度：0.08MPa)，并浓缩至清膏相对密度1.15-1.20(60℃±2)，取清膏加辅料适量，制成1000g颗粒，即得。但是目前对于安年颗粒的质量标准并未有研究涉及。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种安年颗粒鉴别及含量测定方法，该方法能使安年颗粒的活性成分得到有效控制，且方法稳定可靠，专一性强，大大提升了安年颗粒的整体质量，保证了疗效，具有良好的应用前景。本专利技术的一种安年颗粒鉴别及含量测定方法，包括：(1)鉴别仙茅：取安年颗粒加水溶解，离心，取上清液，用乙醚提取，弃去乙醚液，水液加碳酸氢钠，超声溶解，用乙酸乙酯提取，提取液洗涤后，置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取仙茅苷对照品，加乙酸乙酯制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)鉴别当归：取安年颗粒加乙醇，水浴加热，过滤，蒸干滤液，残渣加水溶解，用乙醚提取，除去乙醚，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)鉴别知母：取安年颗粒加乙醇，加热，过滤，滤液加盐酸，加热回流，回收乙醇至干，残渣加水超声溶解，用三氯甲烷提取，三氯甲烷液用水洗涤后置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取菝葜皂苷元对照品，加三氯甲烷制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)鉴别黄柏：取安年颗粒加甲醇，超声处理，取安年颗粒，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，取上清液作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，置氨蒸气饱和的层析缸内展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)检测淫羊藿含量：取安年颗粒加入乙醇，超声处理，过滤，得供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液注入液相色谱仪，测定，即得。所述步骤(1)中的展开采用体积比为10:1:0.1的乙酸乙酯-甲醇-甲酸混合溶液作为展开剂。所述步骤(1)中的显色液为体积比为1:1的2％铁氰化钾溶液-2％三氯化铁混合溶液。所述步骤(2)中的展开采用体积比为20:10:1的苯-乙酸乙酯-甲酸混合溶液作为展开剂。所述步骤(2)中的显色液为2％的三氯化铁乙醇溶液。所述步骤(3)中的展开采用体积比为9:1的苯-丙酮混合溶液作为展开剂。所述步骤(3)中的显色液为硫酸乙醇溶液。所述步骤(4)中的展开采用体积比为6:3:1.5:1.5:0.5的苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨混合溶液作为展开剂。所述步骤(5)中的测定条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为27:73的乙腈-水为流动相；检测波长为270nm；理论塔板数按淫羊藿计不低于2500；流速为1ml/min；柱温为25℃。有益效果本专利技术综合的质量控制方法能使安年颗粒的活性成分得到有效控制，且方法稳定可靠，专一性强，大大提升了安年颗粒的整体质量，保证了疗效，具有良好的应用前景。附图说明图1为安年颗粒仙茅薄层色谱图；其中，1为仙茅空白对照；2为仙茅对照药材；3为仙茅苷对照品；4为安年颗粒(批号031201)；5为安年颗粒(批号031205)；6为安年颗粒(批号031209)；图2为安年颗粒当归薄层色谱图；其中，1为当归空白对照；2为阿魏酸对照品；3为当归对照药材；4为安年颗粒(批号031201)；5为安年颗粒(批号031205)；6为安年颗粒(批号031209)；图3为安年颗粒知母薄层色谱图；其中，1为菝葜皂苷元对照品；2为知母对照药材；3为知母空白对照；4为安年颗粒(批号031201)；5为安年颗粒(批号031205)；6为安年颗粒(批号031209)；图4为安年颗粒黄柏薄层荧光图；图5为淫羊藿苷对照品HPLC图谱(270nm)；图6为安年颗粒供试品HPLC图谱(270nm)；图7为淫羊藿苷标准曲线；图8为供试品溶液HPLC图谱(除淫羊藿以外的其余药味，270nm)；图9为空白溶液HPLC图谱(除淫羊藿以外的其余药味，270nm)。具体实施方式下面结合具体实施例，进一步阐述本专利技术。应理解，这些实施例仅用于说明本专利技术而不用于限制本专利技术的范围。此外应理解，在阅读了本专利技术讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本专利技术作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。实施例1安年颗粒含有以下六味药：淫羊藿、仙茅、当归、巴戟天、知母和黄柏。(1)鉴别仙茅：取安年颗粒5g，加水50ml，加热使溶解，离心，取上清液，用乙醚50ml振摇提取，弃去乙醚液，水液加碳酸氢钠2g，超声使溶解，用乙酸乙酯50ml振摇提取，提取液用水30ml洗涤后，置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取仙茅苷对照品(购于中国药品生物制品检定所批号:0771-200203(鉴别用))，加乙酸乙酯制成每1ml中含50μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上(山东烟台芝罘黄务硅胶试验厂)，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸(体积比10:1:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％铁氰化钾溶液-2％三氯化铁溶液(体积比1:1)。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，结果见图1。(2)鉴别当归：取安年颗粒5g，加水50ml，加热使溶解，离心，取上清液，用乙醚50ml振摇提取，弃去乙醚液，水液加碳酸氢钠2g，超声使溶解，用乙酸乙酯50ml振摇提取，提取液用水30ml洗涤后，置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种安年颗粒鉴别及含量测定方法，包括：(1)鉴别仙茅：取安年颗粒加水溶解，离心，取上清液，用乙醚提取，弃去乙醚液，水液加碳酸氢钠，超声溶解，用乙酸乙酯提取，提取液洗涤后，置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取仙茅苷对照品，加乙酸乙酯制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)鉴别当归：取安年颗粒加乙醇，水浴加热，过滤，蒸干滤液，残渣加水溶解，用乙醚提取，除去乙醚，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)鉴别知母：取安年颗粒加乙醇，加热，过滤，滤液加盐酸，加热回流，回收乙醇至干，残渣加水超声溶解，用三氯甲烷提取，三氯甲烷液用水洗涤后置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取菝葜皂苷元对照品，加三氯甲烷制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)鉴别黄柏：取安年颗粒加甲醇，超声处理，取安年颗粒，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，取上清液作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，置氨蒸气饱和的层析缸内展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)检测淫羊藿含量：取安年颗粒加入乙醇，超声处理，过滤，得供试品溶液；另取淫羊藿苷对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液注入液相色谱仪，测定，即得。...

【技术特征摘要】
1.一种安年颗粒鉴别及含量测定方法，包括：(1)鉴别仙茅：取安年颗粒加水溶解，离心，取上清液，用乙醚提取，弃去乙醚液，水液加碳酸氢钠，超声溶解，用乙酸乙酯提取，提取液洗涤后，置水浴上蒸干，残渣加乙酸乙酯溶解，作为供试品溶液；另取仙茅苷对照品，加乙酸乙酯制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)鉴别当归：取安年颗粒加乙醇，水浴加热，过滤，蒸干滤液，残渣加水溶解，用乙醚提取，除去乙醚，残渣加乙醇溶解，作为供试品溶液；另取阿魏酸对照品，加乙醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)鉴别知母：取安年颗粒加乙醇，加热，过滤，滤液加盐酸，加热回流，回收乙醇至干，残渣加水超声溶解，用三氯甲烷提取，三氯甲烷液用水洗涤后置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷溶解，作为供试品溶液；另取菝葜皂苷元对照品，加三氯甲烷制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷显色液，加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)鉴别黄柏：取安年颗粒加甲醇，超声处理，取安年颗粒，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解，取上清液作为供试品溶液；另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成溶液，作为对照品溶液；吸取上述两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，置氨蒸气饱和的层析缸内展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(5)...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘一峰，
申请(专利权)人：上海黄海制药有限责任公司，
类型：发明
国别省市：上海;31