抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体配制物制造技术

本发明专利技术提供稳定的药物抗体配制物，其包括冻干配制物，所述冻干配制物含有抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体和缓冲系统，其中所述配制物的pH为约7，且其中所述配制物具有低盐浓度进而降低所述配制物的离子强度。所述配制物可任选地进一步包含非离子表面活性剂、糖和/或非离子稳定剂。所述配制物可用于治疗多种疾病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体配制物专利
本专利技术提供稳定的药物抗体配制物，其包括冻干的配制物，所述冻干的配制物含有抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体和缓冲系统，其中所述配制物的pH为约7，且其中所述配制物具有低盐浓度进而降低所述配制物的离子强度。所述配制物可任选地进一步包含非离子表面活性剂、糖和/或非离子稳定剂。所述配制物可用于治疗多种疾病。专利技术背景基于其生物学功能，IL-4和IL-13是治疗上重要的细胞因子，且在许多疾病中起至关重要的作用，包括哮喘(CurrOpinAllergyClinImmunol2005,Vo.5,161-166)。已表明IL-4能够抑制自身免疫性疾病，且IL-4和IL-13都展示增强抗肿瘤免疫响应的潜力。由于两种细胞因子都参与过敏性疾病的病理，对这些细胞因子的抑制可提供治疗效果。为开发包含适于皮下施用的包含抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体的药物配制物，所述抗体必须浓缩至约100mg/mL或更高。然而，在这样的高浓度下可引发许多复杂问题(complication)，包括粘度提高、pH偏移、溶液颜色变化和可视和亚可视颗粒的形成。抗体配制物由于在高浓度下高度易于聚集的事实而进一步复杂化。尽管典型的抗体在5℃历时4年的过程中通常形成5％以下高分子量聚集物(HMW)，但抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体在25℃以0.5-1％每小时且在5℃以0.1％每小时的速率形成HMW。事实上，该抗体具有如此强的聚集倾向，以至于其不能以目标浓度范围配制于液体中。最后，抗IL4/抗IL13双特异性抗体具有特别低的等电点，使其由于溶解度的问题更难以配制。举例来说，抗IL4/抗IL13双特异性抗体具有5.8-6.2的等电点，而大多数抗体具有8-10的等电点。相应地，对于可解决这些复杂问题的改进和稳定的药物配制物存在需求。专利技术概述为满足这些或其他需要，本文提供了高度稳定的抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体配制物。已惊讶地发现高度稳定的抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体配制物可以为液体和冻干粉末的形式，其包含抗IL-4/抗IL-13双特异性抗体和缓冲系统，其中所述配制物的pH为约pH7，且其中所述配制物具有低盐浓度进而降低所述配制物的离子强度。所述配制物可任选地进一步包含非离子表面活性剂、糖和/或非离子稳定剂。这些配制物可改善常规配制物，后者经常在配制物中增加抗体浓度时导致抗体的分子聚集(HMW)并形成可视和亚可视颗粒。具体地，本专利技术的配制物就可视颗粒、亚可视颗粒、低分子量蛋白和高分子量蛋白而言展现良好的稳定性。本专利技术的一个实施方案提供稳定的抗体配制物，其包含：含有式VL1-接头-VL2的轻链和式VH1-接头-VH2的重链的双特异性抗IL-4/抗IL-13抗体或其抗原结合片段，其中VL1和VH1形成IL-13抗原结合结构域且VL2和VH2形成IL-4抗原结合结构域；和适于将所述配制物的pH维持在约pH7的缓冲系统；且其中所述配制物具有低盐浓度进而降低所述配制物的离子强度。在具体的实施方案中，VL1包含SEQIDNO:1的CDR序列；VH1包含SEQIDNO:2的CDR序列；VL2包含SEQIDNO:3的CDR序列；且VH2包含SEQIDNO:4或5的CDR序列。在可替换的实施方案中，VL1包含SEQIDNO:1的氨基酸序列；VH1包含SEQIDNO:2的氨基酸序列；VL2包含SEQIDNO:3的氨基酸序列；且VH2包含SEQIDNO:4或5的氨基酸序列。在具体的实施方案中，所述轻链包含式N-VL1-接头-VL2-CL，其中CL是抗体的轻链恒定结构域，且其中重链包含式N-VH1-接头-VH2-CH1-CH2-CH3，其中CH2-CH3对应抗体的Fc结构域。在具体的实施方案中，所述接头包含SEQIDNO:6的氨基酸序列。在具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段进一步包含恒定区结构域。在具体的实施方案中，所述恒定区结构域选自下组：CH1、CH2、CH3和CL。在具体的实施方案中，所述双特异性抗体或其抗原结合片段是人源化的IgG4双特异性抗体或其抗原结合片段。在具体的实施方案中，所述抗体或其抗原结合片段的浓度为约100mg/mL。在本专利技术的一些实施方案中，所述缓冲系统包含至少两种缓冲剂。在具体的实施方案中，所述缓冲系统浓度为约10mM。在具体的实施方案中，所述缓冲系统包含Tris缓冲剂和磷酸盐缓冲剂。在具体的实施方案中，所述Tris缓冲剂的浓度为约3.7mM。在具体的实施方案中，所述磷酸盐缓冲剂的浓度为约6.3mM。在具体的实施方案中，所述Tris缓冲剂的浓度为约3.7mM且所述磷酸盐缓冲剂的浓度为约6.3mM。在本专利技术的一些实施方案中，所述配制物进一步包含非离子表面活性剂。在具体的实施方案中，所述非离子表面活性剂的浓度为约0.05％至约0.2％(w/v)。在具体的实施方案中，所述非离子表面活性剂为聚山梨酯。在具体的实施方案中，所述聚山梨酯是聚山梨酯80。在具体的实施方案中，所述聚山梨酯80的浓度为约0.05％至约0.2％(w/v)。在具体的实施方案中，所述聚山梨酯80的浓度为约0.2％(w/v)。在本专利技术的一些实施方案中，所述配制物进一步包含糖。在具体的实施方案中，所述糖的浓度为约5％(w/v)。在具体的实施方案中，所述糖是二糖。在具体的实施方案中，所述二糖是蔗糖。在具体的实施方案中，所述蔗糖的浓度为约5％(w/v)。在本专利技术的一些实施方案中，所述配制物进一步包含非离子稳定剂。在具体的实施方案中，所述非离子稳定剂的浓度为约1％至约3％(w/v)。在具体的实施方案中，所述非离子稳定剂为氨基酸或糖。在具体的实施方案中，所述氨基酸是脯氨酸。在具体的实施方案中，所述糖是甘露糖醇。在具体的实施方案中，所述脯氨酸的浓度为约1％至约3％(w/v)。在具体的实施方案中，所述脯氨酸为约3％(w/v)。在具体的实施方案中，所述甘露糖醇的浓度为约3％(w/v)。在本专利技术的一些实施方案中，所述配制物是冻干配制物。在本专利技术的一些实施方案中，所述配制物就可视颗粒、亚可视颗粒、低分子量蛋白和高分子量蛋白而言展现良好稳定性。本专利技术的一个实施方案提供稳定的冻干抗体配制物，其包含：约100mg/mL的双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQIDNO:2和4的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQIDNO:1和3的氨基酸序列的轻链可变区；约10mM的缓冲系统，其中所述缓冲系统包含浓度约3.7mM的Tris缓冲剂和浓度约6.3mM的磷酸盐缓冲剂；约0.2％(w/v)聚山梨酯80；约5％(w/v)蔗糖；和约3％(w/v)脯氨酸；其中所述配制物的pH为约pH7。本专利技术的一个实施方案提供稳定的冻干抗体配制物，其包含：约100mg/mL的双特异性抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段包含含有SEQIDNO:2和4的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQIDNO:1和3的氨基酸序列的轻链可变区；约10m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种稳定的抗体配制物，其包含：含有式VL1‑接头‑VL2的轻链和式VH1‑接头‑VH2的重链的双特异性抗IL‑4/抗IL‑13抗体或其抗原结合片段，其中VL1和VH1形成IL‑13抗原结合结构域且VL2和VH2形成IL‑4抗原结合结构域；和适于将所述配制物的pH维持在约pH7的缓冲系统；且其中所述配制物具有低盐浓度进而降低所述配制物的离子强度。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.02.05 EP 14305160.5;2013.04.29 US 61/816,8991.一种稳定的抗体配制物，其包含：
100mg/mL的含有式VL1-接头-VL2的轻链和式VH1-接头-VH2的重链的双特异性抗IL-4/抗IL-13抗体，其中VL1和VH1形成IL-13抗原结合结构域且VL2和VH2形成IL-4抗原结合结构域，其中
VL1包含SEQIDNO:1的氨基酸序列；
VH1包含SEQIDNO:2的氨基酸序列；
VL2包含SEQIDNO:3的氨基酸序列；且
VH2包含SEQIDNO:4或5的氨基酸序列；
其中所述接头包含SEQIDNO:6的氨基酸序列；和
适于将所述配制物的pH维持在约pH7的缓冲系统，其中所述缓冲系统包含约3.7mMTris缓冲剂和约6.3mM磷酸盐缓冲剂；且
其中所述配制物包含0.2％(w/v)聚山梨酯80、5％(w/v)蔗糖和约3％(w/v)甘露糖醇，其中所述双特异性抗体是人源化的IgG4双特异性抗体。

【专利技术属性】
技术研发人员：S·卡拉永，O·布西夫，
申请(专利权)人：赛诺菲，
类型：发明
国别省市：法国;FR