钙羧酸及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用制造技术

本发明专利技术涉及磷酸化蛋白质荧光检测技术，具体地说是钙羧酸及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用。本发明专利技术还提供了应用钙羧酸进行磷酸化蛋白质荧光检测的方法，包括步骤：将蛋白质样品电泳后的染色；经2步脱色；检测。本发明专利技术具有专属性好、检测限低、操作简易、重现性稳定、染色效果好、线性关系好、可逆性好、兼容性好、使用安全环保、成本低等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及磷酸化蛋白质荧光检测技术，具体地说涉及磷酸化蛋白质的一种新的荧光染料。
技术介绍
在生命科学研究领域，离不开对生命的基本物质蛋白质和DNA的研究，也就离不开对蛋白质的检测技术。尤其是最近几年，随着基因组学和蛋白质组学的飞速发展，使我们对蛋白质的分离检测技术有了更高的要求。蛋白质的检测方法有很多，包括浊度法、凯氏定氮法、吸光光度法、荧光光度法，以及新发展起来的共振瑞利散射法、高效液相色谱法、毛细管电泳分析法等。荧光光度法是目前研究最多、应用最广、操作较为简便、灵敏度较高的检测方法。蛋白质磷酸化修饰是最常见也是最重要的蛋白质翻译后修饰方式之一，也是目前蛋白质组学研究的热点之一，对于目前的研究尚且存在专属性检测方法的不足，磷酸化过程基本上发生在酪氨酸、苏氨酸、丝氨酸等氨基酸残基上。蛋白质的这一修饰与细胞的增殖、分化、发育、凋亡等许多生命活动息息相关，据多年的研究证明，蛋白磷酸化与许多的临床疾病有着复杂的关系。因此开发一种专属性强的检测方法成为了研究的突破点。现存的凝胶上磷酸化蛋白质检测方法包括Pro-Q Diamond检测技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
钙羧酸及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用。

【技术特征摘要】
1.钙羧酸及其衍生物在磷酸化蛋白质荧光检测中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的钙羧酸衍生物包括该羧酸的钠盐、钾盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、鞣酸盐、氢碘酸盐等。
3.一种磷酸化蛋白质荧光检测方法，其包括步骤：
1)将经SDS-PAGE电泳后的蛋白质样品凝胶置于荧光染色液染色10～40min，其中所述染色液为含按摩尔浓度比10～50μM的钙羧酸，按溶液体积比10～50％的1，2-丙二醇，以及按溶液体积比0.1～5％乙酸；
2)将染色完毕的凝胶置于脱色液1中脱色10～30min，其中所述脱色液为含按溶液体积比10～30％的甲醇，按摩尔浓度比50～200mM乙酸钠，Al3+的浓度按摩尔浓度比为30～70μM；
3)将脱色完毕的凝胶置于脱色液2中脱色0.5～5min，其中所述脱色液为含按溶液体积比10～50％的乙醇，按溶液体积比5～20％的1，2-...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱忠欣，刘志国，朱鑫良，沈珈谊，周阿益，丛维涛，洪国赢，金利泰，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江;33