一种从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物及用途制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，具体是从重楼属(Paris)植物中分离得到的一种甾体皂苷类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用，甾体皂苷类化合物分子式为C58H96O26，化学结构式为：本发明专利技术的甾体皂苷类化合物对人肝癌细胞HepG2和人胶质瘤细胞U87MG具有明显的抑制作用，其半数有效抑制浓度(IC50值)分别为16.02±2.67μmol/L和16.98±1.21μmol/L。

【技术实现步骤摘要】
一种从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物及用途
本专利技术涉及医药
，是从重楼属(Paris)植物中分离的新化合物及用途，具体地说是从传统中药金线重楼中提取分离到一种新的甾体皂苷类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
中药重楼来源于百合科(Liliaceae)重楼属植物，主要分布于亚欧大陆的热带和温带地区，全世界共有24个种，我国种类最多，有19种，以西南各省区的种类和资源最为丰富。本属植物是一类极具药用价值的植物，其根茎在我国有着悠久的药用历史，具有清热解毒、消肿止痛和凉肝定惊之功效，用于治疗痈疮、毒蛇咬伤、凉风抽搐、咽喉肿痛和跌打伤痛等症。现代药理学研究表明其具有抗肿瘤、抑菌与止血等作用。金线重楼(ParisdelavayiFranchet)主要分布于四川、云南、湖南和湖北等地，迄今对其化学成分的研究报道甚少。我们对金线重楼总皂苷进行了系统分离，获得了一种新的甾体皂苷类化合物，其化学结构和抗肿瘤活性未见有过报道。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物及在制备抗肿瘤药物方面的应用。为此，本专利技术的目的是这样实现的，一种从金线重楼中提取分离的新的甾体皂苷类化合物，采用高分辨质谱和二维核磁共振谱等光谱技术及化学方法，确定了该化合物的分子式为C58H96O26，化学结构式如下：上述结构化学名称为(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖-Δ5(6)-烯-呋甾-3β,26-二羟基-22α-甲氧基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖苷，即(25R)-26-O-β-D-Glc-22-methoxy-5-ene-furost-3β,26-diol-3-O-α-L-Rha(1→3)-α-L-Rha-(1→3)-[β-D-Glc-(1→4)]-α-L-rhamnopyranoside，是从金线重楼中分离的新的甾体皂苷类化合物，以下简称其为JXZG2。本专利技术还提供了从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述甾体皂苷类化合物可以单独使用或与其他药物混合，配制成在临床上可以使用的注射剂、或散剂、或丸剂、或片剂、或微囊剂、或软胶囊剂、或膜剂、或膏剂、或酊剂、或颗粒剂、或气雾剂。本专利技术的特点是：式Ι化合物JXZG2苷元与3位糖链结构非常罕见，在本属植物皂苷中首次发现。该化合物对肝癌细胞和胶质瘤细胞有明显的抑制作用，表明其可以进一步作为新的抗肿瘤药物进行研究开发。附图说明图1是本专利技术甾体皂苷类化合物JXZG2的HMBC和NOESY相关。具体实施方式实施例1：本实施例提供了该种甾体皂苷类化合物的提取和分离，是从金线重楼中分离获得，分子式为C58H96O26，化学结构式为：上述结构其化学名称为(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖-Δ5(6)-烯-呋甾-3β,26-二羟基-22α-甲氧基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖苷，即(25R)-26-O-β-D-Glc-22-methoxy-5-ene-furost-3β,26-diol-3-O-α-L-Rha(1→3)-α-L-Rha-(1→3)-[β-D-Glc-(1→4)]-α-L-rhamnopyranoside，以下简称其为JXZG2。制备JXZG2的原料为采自陕西省宝鸡市太白县金线重楼根茎，经粉碎成粗粉后，取6公斤，加入60升浓度为70％的乙醇进行回流提取，共提取3次，每次2小时，合并提取液，减压回收溶剂，得乙醇提取物680克。提取物分散于8升水中，用石油醚萃取3次，每次8升。萃取后的水相再用正丁醇萃取3次，每次8升，合并正丁醇萃取液，减压回收溶剂后得到总皂苷提取物170克。将总皂苷进行硅胶柱层析，以体积比为10:1:0～6.5:3.5:1(均取下层作为洗脱液)的氯仿-甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，按150mL为一个流份接收，并用硅胶薄层层析检测(薄层展开溶剂采用体积比为10:1的水饱和正丁醇-甲醇混合溶剂，显色剂为体积比为1:4的硫酸-甲醇溶液，喷显色剂后于105℃加热显色)，收集Rf值在0.5～0.65处显示紫红色斑点的流份，即为含化合物JXZG2的总皂苷混合物，减压蒸干溶剂后得9.8克样品。样品采用SephdexLH-20(GE-Healthcare公司)葡聚糖凝胶柱层析，以甲醇洗脱，按20mL为一个流份接收，薄层层析检测，合并含JXZG2的第11～13流份，减压蒸干溶剂后得1.0克样品。最后经高效液相色谱仪(戴安公司)分离纯化(HPLC条件为：YMC-PackR&DODS-A色谱柱20×250mm，55％乙腈为流动相，流速8mL/min，25℃，206nm紫外检测)，得到JXZG2的纯品20mg。实施例2：在实施例1的基础上，对化合物JXZG2的结构进行鉴定：化合物JXZG2为白色无定形粉末(MeOH)，Liebermann-Burchard和Molish反应均呈阳性，提示该化合物可能为一甾体苷类化合物。ESI-MS给出其准分子离子峰m/z1231[M+Na]+和m/z1207[M-H]-，HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z1231.6095[M+Na]+(calc.forC58H96O26Na1231.6088)，结合13C-NMR(125MHz，CD3OD)数据，如表1所示，确定其分子式为C58H96O26。分析该化合物的1H-NMR(500MHz，CD3OD)，可观察到在其高场区有7个甲基信号δ0.87(3H，s，CH3-18)，0.98(3H，d，CH3-27)，1.04(3H，d，J＝6.9Hz，CH3-21)，1.08(3H，s，CH3-19)，1.25(3H，d，J＝6.0Hz，CH3ofRha)，1.28(3H，d，J＝6.0Hz，CH3ofRha″)，1.31(3H，d，J＝6.2Hz，CH3ofRha′)。同时，在其低场区可以看到一个宽单峰的烯氢质子信号δ5.42(1H，brs，H-6)。通过分析其13C-NMR、HSQC及其DEPT谱可观察到7个甲基碳信号δ17.0(C-18)，17.4(C-27)，16.3(C-21)，20.0(C-19)，18.1(CH3ofRha)，18.0(CH3ofRha′)和18.7(CH3ofRha″)，一对双键碳信号δ142.0(C-5,C)和δ122.8(C-6,CH)预示1个三取代双键的存在。此外，C-16位与C-22位为连氧碳，其化学位移值分别为δ82.6(一般为δ80.0左右)和δ114.1(一般为δ109.0左右)，这两个碳信号为甾体皂苷中苷元极具特征性信号，易于辨别。C-22位碳信号出现在δ114.1(一般的，对于呋甾烷型甾体皂苷元，当C-22位连有甲氧基时，22位C的化学位移出现在δ113.5)处，较F环闭合时向低场区移了约δ5.1，推测F环开环且C-22位连有甲氧基，再结合该化合物的二维谱图(HSQC，HMBC，TOCSY，NOESY及1H-1HCOSY)归属了其苷元上所有的碳、氢信号，见表1，并与已知化合物dichotomin的波本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物，其特征在于：所述甾体皂苷类化合物分子式为C58H96O26，化学结构式为：上述结构化学名称为(25R)‑26‑O‑β‑D‑吡喃葡萄糖‑Δ5(6)‑烯‑呋甾‑3β,26‑二羟基‑22α‑甲氧基‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖‑(1→3)‑α‑L‑吡喃鼠李糖‑(1→3)‑[β‑D‑吡喃葡萄糖‑(1→4)]‑α‑L‑吡喃鼠李糖苷，是从金线重楼中分离的甾体皂苷类化合物，以下简称其为JXZG2。

【技术特征摘要】
1.一种从金线重楼中提取的甾体皂苷类化合物，其特征在于：所述甾体皂苷类化合物分子式为C58H96O26，化学结构式为：上述结构化学名称为(25R)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖-Δ5(6)-烯-呋甾-3β,26-二羟基-22α-甲氧基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖-(1→3)-[β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)]-α-L-吡喃鼠李糖苷，是从金线重楼...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘杨，汤海峰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61