一种通过分步补料提高L-缬氨酸产酸的发酵工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种通过分步补料提高L-缬氨酸产酸的发酵工艺，包括以下步骤：（1）、培养成熟的菌种；（2）、将步骤（1）得到的成熟菌种接种至发酵罐内在以下条件下进行培养以制取L-色氨酸：培养温度34-36℃，pH采用补充液氨分段控制，0-18h7.0-7.2，18h-放罐6.4-6.8，溶氧分段控制，0-18h10-25%，18h-放罐15-40%，压力0.03-0.08MPa，风量0.3VVM-2.0VVM，过程中残糖控制0.01-0.5%。本发明专利技术通过对培养基配方的调整，并同时采取分时段补料工艺及分段控制溶氧的方式，促进了缬氨酸的生物合成，避免了氨基酸生物合成途径中的反馈调节作用，减少了副酸的生成，由原来的70-80h产酸4.5-5.5%提高到现在的50-55h产酸7.0-8.0%，转化率由原来的20-25%提高到30-32%，并且副酸较少有利于后续提纯。

【技术实现步骤摘要】
201610208596

【技术保护点】
一种通过分步补料提高L‑缬氨酸产酸的发酵工艺，其特征在于：包括以下步骤：（1）、培养成熟的菌种：先进行空罐灭菌和实罐灭菌，灭菌结束后降温冷却，然后进行接种，在以下条件下进行培养后得到成熟的菌种：培养温度30‑32℃，pH6.8‑7.2，溶氧＞25%，压力0.03‑0.08MPa，风量0.3VVM‑2.0VVM；（2）、发酵罐培养：先进行空罐灭菌和实罐灭菌，灭菌结束后降温冷却，然后将步骤（1）得到的成熟菌种接种至发酵罐内在以下条件下进行培养以制取L‑缬氨酸：培养基中含有玉米浆，培养温度30‑32℃，pH 7.0‑7.2，溶氧分段控制，0‑18h20‑30%，18h‑放罐10‑20%，压力0.03‑0.08MPa，风量0.3VVM‑2.0VVM，过程中残糖控制0.01‑0.5%，在发酵进行的10‑15h，18‑24h，28‑32h，分别补入培养基玉米浆用量的20%、20%、10%的灭菌玉米浆继续进行发酵。

【技术特征摘要】
1.一种通过分步补料提高L-缬氨酸产酸的发酵工艺，其特征在于：包括以下步骤：
（1）、培养成熟的菌种：先进行空罐灭菌和实罐灭菌，灭菌结束后降温冷却，然后进行接
种，在以下条件下进行培养后得到成熟的菌种：培养温度30-32℃，pH6.8-7.2，溶氧＞25%，
压力0.03-0.08MPa，风量0.3VVM-2.0VVM；
（2）、发酵罐培养：先进行空罐灭菌和实罐灭菌，灭菌结束后降温冷却，然后将步骤（1）
得到的成熟菌种接种至发酵罐内在以下条件下进行培养以制取L-缬氨酸：培养基中含有玉
米浆，培养温度30-32℃，pH7.0-7.2，溶氧分段控制，0-18h20-30%，18h-放罐10-20%，压力
0.03-0.08MPa，风量0.3VVM-2.0VVM，过程中残糖控制0.01-0.5%，在发酵进行的10-15h，18-
24h，28-32h，分别补入培养基玉米浆用量的20%、20%、10%的灭菌玉米浆继续进行发酵。
2.如权利要求1所述一种通过分步补料提高L-缬氨酸产酸的发酵工艺，其特征在于：所
述步骤（1）中使用的培养基为液体种子培养基，液体种子培养基的成分为：葡萄糖1.5-
4.5%、玉米浆2.0-5.0%、酵母粉0.2-0.8%、磷酸二氢钾、0.05-0.3%、豆浓0.5-3%、硫酸镁
0.01-0.08%、维生素B10.00001-0.0001%，生物素0.00001-0.0001%，其余为水。
3.如权利要求1所述一种通过分步补料提高L-缬氨酸产酸的发酵工艺，其特征在于：所
述步骤（2）中使用的培养基为液体发酵培养基，液体发酵培养基的成分为：葡萄糖4.0-
14%、玉米浆2.0-10%、豆浓0.5-5%、磷酸二氢...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹华杰，刘帅，李静，岳贵龙，张孟涛，
申请(专利权)人：河南巨龙生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41