本发明专利技术公开了一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，其按照组成包括以下组分：0.002%-0.01%的顺磁性微球、0.4μg/ml-1.0μg/ml吖啶酯标记的睾酮抗体、复合睾酮释放剂、发光液A和发光液B、0ng/dl-1500ng/dl的睾酮校准品与一定浓度的清洗液；所述睾酮释放剂为双氢睾酮、达那唑与肝素钠的混合物。使本发明专利技术具有操作简便、灵敏度高、检测效率快、费用低廉、便于自动化等优点，选用的复合释放剂与不同结合球蛋白结合，可以将血清中结合态的睾酮充分释放出来，使总睾酮的含量测定更为准确。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，其按照组成包括以下组分：0.002%-0.01%的顺磁性微球、0.4μg/ml-1.0μg/ml吖啶酯标记的睾酮抗体、复合睾酮释放剂、发光液A和发光液B、0ng/dl-1500ng/dl的睾酮校准品与一定浓度的清洗液；所述睾酮释放剂为双氢睾酮、达那唑与肝素钠的混合物。使本专利技术具有操作简便、灵敏度高、检测效率快、费用低廉、便于自动化等优点，选用的复合释放剂与不同结合球蛋白结合，可以将血清中结合态的睾酮充分释放出来，使总睾酮的含量测定更为准确。【专利说明】—种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂
本专利技术涉及免疫分析
，尤其涉及一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂。
技术介绍
睾酮是广泛存在于人和动物体内的一种类固醇类激素，准确检测其在生物体内的含量，在判断其生殖性能、正常生理指数及病理浓度而用于疾病的诊治、计划生育、动物的繁殖与育种等方面都有重要的作用。男性体内睾酮由睾丸间质细胞产生，男性血清中睾酮含量是证实可疑睾丸功能紊乱，证明雄性激素缺乏以及检测睾酮代替治疗的最重要的检测参数。女性体内睾酮主要在卵巢中合成，也在肾上腺皮质内合成，女性血清中的睾酮含量用于确定女性雄性激素过多症。目前对睾酮激素检测所采用的方法多是放射免疫分析法和酶免疫分析法。由于放射性元素对环境的污染及其半衰期短等，给操作使用带来不便，限制放射免疫分析的应用；而酶免疫分析法存在灵敏度低、检测范围窄等缺陷无法满足临床要求。因此，现有技术有待于更进一步的改进和发展。【专利技术内容】鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，以提高检测灵敏度与检测效率。为解决上述技术问题，本专利技术技术方案包括:一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，其按照组成包括以下组分:0.002%-0.01%的顺磁性微球、0.4 μ g/ml-1.0 μ g/ml的B丫唳酯标记的睾酮抗体、复合睾酮释放剂、发光液A和发光液B、0ng/dl-1500ng/dl的睾酮校准品与一定浓度的清洗液；所述睾酮释放剂为双氢睾酮、达那唑与肝素钠的混合物。所述的睾酮检测试剂，其中，所述睾酮释放剂按照浓度组成包括以下组分:0.05mg/ml-0.2mg/ml 的双氢睾酮、0.01mg/ml-0.05mg/ml 的达那唑与 5_20mg/ml 的肝素钠，双氢睾酮、达那唑与肝素钠充分混合形成缓冲溶液。所述的睾酮检测试剂，其中，所述顺磁性微球为表面包裹带有羧基或氨基活性基团的四氧化三铁，其粒径大小为0.1 μ m-5 μ m。所述的睾酮检测试剂，其中，所述吖啶酯标记的睾酮抗体为单克隆抗体、多克隆抗体中的一种或其混合物。所述的睾酮检测试剂，其中，所述发光液A为过氧化氢和硝酸水溶液，发光液B为氢氧化钠与聚乙二醇辛基苯基醚水溶液。所述的睾酮检测试剂，其中，所述的睾酮校准品为含睾酮抗原浓度为Ong/dl-1500ng/dl 的溶液。所述的睾酮检测试剂，其中，所述的清洗液包括70g/L的磷酸氢二钠、10g/L的磷酸二氢钠、180g/L的氯化钠、10mL/L的Tween-20和2%的液体生物防腐剂Proclin_300。所述的睾酮检测试剂，其中，所述发光液A中过氧化氢的浓度为0.5%_5%，硝酸的浓度为l_2mol/L，发光液B中氢氧化钠的浓度为0.01-2.5mol/L, TritonX-1OO的浓度为0.1%-5%。本专利技术提供的一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，检测睾酮采用化学发光微粒免疫分析方法，由于激素为小分子，因此选用竞争法进行检测，在血清中，只有2%左右的睾酮处于游离状态，剩下的98%睾酮与性激素结合球蛋白(SHBG)、白蛋白、皮质醇结合球蛋白(CBG)、α I酸性糖蛋白和某些脂蛋白等结合，在体内与游离睾酮保持一定的动态平衡，其中睾酮与性激素结合球蛋白结合力最强，是特异性结合，不易解离；睾酮与白蛋白亲和力较小，但结合的睾酮量极多，属非特异性结合，比较疏松，睾酮易于解离而进入靶组织；睾酮与皮质醇结合球蛋白亲和力小，所占比例较小，睾酮与血液中其他蛋白亲和力很弱，结合的睾酮数量极少，起的作用不大，因此，要将结合态睾酮释放出来需要复合释放剂。其中，双氢睾酮与性激素结合球蛋白的结合力远大于睾酮，能将睾酮从性激素球蛋白上置换出来；肝素钠可以使睾酮与白蛋白的结合力减弱，从而使睾酮释放出来；达那唑等皮质醇类激素与皮质醇结合球蛋白的结合力大于睾酮，从而使睾酮释放出来，使本专利技术具有操作简便、灵敏度高、检测效率快、费用低廉、便于自动化等优点，选用的复合释放剂与不同结合球蛋白结合，可以将血清中结合态的睾酮充分释放出来，使总睾酮的含量测定更为准确。【具体实施方式】本专利技术提供了一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，为使本专利技术的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术提供了一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，其按照组成包括以下组分:0.002%-0.01%的顺磁性微球、0.4μ g/ml-1.0y g/ml的吖啶酯标记的睾酮抗体、复合睾酮释放剂、发光液A和发光液B、0ng/dl-1500ng/dl的睾酮校准品与一定浓度的清洗液。更具体的,所述睾酮释放剂按照浓度组成包括以下组分:0.05mg/ml-0.2mg/ml的的双氢睾酮、0.01mg/ml-0.05mg/ml的达那唑与5-20mg/ml的肝素钠，双氢睾酮、达那唑与肝素钠充分混合形成缓冲溶液。在本专利技术的另一较佳实施例中，所述顺磁性微球为表面包裹带有羧基或氨基活性基团的四氧化三铁，其粒径大小为0.1 μ m-5 μ m。并且所述吖啶酯标记的睾酮抗体为单克隆抗体、多克隆抗体中的一种或其混合物。所述发光液为过氧化氢和硝酸水溶液以及氢氧化钠与聚乙二醇辛基苯基醚水溶液。更进一步的，所述的睾酮校准品为含一定量睾酮抗原的溶液。所述的清洗液包括70g/L的磷酸氢二钠、10g/L的磷酸二氢钠、180g/L的氯化钠、10mL/L的Tween-20和2%的液体生物防腐剂Proclin-300。而且所述发光液中过氧化氢的浓度为0.5%_5%，硝酸的浓度为l_2mol/L，氢氧化钠的浓度为0.01-2.5mol/L, TritonX-1OO的浓度为0.1%_5%之间。顺磁性微球-睾酮类似物悬液的制备:顺磁性微球活化:取适量顺磁性微球用磷酸缓冲液清洗，重悬于上述缓冲液中；采用EDC活化，在30-40°C条件下，震荡混匀；包被抗原:将适量的睾酮抗原类似物加入至顺磁性微球重悬液中，25°C -37°C条件下反应2-3小时；25°C -37°C条件下封闭20分钟-40分钟；将包被好的顺磁性微球用磷酸缓冲液清洗，得到免疫顺磁性微球，即免疫磁珠。吖啶酯标记的睾酮抗体的制备:取适量睾酮抗体，用pH9.5，0.5mol/L的磷酸缓冲液稀释至终浓度为20mg/ml，加入适量吖啶酯，缓慢震荡，避光反应二十四小时；混合液经过葡聚糖凝胶G-25柱纯化后得到吖啶酯标记的睾酮抗体。释放剂的制备:取适量双氢睾本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种基于微粒子化学发光免疫分析技术的睾酮检测试剂，其按照组成包括以下组分：0.002%‑0.01%的顺磁性微球、0.4μg/ml ‑1.0μg/ml吖啶酯标记的睾酮抗体、复合睾酮释放剂、发光液A和发光液B、0ng/dl‑1500ng/dl的睾酮校准品与一定浓度的清洗液；所述睾酮释放剂为双氢睾酮、达那唑与肝素钠的混合物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孙成艳，顾小丰，阚洪晶，高威，王香琪，王皓，
申请(专利权)人：长春迪瑞医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22
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