基于胶乳免疫比浊法的IgA试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种基于胶乳免疫比浊法的IgA试剂盒，其包括：试剂A，所述试剂A为pH＝8.0～9.4的甘氨酸缓冲体系，含有0.1～0.5g/L的高分子促聚剂、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质；以及试剂B，所述试剂B为pH＝6.5～7.3的MES缓冲体系，含有2.5～3g/L的羊抗人IgA多克隆抗体、5～10mL/L的羊抗人IgA多克隆抗体包被的胶乳、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质。本发明专利技术还公开了制备试剂B的方法。所述试剂盒可用于人IgA的测定，可有效避免非特异性反应，检测灵敏度较高，且具有较低的检测限。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测
，具体涉及一种基于胶乳免疫比浊法的IgA试剂盒及其制备方法。
技术介绍
免疫球蛋白A(IgA)按免疫功能可分为血清型和分泌型两种，血清型IgA存在于血清中，可介导调理吞噬ADCC作用，其含量占总IgA的85％左右。分泌型IgA存在于分泌液中，如唾液、泪液、初乳、鼻和支气管分泌液、胃肠液、尿液、汗液等，机体粘膜局部抗感染免疫的主要抗体，它能抑制微生物在呼吸道上皮附着，减缓病毒繁殖，是粘膜重要屏障，对某些病毒、细菌和一般抗原具有抗体活性，是防止病原体入侵机体的第一道防线。已有研究证明，呼吸道分泌液中IgA含量的高低直接影响呼吸道粘膜对病原体的抵抗力，两者呈正相关。现有技术中检测IgA的方法主要有免疫比浊法和放射免疫扩散法等，其中免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法，操作相对简单、成本低，在生化分析仪上使用较为广泛。免疫比浊法可分为免疫透射比浊法和免疫散射比浊法。其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中在高分子促聚剂(聚乙二醇等)的作用下聚合析出直径为340nm～700nm的颗粒，使反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基于胶乳免疫比浊法的IgA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：试剂A，所述试剂A为pH＝8.0～9.4的甘氨酸缓冲体系，含有0.1～0.5g/L的高分子促聚剂、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质；以及试剂B，所述试剂B为pH＝6.5～7.3的MES缓冲体系，含有2.5～3g/L的羊抗人IgA多克隆抗体、5～10mL/L的羊抗人IgA多克隆抗体包被的胶乳、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质。

【技术特征摘要】
1.一种基于胶乳免疫比浊法的IgA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：试剂A，所述试剂A为pH＝8.0～9.4的甘氨酸缓冲体系，含有0.1～0.5g/L的高分子促聚剂、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质；以及试剂B，所述试剂B为pH＝6.5～7.3的MES缓冲体系，含有2.5～3g/L的羊抗人IgA多克隆抗体、5～10mL/L的羊抗人IgA多克隆抗体包被的胶乳、1～10g/L的表面活性剂和0.5～10g/L的电解质。2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述胶乳为pH＝6.5～7.3的MES缓冲体系，是粒径为30～80nm优选40～50nm的羧基微球经NHS和EDC活化后再由羊抗人IgA多克隆抗体包被得到的胶乳；所述胶乳中，羧基微球的浓度为1～2g/L优选1g/L，NHS与羧基微球的质量比为0.05～0.1:1，EDC与羧基微球的质量比为0.05～0.1:1，包被用的羊抗人IgA多克隆抗体与羧基微球的质量比为0.05～0.1:1。3.如权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂A和所述试剂B分别还含有0.5～1g/L的防腐剂，所述防腐剂为proclin300和/或叠氮钠。4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂A中的高分子促聚剂为聚乙二醇6000，聚乙二醇6000在所述试剂A中的浓度为0.2～0.5g/L；所述试剂A和所述试剂B中的表面活性剂均为曲拉通X100；所述试剂A和所述试剂B中的电解质均为氯化钠。5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂A为pH＝8.6的100mmol/L甘氨酸缓冲体系，含有0.5g/L的聚乙二醇6000、1g/L的曲拉通X100、5g/L的氯化钠和1g/L的叠氮钠。6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂B...

【专利技术属性】
技术研发人员：王军峰，冯松，孟菲，
申请(专利权)人：上海执诚生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31