人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达制造技术

技术编号:13797415 阅读:177 留言:0更新日期:2016-10-06 18:27
本发明专利技术涉及以重组DNA技术生产人血清白蛋白的方法,特别是涉及合成的适合哺乳细胞表达的密码子组成的人血清白蛋白基因,携带所说的基因的重组表达载体和用所说的载体转化的哺乳动物细胞,以可分泌形式生产人血清白蛋白的方法。本发明专利技术的方法特征在于人血清白蛋白结构基因在所说的哺乳动物细胞内一次转化获得稳定的高水平表达,9pcd(皮克每细胞每天)。并且人血清白蛋白表达产物将分泌到发酵液培养基内,利于工业规模的分离和下游加工。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及以重组DNA技术生产人血清白蛋白的方法,特别是涉及合成的适合哺乳细胞表达的密码子组成的人血清白蛋白基因,携带所说的基因的重组表达载体和用所说的载体转化的哺乳动物细胞,以可分泌形式生产人血清白蛋白的方法。
技术介绍
人血清白蛋白是单链非糖基化蛋白质,由585氨基酸组成,分子量为66000道尔顿,等电点为4.7。它以前原蛋白质的形式在肝细胞中产生,并由细胞加工去除前原序列和信号肽后得以分泌。成熟的血清白蛋白分子呈椭圆形,并含有多个二硫键。人血清白蛋白在循环血液中可达42克每升,是血清中最丰富的蛋白。人体每天分解代谢消耗约14克,在正常情况下,肝细胞每天合成补充相同量的血清白蛋白使人体总HSA量保持动态平衡。HSA分子在人体内的半衰期为19天,平均寿命27天。人血清白蛋白是由人类血浆提取的一类血液制剂药品,是现代医学用于预防和治疗的不可缺少的药品。人血清白蛋白具有维持血浆渗透压,调节血压,营养和促进伤口愈合的作用。其作为血液中的载体物质,参与多种生物分子如激素,氨基酸,胆色素和生物活性物质及药物等在血液中的运输。因此,人的血浆中提取的人血清白蛋白,在临床上主要用于治疗因失血本文档来自技高网...

【技术保护点】
人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,合成的适合哺乳动物细胞表达的密码子组成的人血清白蛋白的核苷酸序列及其功能等同物。

【技术特征摘要】
1.人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,合成的适合哺乳动物细胞表达的密码子组成的人血清白蛋白的核苷酸序列及其功能等同物。2.根据权利要求1所述的人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,核苷酸序列,于5’-端加入信号肽核苷酸序列。3.根据权利要求1所述的人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,其中对所说的人血清白蛋白编码序列具有SEQ ID NO 1所示的核苷酸序列。4.根据权利要求1所述的人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,编码具有SEQ ID NO 2所示的蛋白质序列。5.根据权利要求1-4中的任意一项所述的人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,包含编码人血清白蛋白的核苷酸序列的适合哺乳动物表达的重组表达载体。6.根据权利要求1所述的人血清白蛋白在哺乳动物细胞中的高效表达,其特征在于,其中包括一个或多个由(1)CMV的启动子区域,(2)编码信号肽和HSA的核苷酸序列,(3)SV40转录终止子,(4)原核可选择标志基因...

【专利技术属性】
技术研发人员:高闻达岳国华杨海林
申请(专利权)人:安泰吉北京生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:北京;11

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