多糖结合疫苗中残余CDAP的高效液相色谱检测方法技术

1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟化硼(CDAP)能够活化多糖形成氰酸酯，而被用于多糖结合疫苗的制备工艺中；本发明专利技术提供一种多糖结合疫苗中残余CDAP的高效液相色谱检测方法，包括步骤：用CDAP标准品配制对照品溶液；将待检样品用超滤离心管进行离心，收取滤过液用0.45μm膜过滤作为供试品溶液；供试品溶液和对照品溶液CDAP分别上样于高效液相色谱柱，上样后进行洗脱，记录色谱图；根据对照品溶液CDAP浓度及其色谱峰面积，供试品溶液CDAP色谱峰面积，采用外标法计算试样中CDAP的浓度。本发明专利技术方法简单、操作方便、精确度高，可准确、快速实现多糖结合疫苗中残余CDAP的有效监控。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于测试分析领域，具体为一种利用高效液相色谱测定CDAP的方法。
技术介绍
多糖结合疫苗是通过化学方法将多糖抗原与载体蛋白共价结合，抗原类型从 胸腺非依赖性抗原转变为胸腺依赖性抗原，能激发2岁以下儿童、老年人和免疫缺陷者 体内产生有效的免疫应答，并产生免疫记忆，诱导产生的保护性抗体主要为免疫球蛋白 (Immunoglobulin，Ig)G，比多糖疫苗诱导产生的IgM更有效，且能维持较长时间，具有多糖 疫苗不可比拟的优势。 在多糖结合疫苗的制备工艺中，通常采用活化剂如溴化氰对细菌多糖进行活化。 与溴化氰一样，1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟化硼（CDAP)能够活化多糖形成氰酸酯 (-0-C = N)。但相比于溴化氰，CDAP具有较强的活化效率且安全性高，被广泛的应用在多糖 结合疫苗的制造领域。虽然该物质毒性低，但为了对结合疫苗中残余CDAP进行有效监控， 准确测定多糖结合原液疫苗中CDAP的残留量对疫苗产品质量控制具有重要意义。目前，国外采用薄层色谱法（TLC)，仅能用来测定CDAP的纯度，国内尚无文献报道 多糖结合疫苗中CDAP残留量的测定方法，因此如何对多糖本文档来自技高网...

【技术保护点】
多糖结合疫苗中残余CDAP高效液相色谱测定方法，其特征在于包括如下步骤：(1)用CDAP标准品配制对照品溶液；(2)待检样品用超滤离心管进行离心，收取滤过液用0.45μm膜过滤作为供试品溶液；(3)供试品溶液和对照品溶液CDAP分别上样于高效液相色谱柱，上样后进行洗脱，记录色谱图；(4)根据对照品溶液CDAP浓度及其色谱峰面积，供试品溶液CDAP色谱峰面积，采用外标法计算试样中CDAP的浓度。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓华，孙述学，王震，褚自青，周荔葆，王振业，刘晓磊，李晓帆，
申请(专利权)人：北京成大天和生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11