可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒及测定方法技术

可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒及测定方法,该试剂盒由标准物质和反应试剂两部分组成，标准物质包括：特征肽段及其内标肽段；反应试剂包括：碳酸氢铵、二硫苏糖醇、碘乙酰胺、胰蛋白酶、甲酸。通过将含马血清白蛋白样品与反应试剂按一定的体积比混合，温育振荡后，使之发生酶解反应，再将标准物质和/或最终酶解产物分别注入高效液相色谱‑串联质谱仪中，根据母离子和子离子的质荷比（m/z）及特征肽段的保留时间（tR）进行定性鉴别，通过色谱峰面积变化测算出马血清白蛋白的绝对含量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的检测试剂盒及测定方法，属于检验测定

技术介绍
血清白蛋白约占血浆总蛋白的40～60％，是血浆中主要载体，起维持渗透压、pH缓冲、载体和营养作用，许多水溶性差的物质可以通过与其结合而被运输，如，胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子及药物等。有关检测血清白蛋白的检测方法有免疫双扩散法、免疫电泳法、双缩尿法、钨酸沉淀法和毛细管电泳法等。这些方法有易污染、背景值高的缺点，常使检测灵敏度降低，并且特异性较差；高压毛细管电泳法虽有较高准确度，但常易受到分子量大小接近的蛋白干扰，使检测特异性、灵敏度降低，并且检测时间较长，不适合痕/微量羊血清白蛋白的检测。目前，关于检测马血清白蛋白的特异性方法报道较少。
技术实现思路
技术问题：本专利技术的目的是提供一种马血清白蛋白检测试剂盒，给出一种采用本试剂盒可以克服现有技术缺点的马血清白蛋白的鉴定和含量测定的方法。该试剂盒给出了检测马血清白蛋白的标准物质和对含血清白蛋白样品进行酶解反应的反应试剂。可将标准物质和/或酶解反应产物(或含内标物质)注入(超)高效液相色谱-质谱仪中进本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：包括标准物质：标准物质包括特征肽段及其内标肽段，肽段序列为： 选择方式如下：(1)、所述标准物质特征肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或多种混合特征肽段使用；(2)、内标肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或多种混合内标物质使用；(3)、所述标准物质特征肽段与其内标肽段配成的内标物质，可以是单一内标物质、双混合内标物质或多混合内标物质，使用其中的一种、两种或多种；(4)、内标肽段与其他内标肽段配成两种或多种混合使用。

【技术特征摘要】
2015.12.17 CN 20151095429271.一种可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：包括标准物质：标准物质包括特征肽段及其内标肽段，肽段序列为：选择方式如下：(1)、所述标准物质特征肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或多种混合特征肽段使用；(2)、内标肽段单独使用，或与其他特征肽段配成两种或多种混合内标物质使用；(3)、所述标准物质特征肽段与其内标肽段配成的内标物质，可以是单一内标物质、双混合内标物质或多混合内标物质，使用其中的一种、两种或多种；(4)、内标肽段与其他内标肽段配成两种或多种混合使用。2.根据权利要求1所述的可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：该试剂盒还包括反应试剂：反应试剂，由以下成分组成3.根据权利要求1所述可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：所述标准物质的内标肽段是特征肽段中任一、二或多个氨基酸上的C、H、O、N被同位素标记后的肽段，其中，一个氨基酸上的C、H、O、N四个元素可同时被标记，或任意1～3个元素被标记。4.根据权利要求1所述可实现马血清白蛋白鉴定及绝对定量的试剂盒，其特征在于：1)标准物质①用以实现本发明试剂盒的标准物质是特征肽段，其是单一标准物质，或配成双混合标准物质或多混合标准物质，使用其中的一种或多种；单一标准物质I特征肽段1TYEATLEK单一标准物质II特征肽段2QSALAELVK单一标准物质III特征肽段3ILLSSAK单一标准物质IV特征肽段4ADFAEVSK双混合标准物质I特征肽段1TYEATLEK特征肽段2QSALAELVK双混合标准物质II特征肽段1TYEATLEK特征肽段3ILLSSAK双混合标准物质III特征肽段1TYEATLEK特征肽段4ADFAEVSK双混合标准物质IV特征肽段2QSALAELVK特征肽段3ILLSSAK双混合标准物质V特征肽段2QSALAELVK特征肽段4ADFAEVSK双混合标准物质VI特征肽段3ILLSSAK特征肽段4ADFAEVSK三混合标准物质I特征肽段1TYEATLEK特征肽段2QSALAELVK特征肽段3ILLSSAK三混合标准物质II特征肽段1TYEATLEK特征肽段2QSALAELVK特征肽段4ADFAEVSK三混合标准物质III特征肽段1TYEATLEK特征肽段3ILLSSAK特征肽段4ADFAEVSK三混合标准物质IV特征肽段2QSALAELVK特征肽段3ILLSSAK特征肽段4ADFAEVSK多混合标准物质②用以实现本发明试剂盒的内标肽段是单一内标肽段，或配成多混合内标肽段，使用其中的一种、两种或多种；单一内标肽段I内标肽段1TYEATLEK单一内标肽段II内标肽段2QSALAELVK单一内标肽段III内标肽段3ILLSSAK单一内标肽段IV内标肽段4ADFAEVSK双混合内标肽段I内标肽段1TYEATLEK内标肽段2QSALAELVK双混合内标肽段II内标肽段1TYEATLEK内标肽段3ILLSSAK双混合内标肽段III内标肽段1TYEATLEK内标肽段4ADFAEVSK双混合内标肽段IV内标肽段2QSALAELVK内标肽段3ILLSSAK双混合内标肽段V内标肽段2QSALAELVK内标肽段4ADFAEVSK双混合内标肽段VI内标肽段3ILLSSAK内标肽段4ADFAEVSK三混合内标肽段I内标肽段1TYEATLEK内标肽段2QSALAELVK内标肽段3...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜泓，陈默，张巍伟，王守云，封聪，袁明美，
申请(专利权)人：中国医科大学，
类型：发明
国别省市：辽宁;21