四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用技术

四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用，涉及曲霉酮类化合物。四环曲霉酮类化合物包括四环曲霉酮A、B、C和D。制备培养基平板，将曲霉转接到平板上培养得平板菌种，再接种于液体培养基中得种子液；转接到发酵培养基中得发酵培养物，浸提后浓缩至干，甲醇溶解后过滤，滤液浓缩至干得浸膏，再萃取至乙酸乙酯相无色，收集乙酸乙酯相浓缩至干得粗提物浸膏，再萃取至石油醚相无色，收集甲醇相浓缩至膏状，用甲醇溶解，过滤后浓缩得浓缩粗提物浸膏，进行反相中压液相柱层析，洗脱得组分1和2，组分1经两次层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮A和B；组分2经一次层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮C和D。

【技术实现步骤摘要】
四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用
本专利技术涉及曲霉酮类化合物，尤其是涉及四环曲霉酮类化合物及其制备方法和应用。
技术介绍
炎症反应是机体免疫反应的一部分，是血管或组织对损伤或病原体等有害刺激的局部反应。炎症反应的主要症状有发热、疼痛、肿胀、泛红以及机体功能的丧失等，对患者的生活质量有不同程度的影响。炎症导致风湿性关节炎、炎症性肠病、神经退化性疾病、脓毒性休克、动脉粥样硬化等疾病相关[1]，局部慢性炎症反应还可诱发机体癌变[2]。目前，抗炎药物的作用机制多种多样，如阻断与炎症有关的前列腺素合成的关键酶环加氧酶-2(COX-2)的作用，或抑制炎症因子如肿瘤坏死因子-α、白细胞介素(IL)、一氧化氮(NO)、自由基等毒性分子的诱导表达[3-5]等。广泛使用的抗炎药主要分为两类：一种是非甾体抗炎药(NSAIDs)，如双氯芬酸、布洛芬、吲哚美辛、萘普生等；另一种是COX-2的选择性抑制剂昔布类，如塞来昔布、依托昔布等[6]。这两类药物在减轻炎症病痛的同时，都存在较强的副作用，如长期服用NSAIDs会导致肠胃糜烂或溃疡以及各种心血管疾病[7]，昔布类药物对凝血功能和肾功能都有影响。天然产物是一类来源于动物、植物、微生物等生物体的次级代谢产物，因其复杂多样的化学结构以及各种各样的生物活性，始终在新药研发中占有举足轻重的地位。海洋微生物特殊的生存环境，为代谢多样性提供了可能，因此是产生结构新颖、活性多样的天然产物的重要来源。海洋微生物代谢的天然产物，为开发新型治疗效果好、毒副作用低的抗炎药物或其他生物活性药物提供了重要资源。参考文献：1.Maranhao,R.C.andA.C.A.Leite,DevelopmentofAnti-AtherosclerosisTherapyBasedontheInflammatoryandProliferativeAspectsoftheDisease[J].Curr.Pharm.Des.,2015.21(9):p.1196-1204.2.Schwartsburd,P.M.,Chronicinflammationasinductorofpro-cancermicroenvironment:Pathogenesisofdysregulatedfeedbackcontrol[J].CancerMetastasisRev.,2003.22(1):p.95-102.3.Warner,T.D.,etal.,Nonsteroiddrugselectivitiesforcyclo-oxygenase-1ratherthancyclo-oxygenase-2areassociatedwithhumangastrointestinaltoxicity:afullinvitroanalysis[J].Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,1999.96(13):p.7563-7568.4.Huang,X.-s.,etal.,Inhibitoryeffectofmomordicinoninflammatoryfactorsgenerationbypreventingnucleartranslocationofnuclearfactor-kappaB[J].ZhongguoDongmaiYinghuaZazhi,2013.21(7):p.583-588.5.Matsui,T.,etal.,Hypothermiaat35℃ReducestheTime-DependentMicroglialProductionofPro-inflammatoryandAnti-inflammatoryFactorsthatMediateNeuronalCellDeath[J].Neurocrit.Care,2014.20(2):p.301-310.6.Shaikh,S.R.andG.M.Nazeruddin,Multicomponentreactionsandnon‐steroidalanti‐inflammatorydrugs[J].J.Chem.Pharm.Res.,2014.6(12):p.505‐534,30pp.7.Al‐Turki,D.A.,etal.,TherapeuticandtoxiceffectsofnewNSAIDsandrelatedcompounds:areviewandprospectivestudy[J].Int.J.Pharmacol.,2010.6(6):p.813‐825.
技术实现思路
本专利技术的第一目的是提供曲霉(Aspergillussp.)ZL01b-14。本专利技术的第二目的是提供四环曲霉酮类化合物及其制备方法。本专利技术的第三目的是提供四环曲霉酮类化合物有制备抗炎症药物中的应用。所述曲霉(Aspergillussp.)ZL01b-14已于2014年12月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，邮编：430072，保藏中心保藏编号为CCTCCNO：M2014668。所述四环曲霉酮类化合物包括四个曲霉酮化合物，即四环曲霉酮A、四环曲霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D；四环曲霉酮A的分子式为C22H26O9，分子量为434.16，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮B的分子式为C22H28O8，分子量为420.18，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮C的分子式为C21H24O9，分子量为420.14，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮D的分子式为C22H28O9，分子量为436.46，手性碳的绝对构型为5aS、6S、6aR、10aR、11R、11aS、12R；四环曲霉酮A、四环曲霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D的化学结构式如下：所述四环曲霉酮类化合物的制备方法，包括以下步骤：1)制备马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板，将曲霉(Aspergillussp.)ZL01b-14转接到马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板上，倒置培养得平板菌种；2)将步骤1)得到的平板菌种接种于马铃薯-葡萄糖半海水液体培养基中摇床培养，得种子液；3)将步骤2)所得种子液转接到发酵培养基中，倒置发酵后得发酵培养物；4)将步骤3)得到的发酵培养物用混合有机溶剂浸提，将提取液减压浓缩至干，甲醇溶解后过滤，滤液再减压浓缩至干得浸膏，浸膏用乙酸乙酯和水萃取至乙酸乙酯相无色，收集乙酸乙酯相减压浓缩至干得粗提物浸膏，再用甲醇和石油醚萃取至石油醚相无色，收集甲醇相减压浓缩至膏状，然后用甲醇溶解，过滤后再次减压浓缩，得浓缩粗提物浸膏；5)将步骤4)得到的浓缩粗提物浸膏进行反相中压液相柱层析，以甲醇/水连续梯度洗脱得组分1和组分2，组分1经两次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮A和四环曲霉酮B；组分2经一次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱得四环曲霉酮C和四环曲霉酮D。在步骤1)中，所述马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基的配制方法可为：将去皮的马铃薯切成小块，加水煮沸20～40min，纱布过滤得马铃薯滤液，加入葡萄糖、琼脂和半海水，加水定容至1000m本文档来自技高网...

【技术保护点】
曲霉(Aspergillus sp.)ZL01b‑14，已于2014年12月26日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏中心保藏编号为CCTCC NO：M 2014668。

【技术特征摘要】
1.四环曲霉酮类化合物，其特征在于包括四个曲霉酮化合物，即四环曲霉酮A、四环曲霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D；四环曲霉酮A的分子式为C22H26O9，分子量为434.16，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮B的分子式为C22H28O8，分子量为420.18，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮C的分子式为C21H24O9，分子量为420.14，手性碳的绝对构型为5aS、6R、6aR、10aR、11R、11aR；四环曲霉酮D的分子式为C22H28O9，分子量为436.46，手性碳的绝对构型为5aS、6S、6aR、10aR、11R、11aS、12R；四环曲霉酮A、四环曲霉酮B、四环曲霉酮C和四环曲霉酮D的化学结构式如下：2.如权利要求1所述四环曲霉酮类化合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)制备马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板，将曲霉(Aspergillussp.)ZL01b-14转接到马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基平板上，倒置培养得平板菌种，所述曲霉(Aspergillussp.)ZL01b-14的保藏编号为CCTCCNO：M2014668；2)将步骤1)得到的平板菌种接种于马铃薯-葡萄糖半海水液体培养基中摇床培养，得种子液；3)将步骤2)所得种子液转接到发酵培养基中，倒置发酵后得发酵培养物；4)将步骤3)得到的发酵培养物用混合有机溶剂浸提，将提取液减压浓缩至干，甲醇溶解后过滤，滤液再减压浓缩至干得浸膏，浸膏用乙酸乙酯和水萃取至乙酸乙酯相无色，收集乙酸乙酯相减压浓缩至干得粗提物浸膏，再用甲醇和石油醚萃取至石油醚相无色，收集甲醇相减压浓缩至膏状，然后用甲醇溶解，过滤后再次减压浓缩，得浓缩粗提物浸膏；5)将步骤4)得到的浓缩粗提物浸膏进行反相中压液相柱层析，以甲醇/水连续梯度洗脱得组分1和组分2，组分1经两次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱，得四环曲霉酮A和四环曲霉酮B；组分2经一次凝胶柱层析和一次半制备型高压液相色谱，得四环曲霉酮C和四环曲霉酮D。3.如权利要求2所述四环曲霉酮类化合物的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述马铃薯-葡萄糖-琼脂半海水培养基的配制方法为：将去皮的马铃薯切成小块，加水煮沸20～40min，纱布过滤得马铃薯滤液，加入葡萄糖、琼脂和半海水，加水定容至1000mL，灭菌条件为121℃下灭菌20min；所述马铃薯滤液...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓贤明，徐庆妍，湛莹，亓双，王跃宙，胡志钰，郑忠辉，宋思扬，
申请(专利权)人：厦门大学，
类型：发明
国别省市：福建;35