一种高稳定性的丁香精油纳米脂质体抗菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术属于抗菌剂及药物制剂或者化妆品领域，具体涉及一种高稳定性的丁香精油纳米脂质体抗菌剂及其制备方法。本发明专利技术由丁香精油，大豆卵磷脂，胆固醇，表面活性剂，壳聚糖，明胶制成多层丁香精油纳米脂质体。其方法是将丁香精油，大豆卵磷脂，胆固醇混合于有机溶剂，减压蒸干形成光滑的薄膜，加入水相介质和表面活性剂溶解膜状物并超声成乳，再分别与壳聚糖，明胶溶液搅拌均质均匀，通过离心和微孔滤膜过滤，得到粒径为纳米级的脂质体。本发明专利技术制备工艺重现性好，丁香精油多层纳米脂质体包封率最高可达83.6%，且产品形态完整，粒径均一，具有良好的稳定性与抗菌性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗菌剂及药物制剂或者化妆品领域，具体涉及一种高稳定性的丁香精 油纳米脂质体抗菌剂及其制备方法。
技术介绍
丁香为桃金娘科植物丁香的花蕾，是我国传统的中草药，气微香，味辛辣，含淀粉 及少量挥发油，具有抗菌、消炎、抗病毒等功效；丁香精油是从丁香树的花蕾、叶子等提取的 芳香精油，是一种高效、天然的抗菌剂，研究表明，它对许多植物病原真菌与食品中病原细 菌有着较强的抑菌效果；丁香精油主要含有丁香酚，丁香酚乙酸酯，石竹烯，甲基正庚基甲 酮等挥发性成分，丁香精油可治疗牙痛、支气管炎，神经痛、胃酸，抗呼吸系统及泌尿系统感 染，减轻痢疾所造成之不适与疼痛，改善衰弱体质与贫血，催情，驱虫，促进血液循环，治疗 皮肤溃疡及伤口发炎，治疗疥癣，改善粗糙肌肤，针对我国丁香资源比较丰富以及丁香在食 用香料中具有良好的抑菌效果，丁香精油为我国GB2760-86规定允许使用的食用香料。 国内外有很多关于丁香精油在化妆品、医学等方面的专利申请，CN102258577A提 供了丁香油、丁香酚及其衍生物在制备组胺H3受体的拮抗剂或反向激动剂的药物中的用 途；CN101731328A公开了一种丁香油作为储粮害虫防治剂的应用；CN103908494A公开了 一种丁桂温胃胶囊及其制备工艺方法具体步骤；韩国专利KR20140126466A公开了一种由 丁香提取物或者丁香酚治疗或预防中耳炎的方法；法国专利FR1261188公开了一种由柠檬 猫薄荷精油，香茅精油，丁香精油，柠檬草精油，蜜里萨香草精油等混合精油制备的化妆品， 用于治疗鱼鳞病和过敏性皮炎；CN104178341A公开了一种微胶囊丁香精油的制备方法及 其在烟草中的应用，属卷烟加工
；CN101648126A公开了一种利用环糊精母液制备 丁香油微胶囊的方法，属于丁香油微胶囊制备
虽然丁香精油用途广泛，但是丁香精油在使用过程中也存着不少困扰；丁香精油 香气浓郁，在加入食品中时会影响食品原有的风味，并且，丁香精油具有较强的挥发性能， 保存不当或者在使用过程中都有部分精油在挥发，另外，丁香精油有光敏性，对阳光、灯光 敏感，在光的照射下易发生化学性质的变化，为了改善这些问题，本专利专利技术了一种包裹丁 香精油的纳米脂质体的制备方法。 纳米脂质体是一种具有类似生物膜结构的脂质双分子层囊泡，因此具有良好的生 物相容性，易与细胞发生融合，丁香精油被包裹在脂质体内，能受到脂质体双层膜的保护， 可以避免挥发、光照变质，从而提高了精油的稳定性和利用性，但由于脂质体的缓释作用， 包裹精油的脂质体保质期受限，所以，选用壳聚糖和明胶制成稳定性高的多层脂质体；由于 纳米脂质体的粒径处于纳米级范围，具有突出的纳米效应，纳米脂质体附着能力，穿透能力 强，可有效携带丁香精油进入细菌等靶细胞，发挥功效作用，丁香精油多层纳米脂质体有效 地提高了精油的利用率和贮藏期。
技术实现思路
本专利技术的目的是公开一种高稳定的丁香精油纳米脂质体及其制备方法，通过将丁 香精油包裹在多层纳米脂质体中，以实现减少丁香精油在使用过程中的挥发，从而减少丁 香精油的浪费，达到长效抗菌与高效利用的目的。 -种高稳定性的丁香精油纳米脂质体抗菌剂，丁香精油包裹在磷脂双分子层中， 其特征在于：磷脂双分子层为第一层纳米脂质体，还设有第二层纳米脂质体，第二层由壳聚 糖组成。 进一步地，所述的一种高稳定性的丁香精油纳米脂质体抗菌剂，其特征在于：还设 有第三层纳米脂质体，第三层由明胶组成。 进一步地，第二层纳米脂质体中壳聚糖的浓度为0? 2mg/mL。 进一步地，第三层纳米脂质体中明胶的浓度为0. 4mg/mL。 本专利技术由丁香精油，大豆卵磷脂，胆固醇、表面活性剂，壳聚糖和明胶制成丁香精 油纳米脂质体；大豆卵磷脂、胆固醇是构成脂质体的组要成分，胆固醇均有调节膜流动性的 作用，所以考察其两者的配比变化，对构成的脂质体分散性等参数有无影响；表面活性剂是 增加脂质体稳定性；丁香精油浓度是根据包封率来确定的；醋酸盐溶液的PH是为了最佳溶 解壳聚糖；壳聚糖和明胶都可以增加稳定性。 本专利技术的制备方法是将丁香精油，豆卵磷脂，胆固醇混合于有机溶剂，减压蒸干形 成光滑的薄膜，加入水相介质和表面活性剂组成的混合溶液溶解薄膜并超声成乳、离心后 取上层液体过滤得到单层丁香精油纳米脂质体，其特征在于：将单层丁香精油纳米脂质体 与壳聚糖溶液搅拌均匀，通过离心和微孔滤膜过滤，得到粒径为纳米级的双层丁香精油纳 米脂质体。 进一步地，将双层丁香精油纳米脂质体与明胶溶液搅拌均匀，通过离心和微孔滤 膜过滤，得到粒径为纳米级的多层丁香精油纳米脂质体。 进一步地，本专利技术的大豆卵磷脂和胆固醇的质量比例为5:1;表面活性剂、丁香精 油与胆固醇的质量比为：1:5:4,此条件下可以得到最高的包封率。 进一步地，表面活性剂为PVP，混合溶液中PVP的浓度为L0mg/mL。 单层丁香精油纳米脂质体与壳聚糖溶液的体积比为1:10;双层丁香精油纳米脂 质体与明胶溶液的体积比为1:10。 本专利技术中所述的有机溶剂是氯仿。 本专利技术中所用的水相介质是根据中国药典2000版标准配制的醋酸盐缓冲溶液， pH值 3. 5~4. 0。 所述的壳聚糖溶液为壳聚糖的醋酸盐溶液，浓度为0.2mg/mL，醋酸盐溶液是根 据中国药典2000版标准配制的醋酸盐缓冲溶液，pH值3. 5~4. 0,优选3. 6,能够最佳溶解壳 聚糖。 所述明胶溶液为明胶的醋酸盐溶液，浓度为0. 4mg/mL，醋酸盐溶液是根据中国药 典2000版标准配制的醋酸盐缓冲溶液，pH值3. 5~4. 0。 本专利技术中脂质体的第一层是磷脂双分子层，即人工细胞膜层。 本专利技术中脂质体的第二层由壳聚糖组成，浓度为0. 2mg/mL。 本专利技术中脂质体的第三层由明胶组成，浓度为0.4mg/mL。【附图说明】 图1为丁香精油纳米脂质体的包封率。 图2为丁香精油纳米脂质体的粒径与多分散系数roi。 图3为多层丁香精油纳米脂质体荧光显微图。 图4为多层丁香精油纳米脂质体原子力显微图。 图5多层丁香精油纳米脂质体对大肠杆菌的抗菌性能。图6多层丁香精油纳米脂质体对金黄色葡萄球菌的抗菌性能。 表1为丁香精油纳米脂质体的Zeta电位。【具体实施方式】 通过下面实例说明本专利技术的【具体实施方式】，但本专利技术的保护内容，不仅局限于此 实施例1多层丁香精油纳米脂质体的包封率 1实验材料 大豆卵磷脂；BR;国药集团化学试剂有限公司。 胆固醇；AR;国药集团化学试剂有限公司。 三氯甲烷；AR;国药集团化学试剂有限公司。 丁香精油；AR;法国fIorihana精油。PVP;GR;国药集团化学试剂有限公司。 壳聚糖；BR;国药集团化学试剂有限公司。 明胶；BR;国药集团化学试剂有限公司。 2实验方法 1)单层丁香精油纳米脂质体的制备 ①称取Ig大豆卵磷脂，0.2g胆固醇和250mg的丁香精油，加50mL氯仿使其溶解。 ②在旋转蒸发仪中蒸发至溶剂蒸干，蒸发温度为10~30 °C，圆底烧瓶内壁会形 成光滑的薄膜；然后将所得产品放入真空干燥箱中，30°C，真空状态下干燥24小时。 ③称取0. 05g的PVP于50mL醋酸盐缓冲液中，超声波条件下扩散，然后将PVP 的醋酸盐缓冲液加入圆底烧瓶本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高稳定性的丁香精油纳米脂质体抗菌剂，丁香精油包裹在磷脂双分子层中，其特征在于：磷脂双分子层为第一层纳米脂质体，还设有第二层纳米脂质体，第二层由壳聚糖组成，以提高包封率、稳定性和抗菌性能。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林琳，赵呈婷，崔海英，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32