用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌及其应用制造技术

用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌及其应用，属于微生物领域。本发明专利技术提供的酿酒酵母菌为酿酒酵母Y19(Saccharomyces cerevisiae Y19)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.8490，保藏日期为2013年11月20日。将酿酒酵母Y19用于制备蓝莓果汁，可改善蓝莓果汁品质，通过该株酵母菌在蓝莓果汁中的48～72小时发酵试验，结果表明酿酒酵母Y19具有良好的降解单宁和果胶质的能力。在48～72小时的发酵果汁中，单宁酶活力可达2.96U/mL，聚半乳糖醛酸酶的酶活力可达325U/mL，果汁中乙醇含量小于0.1％。

【技术实现步骤摘要】
用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌及其应用
本专利技术属于微生物领域，涉及一株酵母菌及其用于改善蓝莓果汁品质的用途。
技术介绍
蓝莓(blueberry)，属牡丹花科越橘属多年生落叶或常绿灌木。蓝莓果实近球形，呈深蓝紫色，含有丰富的花色苷、有机酸、黄酮等活性成分，是近年来备受关注的健康食品之一。尤其是产于我国东北大兴安岭的野生蓝莓，以其高花青素含量而受到广大消费者的青睐。但是蓝莓果汁具有较重的涩味，同时还会在饮用中导致口腔的异常染色，给消费者带来了很大的不便。由于蓝莓果皮和籽具有中较高含量的单宁存在，在榨汁过程中会导致单宁的溶入，使得蓝莓果汁也含有相对大量的单宁(2.2～5.8mg/mL)，从而导致了果汁食用品质的下降。果汁涩味主要是单宁与蛋白质作用引起感官上的收敛性所致，口腔的果汁色素染色程度也与单宁与蛋白质的相互作用有关。酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)，在酿酒、制药、生产单细胞蛋白和遗传工程中有着重要应用。近代研究表明，酵母菌具有单宁酶和果胶酶活性，可通过这些酶的作用降解果汁中的单宁和果胶。另外，酵母发酵过程中还会同化果汁中的糖类和有机酸，产生新的物质。酿酒酵母在利用果汁中的糖类和有机酸的过程中，会产生醇类物质(包括低级醇类和高级醇类)、酯类物质、酸类物质以及羰基化合物(醛类和酮类物质)等。这其中的许多种物质都可视为果汁的风味物质，只是当醇类(主要是乙醇)含量超出一定界限值(0.5％)时，便超出了果汁作为饮品的法定界限。由此可见，如果能获得一株酒精发酵能力弱，而单宁酶和果胶酶活力高的酿酒酵母菌，并将其应用于蓝莓果汁生产中，将可以大大提高蓝莓果汁的食用品质，且能够提高蓝莓果汁的出汁率，这将成为利用微生物发酵法改善蓝莓果汁品质研究领域的一项重大突破。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一株用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌及其应用，该酿酒酵母菌具有高的单宁酶和果胶酶活力，同化蓝莓汁中糖类产乙醇能力弱。一株用于改善蓝莓果汁品质的酿酒酵母菌为酿酒酵母Y19(SaccharomycescerevisiaeY19)，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址在北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物研究所，保藏编号为CGMCCNo.8490，保藏日期为2013年11月20日。本专利技术的用于改善蓝莓果汁品质的酿酒酵母菌属于子囊菌亚门(Ascomycotina)、半子囊菌纲(Hemiascomycetes)、内孢霉目(Endomycetales)、酵母科(Saccharomycetaceae)。其生物学特性如下：1、培养和显微形态特征(图1)：麦芽汁液体培养基中25℃培养三天，细胞球形、卵形，大小为(3.6～9.4)×(3.6～8.4)μm。麦芽汁琼脂斜面25℃培养一个月，菌落奶酪状，乳白色，表面平滑，反光，边缘整齐。玉米粉琼脂Dalmau平板培养，不产生假菌丝。2、理化特征(表1)：表1将本专利技术的酿酒酵母Y19用于制备蓝莓果汁，可改善蓝莓果汁品质，通过该株酵母菌在蓝莓果汁中的48～72小时发酵试验，结果表明酿酒酵母Y19具有良好的降解单宁和果胶质的能力。在48～72小时的发酵果汁中，单宁酶活力可达2.96U/mL，聚半乳糖醛酸酶的酶活力可达325U/mL，果汁中乙醇含量小于0.1％。保藏信息：分类命名：酿酒酵母Saccharomycescerevisiae；保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国微生物研究所；保藏编号：CGMCCNo.8490；保藏日期：2013年11月20日。附图说明图1为本专利技术的酿酒酵母Y19显微形态特征图。具体实施方式下面对本专利技术的技术方案作进一步的说明，但并不局限于此，凡是对本专利技术技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本专利技术技术方案的精神和范围，均应涵盖在本专利技术的保护范围中。实施例1：蓝莓野生酵母的分离：2012年8月在蓝莓成熟季，采集蓝莓浆果手工破碎后，取100mL蓝莓汁(带部分皮渣)置于250mL无菌三角瓶中，在25℃下进行自然发酵。于破碎后及发酵周期的前期(发酵启动，现象：罐底部有少量气泡向顶部上升)、中期(发酵旺盛期，现象：“冒”上升，液面升高至顶部)、后期(发酵消退期，现象：液面又降至初期)取样，稀释至适当梯度(10-5～10-6)后涂布于YEPD平板(加氯霉素100mg/L以抑制细菌生长)，28℃富集培养2～3d，随机挑取30个菌落，以划线方式在YEPD平板上分离纯化。YEPD固体培养基：酵母浸粉10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，琼脂20g/L，蒸馏水(加100mg/L的氯霉素)。YEPD液体培养基：酵母浸粉10g/L，蛋白胨20g/L，葡萄糖20g/L，蒸馏水。实施例2：酵母菌的初筛：从蓝莓中筛选出的30株酵母菌经水浸片镜检后，细胞形态呈球形、卵形等初步判断它们均属于酵母菌。菌落形态较单一，大小基本一致，初步确认为单一纯种，编号为Y1～Y30，将其接种到复筛培养基上进行复筛。实施例3：酵母菌的复筛：将30株酵母菌依次标号用液体YEPD培养基活化，然后把活化好的30株酵母菌接入原蓝莓汁中，20℃恒温培养72小时。然后分别测定30株酵母发酵汁中的单宁酶和聚半乳糖醛酸酶酶活力(表2)。通过比较发现，Y19的单宁酶活力可达2.96U/mL，聚半乳糖醛酸酶的酶活力可达325U/mL，果汁中乙醇含量小于0.1％，所以选定Y19蓝莓酵母菌株。表230株酵母发酵汁中的单宁酶和聚半乳糖醛酸酶酶活力比较序号菌株名称单宁酶(U/mL)聚半乳糖醛酸酶酶活力(U/mL)1Y10.17882Y20.17763Y30.211254Y40.222145Y51.54336Y61.01657Y71.323118Y81.331229Y90.6817810Y100.7114411Y110.175612Y120.446913Y130.438514Y142.0011115Y152.1514516Y162.223217Y170.049918Y181.085619Y182.9632520Y202.2130221Y211.0513122Y221.3318923Y232.066524Y241.028725Y250.8919826Y260.457627Y270.8815528Y281.3316529Y292.0118830Y300.7598实施例4：蓝莓中酵母菌的生理生化鉴定：酵母菌细胞呈球形、卵形，大小为(3.6-9.4)×(3.6-8.4)μm，菌落呈奶酪状，乳白色，表面平滑，反光，边缘整齐，不产生假丝，有1～4个子囊孢子，能利用半乳糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，不能利用麦芽糖、纤维二糖、棉籽糖、乳糖、菊糖、松三糖、蜜二糖。能利用的碳源为葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、甘露糖、蔗糖、不能利用的碳源为阿拉伯糖、纤维二糖、山梨糖、核糖、海藻糖、乳糖、赤藓糖醇、山梨醇、松三糖、蜜二糖、棉子糖、肌醇、可溶性淀粉、鼠李糖。能利用硝酸铵、硝酸钾、亚硝酸钠，不产生类淀粉。根据酵母菌鉴定手册，初步鉴定为酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。实施例5：酵母菌的分子鉴定：rRNA基因D1D2区序列测定结果与GenBank核酸数据库本文档来自技高网...

【技术保护点】
一株用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌，其分类命名为酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.8490。

【技术特征摘要】
1.一株用于改善蓝莓果汁品质的酵母菌，其分类命名为酿酒酵母Saccharomycescerevisiae，保藏于中国微生...

【专利技术属性】
技术研发人员：马永强，孙景波，徐伟，
申请(专利权)人：大兴安岭百盛蓝莓科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23