双吲哚-二肽衍生物,其合成,抗血栓活性和制备抗血栓剂的应用制造技术

本发明专利技术公开了下式Leu-AA修饰的双吲哚衍生物，即2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷，公开了它们的合成，公开了它们的抗血栓活性，因而本发明专利技术公开了它们作为抗血栓抑制剂的临床应用前景。

【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及下式的双吲哚衍生物，即2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷，公开了它们的合成，涉及它们的抗血栓活性。因而本专利技术公开了2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷作为血栓抑制剂的临床应用前景。
技术介绍
吲哚乙酸的衍生物吲哚美辛(Indomethacin)除具有抗炎以及解热镇痛作用外，还可以通过抑制血栓素TXA2的合成而抑制血小板的聚集。我们的前期专利技术披露，通式II的双吲哚衍生物(式中AA为氨基酸残基)在1nml/kg口服剂量下具有抗血栓活性。在急性毒性研究中，专利技术人发现剂量通式II的双吲哚衍生物的不能溶解。在通式II的双吲哚衍生物的代谢研究中，专利技术人发现大鼠的粪便中含较高量通式II的双吲哚衍生物。这些发现使专利技术人认识到，提高双吲哚衍生物的生物利用度至关重要。经过3年摸索，终于发现将通式II的乙基用3-羟基-4-甲氧基苯基代替，并在乙酰-AA中插如Leu残基可以达到改善生物利用度的目标。于是，专利技术人提出来本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个内容是提供通式I的2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)。本专利技术的第二个内容是提供通式I的2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷的合成方法，该方法包括：(1)吲哚乙酸在乙醇中经浓硫酸催化，与异香草醛进行Pictet-Spengler缩合，生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；(2)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在NaOH溶液(4N)中皂化反应生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；(3)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷与L-Leu-OBzl偶联得到2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；(4)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；(5)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷与AA-OBzl偶联得到2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷；(6)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷在甲醇溶液中Pd/C催化生成2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷。本专利技术的第三个内容是评价2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)在大鼠模型上的抗栓活性。附图说明图1是2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷示意图(式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基)的合成路线.i)异香草醛，浓H2SO4，97.7％乙醇；ii)4NNaOH，丙酮；iii)AA-OBzl、DCC、HOBt、无水THF；iv)Pd/C，甲醇；v)AA-OBzl、DCC、HOBt、无水THF；vi)Pd/c，甲醇。5a中AA＝Leu；5b中AA＝Phe；5c中AA＝Asp；5d中AA＝Ser；5e中AA＝Val；5f中AA＝Thr；5g中＝Trp；5h中＝Ile.6a中AA＝Leu；6b中AA＝Phe；6c中AA＝Asp；6d中AA＝Ser；6e中AA＝Val；6f中AA＝Thr；6g中AA＝Trp；6h中AA＝Ile。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)1g(5.71mmol)吲哚-3-乙酸溶于40ml无水乙醇，滴加1ml浓硫酸，活化20min。加500mg(3.29mmol)3-羟基4-甲氧基苯基醛，室温反应6h，减压浓缩至干。柱层析纯化(石油醚/丙酮＝9/1-5/1)，得到870mg(57％)标题化合物，为淡黄色糖浆。ESI/MS(m/e)：541[M+H]+；1HNMR(300MHz，CDCl3)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，4.18(m，4H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)，1.30(m，6H)。实施例2制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)200mg(0.37mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(1)溶于5ml丙酮，4NNaOH调pH＝12。室温反应6h。冰浴下用饱和KHSO4调pH＝7，减压浓缩除去丙酮后，用饱和KHSO4调pH＝2，水层用50ml乙酸乙酯萃取3遍，合并乙酸乙酯层，用饱和NaCl洗至中性，无水Na2SO4干燥。减压过滤，滤液减压浓缩至干，得到172mg(98％)标题化合物，为紫色粉末。ESI/MS(m/e)：483[M-H]-；1HNMR(300MHz，DMSO-d6)：δ＝8.40(s，2H)，7.55(m，2H)，7.34(m，2H)，7.13(m，4H)，6.78(m，3H)，6.15(m，1H)，3.83(s，3H)，3.56(m，4H)。实施例3制备2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(3)冰浴下将968mg(2mmol)2，2’-双(1H-吲哚-3-乙酸-2-基)-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-甲烷(2)用无水THF溶解，先加入567mg(4.20mmol)HOBt，然后加入906mg(4.40mmol)DCC，搅拌0.5h后加入1729mg(4.40mmol)亮氨酸苄酯，用NMM调节pH到9，反应8h，TLC板监测(石油醚∶丙酮＝1.5∶1)反应完全。滤除DCU，反应混合液减压浓缩至干，残留物用150mL乙酸乙酯溶解，滤除不溶物，得到的溶液依次用5％NaHCO3水溶液、饱和NaCl水溶液、5％KHSO4水溶液和饱和NaCl水溶液洗涤3次，乙酸乙酯层用本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式I的2，2’‑双‑1H‑吲哚‑3‑乙酰‑Leu‑AA‑2‑基‑3‑羟基‑4‑甲氧基苯基‑甲烷，式中AA为L‑Leu，L‑Phe，L‑Asp，L‑Ser，L‑Val，L‑Thr，L‑Trp和L‑Ile残基。

【技术特征摘要】
1.通式I的2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷，式中AA为L-Leu，L-Phe，L-Asp，L-Ser，L-Val，L-Thr，L-Trp和L-Ile残基。2.权利要求1的2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酰-Leu-AA-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷的制备方法，该方法包括：(1)吲哚乙酸在乙醇中经浓硫酸催化，与异香草醛进行Pictet-Spengler缩合，生成2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷；(2)2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酸乙酯-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷在4NNaOH溶液中皂化反应生成2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酸-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷；(3)2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酸-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷与L-Leu-OBzl偶联得到2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷；(4)2，2’-双-1H-吲哚-3-乙酰-Leu-OBzl-2-基-3-羟基-4-甲氧基苯基-甲烷在甲...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，王玉记，吴建辉，信心，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京;11