去氢灯心草二酚在制备抗肿瘤药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于化工领域及医药领域，涉及去氢灯心草二酚在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明专利技术提供了去氢灯心草二酚在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明专利技术还提供了一种抑制体外肿瘤细胞增殖的方法，即将去氢灯心草二酚加入肿瘤细胞的培养液中。去氢灯心草二酚是天然产物，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖。本发明专利技术的小分子化合物作为新的抗肿瘤药物或者其辅助成分进行开发，抑瘤效果明显，绿色环保，将为治疗和治愈肿瘤提供了一种新的途径和手段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于化工领域及医药领域，涉及去氢灯心草二酚在制备抗肿瘤药物中的应 用。
技术介绍
肿瘤是机体在各种致癌因素作用下，局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对 其生长的正常调控，导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。我国的肿瘤病例数相当庞 大，有资料显示占全世界病例数的55%。 良性肿瘤对机体的影响较小，主要表现为局部压迫和阻塞症状。恶性肿瘤由于分 化不成熟、生长较快，浸润破坏器官的结构和功能，并可发生转移，因而对机体影响严重。恶 性肿瘤除可引起与上述良性肿瘤相似的局部压迫和阻塞症状外，还可有发热、顽固性疼痛， 晚期可出现严重消瘦、乏力、贫血和全身衰竭的状态。 中医认为，癌症的起因首先是人体内阴阳平衡，组织细胞在不同的致癌因素长期 作用下，细胞突变而引起的。其实癌组织也是人体的一部分，只有在人本阴阳平衡失调，五 行生克乘侮发生变化的前提下，人体的免疫监控系统才会对其失去监控，任其发展。中草药 能够以调理气血、调整阴阳平衡、维持正常生命体征而保命；以培补正气、产生抗体，清理〃 毒源〃而治本。因而，中草药提取物成为治疗肿瘤一个重要方向。 去氢灯心草二酚提取自中草药灯心草。灯心草(学名：JuncuseffususL)是多年 生草本水生植物，地下茎短，匍匐性，杆丛生直立，圆筒形，实心，茎基部具棕色，退化呈鳞片 状鞘叶，穗状花序，顶生，在茎上呈假侧生状，基部苞片延伸呈茎状，花下具2枚小苞片，花 被裂片6枚，雄蕊3枚，雌蕊柱头3分歧。褐黄色蒴果，卵形或椭圆形，种子黄色呈倒卵形。 灯心草也是药用植物，其茎髓或全草入药具有清热、利水渗湿之功效，可用于淋病，水肿，心 烦不寐，喉痹，创伤等症。 去氢灯心草二酚属于天然产物，生物利用度高、性质比较稳定，具有临床使用价 值。目前关于去氢灯心草二酚的化学结构研究方面报道较少，系统的生物活性研究更少。随 着人们对其的化学和生物学研究的深入，其分子作用机制将逐步明确，这将进一步推动此 类化合物的化学结构修饰和构效关系研究，并有助于提高灯心草的药用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供去氢灯心草二酚的新的药物用途。 -方面，本专利技术提供了。其中，去氢灯 心草二酚的英文全称为dehydroeffusol，其结构如式I所示； 所述的抗肿瘤药物可以是抗肝癌药物，抗乳腺癌药物、抗宫颈癌药物，也可以是抗 血癌药物。 实验结果表明，去氢灯心草二酚能够抑制多种癌细胞生长。其中部分的IC5tl达到 了微摩（Umol/L或者iiM)级。 该抗肿瘤药物可以为针剂或者片剂。 去氢灯心草二酚能够导致肿瘤细胞的Gl期阻滞，尤其是肝癌细胞的Gl期阻滞。 在本专利技术的一个优选例中，去氢灯心草二酚能够导致QGY细胞的Gl期阻滞。 另一方面，本专利技术提供了一种抑制体外肿瘤细胞增殖的方法，即将去氢灯心草二 酚加入肿瘤细胞的培养液中。 所述的肿瘤细胞可以是肝癌细胞、血癌细胞、宫颈癌细胞、乳腺癌细胞或者胰腺癌 细胞。在本专利技术的优选例中，上述方法中，所述的肿瘤细胞可以是肝癌细胞、胃癌细胞、宫颈 癌细胞或者血癌细胞。 更好的，所述的肿瘤细胞是Mcf-7、QGY、K562、HGC或者Hela。 加入去氢灯心草二酚的终浓度为I-IOOiiM。例如，l-5iiM，I-IOiiM，2-12iiM， 2-20iiM，2-30iiM，2-60iiM，14-28iiM，15-30iiM，10-50iiM，5-60iiM，等等。另一方面，本专利技术提供了一种抗肿瘤药物，所述的抗肿瘤药物的活性成分是去氢 灯心草二酚。 在本专利技术的优选例中，上述抗肿瘤药针对的肿瘤是肝癌细胞、胃癌细胞、宫颈癌细 胞或者白血病细胞。 本专利技术提供了。去氢灯心草二酚是天 然产物，能够明显抑制肿瘤细胞的增殖。本专利技术的小分子化合物作为新的抗肿瘤药物或者 其辅助成分进行开发，抑瘤效果明显，绿色环保，将为治疗和治愈肿瘤提供了一种新的途径 和手段。【附图说明】 图1 :0微摩浓度的去氢灯心草二酚(阴性对照）对QGY细胞的细胞周期的影响。 图2 :10微摩浓度的去氢灯心草二酚对QGY细胞的细胞周期的影响。 图3 :20微摩浓度的去氢灯心草二酚对QGY细胞的细胞周期的影响。 图4:去氢灯心草二酚对QGY细胞的细胞周期的影响。图4为图1-图3的柱状图。 以上图1-4表明，去氢灯心草二酚能导致细胞周期的Gl期阻滞。【具体实施方式】 实验方法： 1?细胞复苏 1)从液氮罐中取出冻存管，直接投入37°C温水中，并不时摇动令其尽快融化。 2)从37°C水浴中取出冻存管，用吸管吸出细胞悬液，注入离心管并加入10倍以上 培养液，混合后低速离心，弃上清，再重复用培养液洗一次。 3)用培养液适当稀释后，接种培养瓶，放在37°C培养箱静置培养，次日更换培养 液，继续培养。培养至一定浓度时进行传代。PANC-I细胞培养在含10%Gibico胎牛血清的 DMEM高糖培养基中，SW620人结肠癌细胞培养在Leibovitz'sL-15培液，添加10%胎牛血 清；1(562、邪(：、06￥、]\〇7-7、？(：-3等细胞培养在含10%胎牛血清的1640培养基中，51(-11印1、 HeLa、H印G2、等细胞培养在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中，培养基中含lOOU/ml青 霉素和IOOyg/ml链霉素。 2.细胞传代培养 每天观察细胞生长的情况，当细胞在培养瓶中长至约90%汇合时传代，约每隔2-4 天传代一次。一瓶传代成三瓶，或一个25cm2传代于一个75cm2的培养瓶中。方法： 1)用IX磷酸缓冲液洗涤细胞一次。 2)加入2_3ml胰酶消化液消化，置于37°C培养箱中数分钟。用手拍打细胞培养瓶， 使细胞分离。 3)用含10-15%的Gibico胎牛血清的合适培养基终止胰酶消化。将细胞分装于新 的培养瓶中，继续培养。 悬浮细胞传代时，直接收集于离心管中离心，弃旧培养基。一般一瓶传代成三瓶的 比例分装于新的培养瓶中，加入新鲜培养基继续培养。 3?细胞冻存1)取培养至对数生长期的细胞胰蛋白酶消化，收集于离心管中并计数，离心。 2)弃除胰蛋白酶及旧的培养液，加入配置好的冻存培养液（含10%DMS0,40%DMEM 和50%Gibico胎牛血清），冻存液中细胞的最终浓度为0. 5-1X107/ml。用吸管轻轻吹打使 细胞均匀，然后分装入无菌冻存管中，每管加1-1. 5ml。 3)将冻存管放入冻存盒置-80°c速冻，5小时后移入液氮罐中保存。 4?药物准备： 去氢灯心草二酚溶于DMSO(二甲基亚砜），配制成IOOmM或50mM的母液备用。 去氢灯心草二酚可从上海甄准生物科技有限公司（CAS号：137319-34-7)购买。 去氢灯心草二酚的结构如式I所示。 本专利技术提供了一种抗肿瘤药物，所述的抗肿瘤药物的活性成分是去氢灯心草二 酚。所述的肿瘤可以是肝癌细胞、胃癌细胞、当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
式Ⅰ的去氢灯心草二酚在制备抗肿瘤药物中的应用；

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：余龙，解放，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31