一种葫芦巴种子中牡荆素的提取及含量测定方法技术

本发明专利技术提供了一种葫芦巴种子中牡荆素的提取及含量测定方法，所述提取方法中，先使用石油醚对葫芦巴种子进行脱脂，之后浸泡和使用超声提取，极大地增加了提取速率，具有省时、节能、提取效率高的优点。所述含量测定方法采用高效液相色谱对牡荆素的含量进行测定，具有结果准确、操作方便的优点，并能够根据含量测定方法的结果进而优化所述提取方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药提取工艺
，具体涉及一种葫芦巴种子中牡荆素的提取及含量测定方法。
技术介绍
心脑血管系统疾病是人类最为常见的一类疾病，已成为当今世界人口的第一大死因。据WHO预计，心脑血管疾病每年至少造成全球1200万人死亡，已成为人类健康的头号敌人。心血管疾病的高发生率与死亡率，引导了药物研发与生产的方向。目前牡荆素主要用于治疗心血管疾病，牡荆素纯度一般要求>98％(HPLC)。已有成药注射用牡荆素用于临床医疗。牡荆素主要功能是活血化瘀，理气通脉。用于瘀血阻脉所致的胸痹，症见胸闷憋气，心前区刺痛、心悸健忘、眩晕耳鸣。冠心病心绞痛、高脂血症、心动脉供血不足等症候者。目前，常采用从草本植株中提取的牡荆素的工艺相对复杂，且成分复杂，纯度很难达到98％(HPLC)，使得提取的牡荆素药效难以达到预期的效果。传统提取方法(如煎煮、回流、浸渍、渗漉等)在提取中药有效成分方面，存在着损失大、周期长、工序多、提取效率不高等缺点。针对现有技术中的上述不足，申请号为CN201410156823.3的专利技术专利公开了一种从葫芦巴中提取牡荆素、葫芦巴碱的方法，该方法提取的牡荆素纯度高，但是，该方法存在有效成分损失大、周期长、工序多的缺点。
技术实现思路
为了解决现有技术存在的上述问题，本专利技术提供了一种葫芦巴种子中牡荆素的提取及含量测定方法。所述提取方法操作简单，具有省时、节能、提取效率高的优点；所述含量测定方法采用高效液相色谱对牡荆素的含量进行测定，具有结果准确、操作方便的优点，并能够根据含量测定方法的结果进而优化所述提取方法。本专利技术所采用的技术方案为：一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚进行脱脂处理，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为30-80％的乙醇溶液，浸泡18-30h，得到浸泡液，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为50-350mL；C、对所述浸泡液进行超声提取，超声功率为40-200W；超声提取后过滤取滤液，即得含有牡荆素的乙醇溶液。本专利技术中，采用超声提取，超声提取技术是在溶剂和样品之间产生声波空化作用，导致溶液内气泡的形成、增长和爆破压缩，从而使固体样品分散，增大样品与萃取溶剂之间的接触面积，提高目标物从固相转移到液相的传质速率，从而极大地增加了提取速率，具有省时、节能、提取效率高的优点。步骤A中，使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂1-3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为8-14mL，每次脱脂的时间为20-40min。为提升脱脂效果，优选的技术方案是，步骤A中，使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂1-3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为8-14mL，每次脱脂的时间为20-40min。进一步地，步骤A中，使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为10mL，每次脱脂的时间为30min。为保证提取有较高的得率，优选的技术方案是，步骤B中，使用体积分数为70％的乙醇溶液浸泡预制药粉24小时，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为100mL。步骤C中，超声提取的次数为1-3次：每次超声提取的超声功率为40-200W，每次超声提取的时间为30-120min。进一步地，步骤C中，超声提取的次数为2次：每次超声提取的超声功率为80W，每次超声提取的时间为60min。专利技术人发现，超声提取2次的提取效果好于提取1次和3次的效果，故超声提取2次作为最优选的方案。本专利技术还提供了一种所述提取方法得到的牡荆素的含量测定方法，采用高效液相色谱法测定牡荆素含量：所用的色谱柱为C18色谱柱，流动相为流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液(16:84)，检测波长325-355nm。其中，乙腈-0.1％磷酸水溶液(16:84)表示乙腈和体积分数为0.1％的磷酸水溶液的体积比为16:84。使用高效液相色谱法测定牡荆素含量之前，还包括标准品检验步骤：采用多组牡荆素标准品，选择与样品测定时同样的色谱条件，得到峰面积和牡荆素进样量的关系和相对平均偏差。此步骤是为得出峰面积和牡荆素进样量的关系，并对实验装置和方法做验证。优选地，高效液相色谱法中检测波长为340nm；流速为1mL/min；柱温为25℃；含有牡荆素的乙醇溶液的进样量为3μL。在上述色谱条件下，牡荆素进样量为0.2342-0.5674μg时，牡荆素进样量与峰面积的线性关系良好。得回归方程y＝33.895x－5.9469，r2＝0.9919；其中，y为峰面积；x为牡荆素进样量。需要说明的是，本专利技术中的牡荆素进样量，是指样品或牡荆素标准品中牡荆素的含量，而样品是指所述提取方法得到的含有牡荆素的乙醇溶液。本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种葫芦巴种子中牡荆素的提取及含量测定方法，所述提取方法中，先使用石油醚对葫芦巴种子进行脱脂，之后浸泡和使用超声提取，极大地增加了提取速率，具有省时、节能、提取效率高的优点。所述含量测定方法采用高效液相色谱对牡荆素的含量进行测定，具有结果准确、操作方便的优点，并能够根据含量测定方法的结果进而优化所述提取方法。附图说明图1是实施例4中检测波长吸光度图；图2是实施例4中峰面积和牡荆素进样量的关系图。具体实施方式下面结合实施例，更具体地说明本专利技术的内容。应当理解，本专利技术的实施并不局限于下面的实施例，对本专利技术所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本专利技术保护范围。在本专利技术中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。实施例1一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂1次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为14mL，每次脱脂的时间为20min，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为80％的乙醇溶液，浸泡18h，得到浸泡液，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为350mL；C、对所述浸泡液进行超声提取，超声提取的次数为1次：每次超声提取的超声功率为200W，每次超声提取的时间为30min；超声提取后过滤取滤液，即得含有牡荆素的乙醇溶液。实施例2一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为8mL，每次脱脂的时间为40min，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为30％的乙醇溶液，浸泡30h，得到浸泡液，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为50mL；C、对所述浸泡液进行超声提取，超声提取的次数为3次：每次超声提取的超声功率为40W，每次超声提取的时间为120min；超声提取后过滤取滤液，即得含有牡荆素的乙醇溶液。实施例3一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂2次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为10mL，每次脱脂的时间为30min，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为70％的乙醇溶液，浸泡24h，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚进行脱脂处理，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为30‑80％的乙醇溶液，浸泡18‑30h，得到浸泡液，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为50‑350mL；C、对所述浸泡液进行超声提取，超声功率为40‑200W；超声提取后过滤取滤液，即得含有牡荆素的乙醇溶液。

【技术特征摘要】
1.一种葫芦巴种子中牡荆素的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：A、称取葫芦巴种子，研磨成粉末后使用石油醚进行脱脂处理，脱脂后得到预制药粉；B、向所述预制药粉中加入体积分数为30-80％的乙醇溶液，浸泡18-30h，得到浸泡液，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为50-350mL；C、对所述浸泡液进行超声提取，超声功率为40-200W；超声提取后过滤取滤液，即得含有牡荆素的乙醇溶液。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤A中，使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂1-3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为8-14mL，每次脱脂的时间为20-40min。3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，步骤A中，使用石油醚对葫芦巴种子粉末脱脂3次：每次脱脂操作中1g葫芦巴种子粉末对应石油醚的体积为10mL，每次脱脂的时间为30min。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤B中，使用体积分数为70％的乙醇溶液浸泡预制药粉24小时，1g预制药粉对应的乙醇溶液的体积为100mL。5.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁建海，王东，刘晓洋，
申请(专利权)人：丁建海，
类型：发明
国别省市：宁夏;64