异黄酮类化合物在制备治疗多发性硬化疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及天然药物化学及医药技术领域，具体涉及射干中异黄酮类化合物鸢尾黄素和鸢尾苷在治疗多发性硬化疾病中的应用。本发明专利技术采用2％铜腙诱导小鼠脱髓鞘损伤的模型实验，实验结果发现鸢尾黄素、鸢尾苷能显著改善铜腙诱导脱髓鞘模型小鼠胼胝体部位的髓鞘丢失的病理学改变和超微结构改变；鸢尾黄素、鸢尾苷均能显著逆转铜腙诱导脱髓鞘小鼠的髓鞘相关蛋白表达水平降低的表现鸢尾黄素、鸢尾苷均能显著缓解脱髓鞘模型小鼠的抑郁样行为以及空间性学习记忆能力损伤，显示了显著的保护作用。因此，可将鸢尾黄素和鸢尾苷这两个异黄酮化合物用于制备治疗多发性硬化相关疾病药物的用途。

Use of isoflavones in the preparation of drugs for the treatment of multiple sclerosis

The present invention relates to natural medicinal chemistry and pharmaceutical technical field, in particular to Shegan isoflavones in iris Huang Suhe tectoridin in the treatment of multiple sclerosis. The experimental model of the invention adopts 2% copper hydrazone demyelinating injury in mice induced by the experimental results found that the change of ultrastructure and tectorigenin and tectoridin can significantly improve the copper induced demyelination in mice model of corpus callosum hydrazone body of myelin loss; tectorigenin and tectoridin markedly reversed copper hydrazone induced demyelination mice myelin related protein the expression level decreased performance, tectorigenin could significantly alleviate demyelination of tectoridin mouse model of depression like behaviors and spatial learning and memory ability damage, showed a significant protective effect. Therefore, it is possible to apply the two isoflavone compounds, iris and lutein, to the preparation of drugs for the treatment of multiple sclerosis related diseases.

【技术实现步骤摘要】
异黄酮类化合物在制备治疗多发性硬化疾病药物中的应用
本专利技术涉及天然药物化学及医药
，具体涉及异黄酮类化合物在制备治疗多发性硬化疾病药物中的应用。
技术介绍
多发性硬化(MultipleSclerosis,MS)是一种中枢神经系统炎性脱髓鞘性疾病，是细胞免疫与体液免疫共同参与导致的以脑和脊髓白质损伤为主的疾病。病理表现为炎性反应、髓鞘脱失以及胶质瘢痕的形成等。其中髓鞘脱失及其修复的失代偿是CNS功能性损伤的病理基础之一。MS病程反复，目前仍然缺乏对MS完全有效的治疗措施。多发性硬化会引起抑郁、学习记忆能力减弱(参见文献：Franco-PonsN,TorrenteM,ColominaMT,VilellaE，Behavioraldeficitsinthecuprizone-inducedmurinemodelofdemyelination/remyelination，ToxicolLett.2007，169(3):205-213.)。双环己酮草酰二腙(cuprizone，CPZ，简称铜腙)诱导的脱髓鞘模型是目前用于研究MS的经典模型之一。通过在正常鼠粮中添加0.2％CPZ并喂食6-8周来建立模型。CPZ为铜离子螯合剂，可特异性作用于CNS的少突胶质细胞(OL)。该模型的主要病理学变化为胼胝体和小脑白质区域髓鞘的脱失。该模型操作简单，且可重复性高，且不涉及免疫调节情况下引起的髓鞘脱失。野鸢尾苷(1)、鸢尾黄素(2)、鸢尾苷元-4′-O-β-D-葡萄糖苷(3)、野鸢尾苷元(4)、鸢尾苷(5)是从鸢尾科射干属植物射干Belamcandachinensis(L.)DC.中分得的异黄酮化合物(参见文献：JinLi,ChenHai-sheng,JinYong-Sheng,etal.ChemicalconstituentsfromBelamcandachinensisJournalofAsianNaturalProductsResearch2008,10(1):89-91；邱鹰昆等，射干的化学成分研究，中国药学杂志2006；41(15)：1133-1135)。它们的化学结构通式如下：五个化合物的结构搭配如下：1野鸢尾苷R1＝R4＝OH,R2＝R5＝R6＝OCH3,R3＝Oglc2鸢尾黄素R1＝R3＝R5＝OH,R2＝OCH3,R4＝R6＝H3鸢尾苷元-4′-O-β-D-葡萄糖苷R1＝R3＝OH,R2＝OCH3,R5＝Oglc,R4＝R6＝H4野鸢尾苷元R1＝R4＝R3＝OH,R2＝R5＝R6＝OCH35鸢尾苷R1＝R5＝OH,R2＝OCH3,R3＝Oglc,R4＝R6＝H本申请人在前期研究中，已发现鸢尾黄素、鸢尾苷能显著改善紫外照射所致皮肤病理表现，如能显著抑制了紫外照射所致的皮肤角质细胞凋亡，显示了显著的细胞保护作用；能显著抑制紫外照射后受损皮肤组织的炎症反应；和显著减轻紫外照射后受损皮肤组织匀浆的氧化损伤。并已于2012年3月29日申请了中国专利技术专利，并获得授权，专利号为ZL201210087404.X，专利技术名称为“射干异黄酮化合物可用于制备预防和治疗紫外线致皮肤损伤的药物”，公告号为CN102631362B。但至今未见野鸢尾苷(1)、鸢尾黄素(2)、鸢尾苷元-4′-O-β-D-葡萄糖苷(3)、野鸢尾苷元(4)、鸢尾苷(5)等化合物对预防或治疗由多发性硬化疾病所致的抑郁样行为及学习记忆能力损伤方面的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于鸢尾黄素、鸢尾苷的新的医药用途。鸢尾黄素(Tectorigenin)的化学结构式如式Ⅰ所示：鸢尾苷(英文名tectoridin)的化学结构式如式Ⅱ所示：本专利技术提供了鸢尾黄素和/或鸢尾苷在制备预防或治疗多发性硬化疾病药物中的应用。本专利技术所述的应用，具体是指鸢尾黄素和/或鸢尾苷能够降低多发性硬化引起的神经损伤。本专利技术所述的应用，具体是指鸢尾黄素和/或鸢尾苷能够缓解或改善多发性硬化引起的抑郁。本专利技术所述的应用，具体是指鸢尾黄素和/或鸢尾苷能够恢复或改善多发性硬化引起的学习记忆能力减弱。本专利技术所述的应用，所述的药物是以鸢尾黄素或鸢尾苷为唯一活性成份。本专利技术采用研究MS的经典模型—铜腙(2％双环己酮草酰二腙(cuprizone，CPZ)诱导的脱髓鞘模型，选用成年雄性C57小鼠为对象进行了实验，对照组给予正常鼠粮，模型组和药物组喂食0.2％CPZ的鼠粮，6周后药物组给予腹腔注射鸢尾黄素或鸢尾苷(10mg，20mg,50mg)，其余组注射生理盐水，连续2周。之后，进行行为学测试，包括测定动物情绪反应的旷场实验和悬尾实验；以及评价动物学习记忆能力的Morris水迷宫实验和探究实验。最后，收集动物样本进行形态学观察，包括各组动物胼胝体部位的LFB染色(特异性髓鞘蛋白染色)和透射电镜(观察髓鞘超微结构)；并取胼胝体部位的组织进行髓鞘相关蛋白(MBP)的定量分析。行为学结果显示，模型组小鼠表现出明显的抑郁样行为，且空间性学习记忆能力显著弱于对照组以及药物组；形态学结果显示，模型组小鼠胼胝体部位的LFB染色后评分显著低于对照组和药物组，透射电镜结果显示，模型组小鼠胼胝体部位的髓鞘松散、变薄，轴突直径减小，而给予药物干预后，上述病理表现均显著改善；蛋白定量结果显示，模型组小鼠的胼胝体部位的MBP蛋白含量均低于对照组和药物组。综上所述，行为学、形态学以及分子生物学的实验结果显示，CPZ诱导脱髓鞘模型造模成功，给予鸢尾黄素和鸢尾苷干预后，模型动物的情绪反应和学习记忆功能均得到改善，与病理学表现一致，提示鸢尾黄素和鸢尾苷对CPZ诱导的脱髓鞘模型具有保护作用。因此，本专利技术经动物实验证明，鸢尾黄素和鸢尾苷对铜腙诱导脱髓鞘模型小鼠的情绪反应及学习记忆能力均具有保护作用。鸢尾黄素、鸢尾苷可用于制备预防或治疗多发性硬化疾病的药物。本专利技术为临床治疗多发性硬化疾病提供了新的手段。附图说明图1为鸢尾苷(10mg/kg，20mg/kg和50mg/kg)能显著改善CPZ诱导模型鼠的抑郁样行为；其中A为旷场实验-总活动路程，B为旷场实验-中间区域活动路程，C为悬尾实验-不动时间,**,p<0.01vscontrol；#,p<0.05；##,p<0.01vsCPZ。图2为鸢尾黄素(10mg/kg，20mg/kg和50mg/kg)能显著改善CPZ诱导模型鼠的抑郁样行为；其中A为旷场实验-总活动路程，B为旷场实验-中间区域活动路程，C为悬尾实验-不动时间,**,p<0.01vscontrol；#,p<0.05；##,p<0.01vsCPZ。图3为鸢尾苷(10mg/kg和20mg/kg)能显著改善CPZ诱导模型鼠的学习记忆能力损伤；其中A为获得性训练-找到平台的平均时间，B为探究实验-目标象限的停留时间,其中**,p<0.01vscontrol；#,p<0.05；##,p<0.01vsCPZ。图4为鸢尾黄素(10mg/kg和20mg/kg)能显著改善CPZ诱导模型鼠的学习记忆能力损伤；其中A为获得性训练-找到平台的平均时间，B为探究实验-目标象限的停留时间,**,p<0.01vscontrol；##,p<0.01vsCPZ。图5为鸢尾苷(10mg/kg和20mg/k本文档来自技高网...

【技术保护点】
异黄酮类化合物在制备预防或治疗多发性硬化疾病药物中的应用，其特征在于，所述的异黄酮类化合物是鸢尾黄素或鸢尾苷。

【技术特征摘要】
1.异黄酮类化合物在制备预防或治疗多发性硬化疾病药物中的应用，其特征在于，所述的异黄酮类化合物是鸢尾黄素或鸢尾苷。2.根据权利要求1所述的异黄酮类化合物在制备预防或治疗多发性硬化疾病药物中的应用，其特征在于，所述的应用是指鸢尾黄素或鸢尾苷降低多发性硬化引起的神经损伤。3.根据权利要求1所述的异黄酮类化合物在制备预防或治疗多发性硬化疾病药物中的应用，其特征在于，所述的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：倪鑫，陈海生，张琰敏，金丽，郑幽，金永生，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：上海,31