一种中药复方中姜的鉴别方法技术

本发明专利技术公开了一种中药复方中姜的鉴别方法，特别涉及中药复方中姜的薄层鉴别方法。本发明专利技术的鉴别方法包括以下步骤：对照药材溶液的制备；供试品溶液的制备；阴性样品溶液的制备；用毛细管点样器在同一硅胶G薄层板上点样；将薄层板置于层析缸中，用展开剂展开，取出，晾干；检视薄层色谱板，得到结果进行鉴别，供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，阴性样品无此斑点。本发明专利技术的鉴别方法工艺简单，分离效果好，具有极强的专属性，进一步提高了中药复方中姜成分鉴定的准确性，在与姜有关的药品鉴定领域具有巨大的推广应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及中药复方中姜的鉴别方法，特别涉及中药复方中姜的薄层鉴别方法。
技术介绍
为姜科植物姜ZingiberofficinaleRose.的新鲜或干燥根茎。秋、冬二季采挖除去须根和泥沙，不晒干或晒干或低温干燥。不晒干的称“生姜”，趁鲜切片晒干或低温干燥者称为“干姜片”，主产于我国山东。姜是传统的止呕良药，具有解表散寒，温中止呕，化痰止咳，解鱼蟹毒的功效。主治风寒感冒，胃寒呕吐，寒痰咳嗽，鱼蟹中毒。姜还可与其他药材配伍，制成多种中药复方品种，例如以姜为君药的生姜泄心片、姜枣祛寒冲剂、姜竭补血合剂等，还有一些处方中含姜的如复方鲜竹沥液、少腹逐瘀丸等，另有一些中药丸剂用姜汁泛丸如补中益气丸、二陈丸等。这些中药复方品种以其副作用小，疗效确切等优点，在我国有着广泛的应用，具有良好的市场前景。现代医学研究发现中国药典中含姜的中药复方品种(参见表1)中，大部分品种的质量标准中还没有涉及姜的鉴别方法，而另一部分品种（附子理中丸、四逆汤、小建中片、小青龙合剂）虽涉及该药的鉴别方法，但是其方法对于本研究所做制剂，分离效果不好，检不出。申请人曾经使用药典标准中姜或者含姜制剂中的鉴别方法对风寒咳嗽颗粒中的姜进行薄层色谱鉴别，结果显示这些方法检不出，分离效果也不好。目前，国内外对中药复方品种的质量控制越来越严格，因此急需找到一种稳定、可靠、简便的薄层色谱法，能准确、有效的对中药复方中姜成分进行鉴别。
技术实现思路
就现有技术而言，所用展开剂分离效果均不理想。本专利技术的目的在于提供一种分离效果好的展开剂的姜薄层色谱技术方案，具有操作简便快捷、分离效果好、专属性强、应用广泛等优点，解决了现有技术存在的问题，本专利技术同时有助于完善与姜有关的药品质量标准。本专利技术涉及一种中药复方中姜的鉴别方法，所述鉴别方法包括以下步骤：（1）对照药材溶液的制备：取干姜对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；（2）供试品溶液的制备：取含姜的待测样品液体，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为原粉的待测样品，加相当于姜药材质量的5~50倍水煎煮过滤浓缩至5~50ml，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为提取的待测样品粉末，用5~50ml热水溶解过滤取滤液，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；（3）阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺姜的其他药材，制备不含姜的中药复方，再按照步骤（2）中自“取待测样品”之后起，同法操作，所得浓缩液即为阴性样品溶液；（4）用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各1~50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；（5）取正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤（4）得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；（6）检视薄层色谱板，得到结果进行鉴别，待测样品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，日光下检视，显相同颜色的主斑点，阴性样品无此斑点；所述待测样品为含姜的中药复方。优选地，所述待测样品为生姜泄心片、姜枣祛寒冲剂、姜竭补血合剂、少腹逐瘀丸、风寒咳嗽颗粒、复方鲜竹沥液、附子理中丸、加味生化颗粒、清气化痰丸、十滴水、四君子丸、四逆汤、小柴胡片或小青龙合剂。更优选地，所述待测样品为风寒咳嗽颗粒、复方鲜竹沥液、附子理中丸、加味生化颗粒、清气化痰丸、十滴水、四君子丸、四逆汤、小柴胡片或小青龙合剂。优选地，所述步骤（1）中加入水的量为对照药材质量的5~100倍；滤液浓缩至对照药材质量的1~30倍；两次加入乙酸乙酯的量为浓缩液体积的0.2~10倍。优选地，所述步骤（2）中加入乙酸乙酯的量为待测样品体积/质量的的0.2~10倍，萃取1～4次，浓缩至每ml含0.5-10g的姜药材。优选地，所述步骤（5）中的展开剂中正己烷、乙酸乙酯、甲酸的体积比为16～20:8～12:0～0.5，更优选为18:10:0.1。优选地，所述步骤（6）中检视薄层色谱板为喷显色剂加热后，在日光下检视；更优选所述步骤（6）中检视薄层色谱板为喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视。更优选地，所述鉴别方法按以下步骤进行：（1）对照药材溶液的制备：取干姜对照药材4.5g，加水150ml，煎煮30分钟，过滤，滤液浓缩至30ml，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；（2）供试品溶液的制备：取相当于含姜4.5g的待测样品液体，浓缩或稀释至30ml，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；或取相当于含姜4.5g的其中姜工艺为原粉的待测样品，加150ml水，煎煮，过滤，浓缩至30ml，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；或取相当于含姜4.5g的其中姜工艺为提取的待测样品粉末，用50ml热水溶解，过滤，取滤液，加乙酸乙酯萃取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，浓缩至1ml，作为供试品溶液；（3）阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺姜的其他药材，制备不含姜的中药复方样品，再按照步骤（2）中自“加入乙酸乙酯”起，同法操作，所得浓缩液即为阴性样品溶液；（4）用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各2μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；（5）将正己烷、乙酸乙酯、甲酸按照体积比为18:10:0.1混合均匀，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤（4）得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；（6）将步骤（5）晾干后的薄层板喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视，得到薄层色谱图，得到结果进行鉴别，供试品色谱在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点，阴性样品无此斑点。本专利技术中药复方中姜的鉴别方法具有如下优点：1.结合色谱图将本专利技术所述技术方案(方法四)与姜药典标准中的鉴别方法(方法一、二、三)进行比较。方法一、二、三：分离效果不好，不适合本制剂中姜的鉴别。方法四：阴性无干扰、专属性强，点样量少、节约工时，方法简单，Rf值适中、分离效果好，图谱清晰。2.对于中药复方制剂中姜的薄层鉴别方法，展开剂系统较多，如：石油醚（60～90°C）-乙酸乙酯-甲醇-醋酸、环己烷-乙醚、甲苯-乙酸乙酯、石油醚（60～90°C）-三氯甲烷-乙酸乙酯等，根据试验比较，本专利技术所建立的技术方案，分离效果比上述方法更好，Rf值更适中，斑点更清晰。3.本专利技术首先参考中国药典一部2010年版炮姜鉴别（2）项下的方法，将所做的供试品薄层板置日光下检视，观察到供试品色谱在与对照药材色谱相应位置处有斑点显示，而阴性无此斑点，证明仍存在分离效果不佳的问题。于是在此技术方案的基础上，将展开剂调整为正己烷-乙酸乙酯-甲酸(16～20:8～12:0.1～0.5)，检视得到的结果其分离效果显著。4.采用本专利技术的方法对几个己上市的中药复方品种进行了薄层色谱鉴别检验，得到的结果见表1，附图11~28。结果证明本专利技术所述的技术方案可以广泛应用于市场上含姜的中药复方品种薄层色谱鉴别，且效果明显优于现有技术。附图说明图1为按照姜药典标准(方法一)所得到的姜薄层色谱示意图；图2为按照姜药典标准(方法一)所得到本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种中药复方中姜的鉴别方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：（1）对照药材溶液的制备：取干姜对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；（2）供试品溶液的制备：取含姜的待测样品液体，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为原粉的待测样品，加相当于姜药材质量的5~50倍水煎煮过滤浓缩至5~50ml，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为提取的待测样品粉末，用5~50ml热水溶解过滤取滤液，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；（3）阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺姜的其他药材，制备不含姜的阴性样品，再按照步骤（2）中自“加入乙酸乙酯”起，同法操作，所得浓缩液即为阴性样品溶液；（4）用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各1~50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；（5）取正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤（4）得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；（6）检视薄层色谱板，对得到结果进行鉴别；所述待测样品为含姜的中药复方制剂。...

【技术特征摘要】
1.一种中药复方中姜的鉴别方法，其特征在于：所述鉴别方法包括以下步骤：（1）对照药材溶液的制备：取干姜对照药材，加水，煎煮，过滤，滤液浓缩，同供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；（2）供试品溶液的制备：取含姜的待测样品液体，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为原粉的待测样品，加相当于姜药材质量的5~50倍水煎煮过滤浓缩至5~50ml，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；或取含姜的其中姜工艺为提取的待测样品粉末，用5~50ml热水溶解过滤取滤液，加乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯液，浓缩，作为供试品溶液；（3）阴性样品溶液的制备：按待测样品处方比例取缺姜的其他药材，制备不含姜的阴性样品，再按照步骤（2）中自“加入乙酸乙酯”起，同法操作，所得浓缩液即为阴性样品溶液；（4）用毛细管点样器分别吸取对照药材溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各1~50μL，依次点于同一硅胶G薄层板上；（5）取正己烷、乙酸乙酯、甲酸混合，作为展开剂，置于干燥洁净的层析缸中，将步骤（4）得到的薄层板置于层析缸中，展开，取出，晾干；（6）检视薄层色谱板，对得到结果进行鉴别；所述待测样品为含姜的中药复方制剂。2.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤（1）中加入水的质量为姜对照药材质量的5~100倍；滤液浓缩至姜对照药材质量的1~30倍；加入乙酸乙酯的量为步骤（1）中浓缩液体积的0.2~10倍。3.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤（2）中，加入乙酸乙酯的量为待测样品体积/质量的0.2~10倍，萃取1～4次，浓缩至每ml含0.5-10g的姜药材。4.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤（5）中的展开剂中正己烷、乙酸乙酯、甲酸的体积比为16～20:8～12:0～0.5。5.根据权利要求4所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤（5）中的展开剂中正己烷、乙酸乙酯、甲酸的体积比为18:10:0.1。6.根据权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于：所述步骤（6）中检视薄层色谱板为...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛卫宁，梁冰，张磊，尹朋，
申请(专利权)人：中悦民安北京科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11