本发明专利技术提供一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法，包括以下步骤：提取、精制纯化、浓缩干燥、含量测定。本发明专利技术还公开了人参茎叶总皂苷对照提取物应用于人参茎叶制剂中总皂苷的鉴别及含量测定。本发明专利技术的人参茎叶总皂苷提取物提取充分，有效成分含量高，农残等有害物质含量少，作为原料的人参制剂的临床疗效更佳，可用作人参茎叶制剂中总皂苷的鉴别及含量测定，其产业化对于合理利用中药资源、提高中药产业整体技术、推进中药产业集约化具有重要的意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药制剂领域，具体涉及一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法及应用。
技术介绍
人参茎叶为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥叶，味甘、微苦，微温。归脾、肺、心、肾经。大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智。用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，气血亏虚，久病虚羸，惊悸失眠，阳痿宫冷。早在1854年便有人对人参属植物的化学成分开始研究，在这一百多年中，亚洲的包括中国、日本、韩国，欧洲的，美国等国家学者对人参的化学成分进行了一系列的研究，发现其中主要含有皂苷类，黄酮类，生物碱，甾醇类，木脂素，人参挥发油，氨基酸，多肽，人参多糖等多种类型化合物。发现人参茎叶中含有皂苷类成分与人参根中成分极为相似，且人参根中总皂苷的含量明显低于人参茎叶。人参茎叶中皂苷类成分有多种功效，能滋补、调节机能、提高机体免疫力和抗炎。根据现代药理学研究，人参具有良好的免疫增强作用，在网状内皮系统(RES)、特异性抗体形成、淋巴细胞和胸腺细胞增殖等多方面均有所体现，其中，人参皂苷可广泛用于心血管系统、神经系统、免疫系统和内分泌系统等的防护和治疗，在中医药临床治疗中占有相当重要的位置，其有效成分皂苷类化合物被广泛应用于临床。我国的中药应用方式随着社会的进步而不断地发展，现代中药是以中医药理论为基础，发挥中医药的优势和特色，利用现代科学技术生产的“安全、高效、稳定、可控”的中药，包括中药材、中药饮片、中药提取物和中成药，中药提取物已成为中药家族新成员。由于人参茎叶药材所含成分复杂，多种成分兼具临床效果，人参茎叶药材和饮片多 成分鉴定存在的各成分化学对照品紧缺和价格昂贵，具有更高的应用价值。对照提取物可用于薄层色谱和高效液相色谱鉴别，相比对照药材和化学对照品共同建立的鉴别标准，在提高对中药材检验的规范化、专属性、重现性情况下，节约了检测成本，对照提取物不失为中药材标准的有益补充。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法及应用，用于鉴别多种皂苷成分，从而克服各成分化学对照品紧缺和价格昂贵的缺点与不足。为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法，包括以下步骤：1)提取：将人参茎叶原料切成小段，加水浸泡0.5h，加水煎煮3次，每次加入16倍量水，每次煎煮1h，合并三次煎煮液，静置，过滤，得滤液Ⅰ；2)精制纯化：将滤液过苯乙烯骨架D101大孔吸附树脂柱，水洗至无色，再用60％乙醇洗脱，当洗脱液中出现颜色或乙醇流出时开始收集，向其中加入人参茎叶原料重量20％的氧化镁，搅拌，加热至沸腾，冷却，静置12-18h，离心过滤，再经0.2μm膜板框过滤，得滤液Ⅱ；4)浓缩干燥：将滤液Ⅱ浓缩至相对密度为1.06-1.08(80℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，过100目筛，得人参茎叶对照提取物；5)含量测定：对人参茎叶对照提取物中人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd的含量进行测定，根据十批样品测定结果，人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd的平均含量百分比分别为9.46％、35.15％、2.39％、5.50％，四种单体皂苷总量在人参茎叶对照提取物中占52.50％。优选地，所述步骤1)中切成2cm的小段。优选地，所述步骤2)中乙醇洗脱流速为1.5-2.0柱体积倍数/h。优选地，所述步骤3)中真空干燥的条件为：真空度为0.02-0.08Mpa，温度为90-115℃。人参茎叶总皂苷对照提取物的应用于人参茎叶制剂中总皂苷的鉴别及含量测定。与现有技术相比，本专利技术涉及的人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法及应用具有如下有益的技术效果:1)本专利技术的人参茎叶总皂苷提取物，有效成分可用作人参茎叶制剂中总皂苷的鉴别及含量测定；2)本专利技术的人参茎叶总皂苷提取充分，有效成分含量高，因此应用本专利技术的对照提取物作为原料的人参制剂的临床疗效更佳；3)人参茎叶总皂苷对照提取物的精致提取，减少农残等有害物质进入制剂；4)人参茎叶总皂苷对照提取物保证了市售人参制剂安全性、有效性、稳定剂、均一性，为具有良好的临床疗效奠定基础，其产业化对于合理利用中药资源、提高中药产业整体技术、推进中药产业集约化具有重要的意义。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为人参茎叶总皂苷对照提取物HPLC图；图2为人参叶药材HPLC图；图3为消糜栓HPLC图；图4为益心宁神片HPLC图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1：一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法，包括以下步骤：1)提取：将人参茎叶原料切成2cm左右的小段，加水浸泡0.5h，加水煎煮3次，每次加入16倍量水，每次煎煮1h，合并三次煎煮液，静置，过滤，得滤液Ⅰ；2)精制纯化：将滤液过苯乙烯骨架D101大孔吸附树脂柱，水洗至无色，再用60％乙醇洗脱，乙醇洗脱流速为1.5-2.0柱体积倍数/h，当洗脱液中出现颜色或乙醇流出时开始收集，向其中加入人参茎叶原料重量20％的氧化镁，搅拌，加热至沸腾，冷却，静置12-18h，离心过滤，再经0.2μm膜板框过滤，得滤液Ⅱ；4)浓缩干燥：将滤液Ⅱ浓缩至相对密度为1.06-1.08(80℃)的稠膏，在真空度为0.02-0.08Mpa、温度为90-115℃条件下真空干燥，粉碎，过100目筛，得人参茎叶对照提取物；5)含量测定：①溶液的制备：混合对照品溶液的制备：精密称取人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd适量，置于容量瓶中，用甲醇溶解，制得混合对照品溶液，浓度为人参皂苷Rg10.1892mg·mL-1、Re 0.7009mg·mL-1、Rb20.04779mg·mL-1、Rd 0.1099mg·mL-1；对照提取物供试品溶液的制备：精密称取自制人参茎叶对照提取物10mg，置于5mL容量瓶中，用甲醇定容，摇匀，滤过，取过滤液；②含量检测：精密吸取对照品溶液及十批对照提取供试品溶液各10L，平行测定3次，均采用Agilent 1260高效液相色谱系统，Thermo BDS-C18(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，以乙腈(A)-0.1％磷酸(B)流动相，梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1，流速1.3ml·min-1，柱温30℃，检测波长203nm；进样量10μL，按上述色谱条件，各成分分离度良好，梯度洗脱系统条件见表1。表1二元梯度洗脱系统时间(min) 乙腈(％) 0.1％磷酸(％) 0～30 19 81 30～35 19→24 81→76 35～60 24→40 76→60 60～65 40→19 60→81 65～75 19 81 经标定，人参茎叶对照提取物中人参皂苷Rg本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取：将人参茎叶原料切成小段，加水浸泡0.5h，加水煎煮3次，每次加入16倍量水，每次煎煮1h，合并三次煎煮液，静置，过滤，得滤液Ⅰ；2)精制纯化：将滤液过苯乙烯骨架D101大孔吸附树脂柱，水洗至无色，再用60％乙醇洗脱，当洗脱液中出现颜色或乙醇流出时开始收集，向其中加入人参茎叶原料重量20％的氧化镁，搅拌，加热至沸腾，冷却，静置12‑18h，离心过滤，再经0.2μm膜板框过滤，得滤液Ⅱ；3)浓缩干燥：将滤液Ⅱ浓缩至相对密度为1.06‑1.08(80℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，过100目筛，得人参茎叶对照提取物；4)含量测定：对人参茎叶对照提取物中人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd的含量进行测定，根据十批样品测定结果，人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd的平均含量百分比分别为9.46％、35.15％、2.39％、5.50％，四种单体皂苷总量在人参茎叶对照提取物中占52.50％。
【技术特征摘要】
1.一种人参茎叶总皂苷对照提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)提取：将人参茎叶原料切成小段，加水浸泡0.5h，加水煎煮3次，每次加入16倍量水，每次煎煮1h，合并三次煎煮液，静置，过滤，得滤液Ⅰ；2)精制纯化：将滤液过苯乙烯骨架D101大孔吸附树脂柱，水洗至无色，再用60％乙醇洗脱，当洗脱液中出现颜色或乙醇流出时开始收集，向其中加入人参茎叶原料重量20％的氧化镁，搅拌，加热至沸腾，冷却，静置12-18h，离心过滤，再经0.2μm膜板框过滤，得滤液Ⅱ；3)浓缩干燥：将滤液Ⅱ浓缩至相对密度为1.06-1.08(80℃)的稠膏，真空干燥，粉碎，过100目筛，得人参茎叶对照提取物；4)含量测定：对人参茎叶对照提取物中人参皂苷Rg1、Re、Rb2、Rd的含量进...
【专利技术属性】
技术研发人员：贡济宇，蔡广知，沈晓君，王瑶，郭云龙，张美玲，王玥玥，
申请(专利权)人：长春中医药大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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