本发明专利技术属于化工领域，提供了一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源的检测，包括：1)加十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)于烧杯，加HAuCl4及NaBH4，搅拌，2)往烧瓶中加生长液和阴离子表面活性剂，搅拌加HAuCl4和抗坏血酸，加1)制备的金种，水浴加热，冷却过滤析出的CTMAB，3)取2)制备的金纳米棒，加PBS溶液和探针DNA，放置冰箱中，4)取一定量3)制备的修饰后金纳米棒加靶标DNA，测定同步荧光，根据回归曲线计算过敏源含量。以阴离子表面活性剂为添加剂，减少CTMAB用量，制备的金纳米棒单分散好、生物毒性低。将金纳米棒用于过敏源的检测，方法检测限、灵敏度明显高于现有技术。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术属于化工领域，提供了一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源的检测，包括：1)加十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)于烧杯，加HAuCl4及NaBH4，搅拌，2)往烧瓶中加生长液和阴离子表面活性剂，搅拌加HAuCl4和抗坏血酸，加1)制备的金种，水浴加热，冷却过滤析出的CTMAB，3)取2)制备的金纳米棒，加PBS溶液和探针DNA，放置冰箱中，4)取一定量3)制备的修饰后金纳米棒加靶标DNA，测定同步荧光，根据回归曲线计算过敏源含量。以阴离子表面活性剂为添加剂，减少CTMAB用量，制备的金纳米棒单分散好、生物毒性低。将金纳米棒用于过敏源的检测，方法检测限、灵敏度明显高于现有技术。【专利说明】一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源检测
本专利技术属于化工领域，特别涉及一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源的检测。
技术介绍
金纳米棒具有各向异性、可调的表面的离子体共振波长和极高的表面电场强度增强效应等具有不同于其他材料的优良性质(Jie Cao ；EwanK.Galbrainth ；Tong Sun,Sensors and Actuators B:Chemical, 2012,169:360-367),使其在生物医学及分析科学领域备受关注，并广泛用于纳米器件、生物标记、医学检测和表面增强拉曼等领域(SeunghyunLee ；Lindsey J.E.Anderson ；Courtney M.Payne ； Jason H.Hafner, Langmuir，2011，27，14748-14756)。最近，研究人员发现金纳米棒具有特殊的共振光散射(Ning Bi ；Ying Sun ；Hanqi Zhang, Colloids andSurfaces B:Biointerfaces, 2010,81:249-254.),基于金纳米棒的等离子共振光散射(PRLS)可以测定食品中过敏源含量。目前，制备金纳米棒的方法有电化学方法、模板法以及金种介导生长法(BabakNikoobakht ；Mostafa A.El-Sayed, Chem.Mater, 2003,15,1957-1962)等。电化学法是在含有丙酮、环己烷、银离子及十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)溶液中以金为阳极，钼为阴极使用电化学法制备金纳米棒 。但该法在合成过程中使用了有机溶剂，限制了其应用。模板法是利用多孔Al2O3膜或聚碳酸脂有机介孔膜为模板，通过控制电化学沉积时间制备金纳米棒。但该法操作过程比较复杂，并且只有单层的金纳米棒生成，产量低。最近，研究人员提出一种新的金种介导生长法制备金纳米棒。该方法需先用强还原剂(NaBH4)还原Au3+为Au°，合成2-3nm金纳米球种子液，然后用弱还原剂(抗坏血酸)将其他的Au3+还原到金纳米球种子上，阳离子表面活性剂(CTMAB)作为引导金种生长的“软模板”，使其定向生长为各向异性的金纳米棒。该方法具有操作简单、绿色等特点，但用该法制备的金纳米棒仍有很多其他针状、片状及颗粒状金纳米颗粒，无法得到单分散的金纳米棒，然而金纳米棒的等离子共振光散射特性与其形貌特征密切相关。因此制备单分散、低生物毒性的金纳米棒对于食品过敏源的检测势在必行。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题就是针对现有的食品过敏原检测的方法测试测试方法复杂，费用昂贵，不利于普及推广，提供一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源的检测。方法显著地改善了过敏源检测的稳定性、灵敏度和精密度，操作方便、快速。本专利技术人经过广泛的研究和反复的试验发现，以含苯环阴离子表面活性剂为添加剂，减少CTMAB用量，制备的金纳米棒具有良好的等离子共振光散射特性，且单分散好、生物毒性低。然后利用所制备的金纳米棒修饰探针DNA检测实现了食品过敏源的快速检测。本专利技术人进一步对金纳米棒的制备条件以及过敏源检测进行优化选择，终于实现了提高金纳米棒应用于食品过敏源检测的灵敏度和重现性的目的。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案是:一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源检测，包括I)金种的制备:加十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)溶液于烧瓶中，搅拌，滴加HAuCl4溶液，注入NaBH4溶液，反应一段时间，2)金纳米棒的制备:将新配制的生长液加入到三角烧瓶中，加阴离子表面活性剂，搅拌，加入HAuCl4和抗坏血酸溶液，然后加入I)所制备的金种溶液，混合，水浴加热反应一段时间，冷却，过滤除去析出的CTMAB沉淀，3)金纳米棒的修饰:移取一定量的2)所制备的金纳米棒于离心管中，加入PBS缓冲溶液和探针DNA溶液，混合，在冰箱中放置一段时间，4)过敏源的测定:在3)所制备的修饰探针DNA的金纳米棒溶液中，加入靶标DNA，混合，室温下反应一段时间，然后在荧光光度计上测定同步荧光，根据同步荧光光谱峰强度代于线性回归方程计算过敏源含量。步骤I)所述的较佳反应时间为2~lOmin。步骤2)所述的生长液含0.013~0.14M CTMAB及0.04~0.1mM硝酸银。步骤2)所述的阴离子表面活性剂为具有R3-R2-R1结构的一类化合物的钠或钾盐。其中，R1为磺酸基或羧基，R2为苯环，R3为碳原子数在4~20之间的直链烷烃。步骤2)所述的阴离子表面活性剂较佳浓度为0.3~3mM。 步骤2)所述的水浴加热反应温度为25~30°C，反应时间为5~10h。步骤3)所述的PBS缓冲溶液pH为7.0~7.5，浓度为10~20mM。步骤3)所述的探针DNA为端位修饰巯基的过敏源DNA探针.步骤3)所述的冰箱中放置时间为12~24h。步骤4)所述的反应时间为5~20min。步骤4)所述的同步荧光测定使用的激发波长和发射波长的波长在200~lOOOnm。本专利技术的一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源检测较佳实施例包括以下步骤:I)金种的制备:加十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)溶液于烧瓶中，搅拌，滴加HAuCl4溶液，注入(TC新配制NaBH4溶液，搅拌2~lOmin，2)金纳米棒的制备:将新配制的含0.013~0.14M CTMAB及0.04~0.1mM硝酸银的生长液加入到三角烧瓶中，加0.3~3mM十二烷基苯磺酸钠，搅拌，加入HAuCl4和抗坏血酸溶液，然后加入I)所制备的金种溶液，混合，在25~30°C水浴加热反应5~10h，冷却，过滤除去析出的CTMAB沉淀，3)金纳米棒的修饰:移取一定量的2)所制备的金纳米棒于离心管中，加入pH为7.0~7.5的PBS缓冲溶液(10~20mM)和端位修饰巯基的过敏源DNA探针溶液，混合，在冰箱中放置12~24h，4)过敏源的测定:在3)所制备的修饰探针DNA的金纳米棒溶液中，加入靶标DNA，混合，室温下反应5~20min，然后在荧光光度计上使用激发波长和发射波长的波长在200~1000nm范围内，测定同步荧光，根据同步荧光光谱峰强度代于线性回归方程计算过敏源含量。该较佳实施例的工艺流程图见图1。在该较佳实施例中，以CTMAB为稳定剂，以十二烷基苯磺酸钠为添加剂，硝酸银为催化剂，抗坏血酸为还原剂，制备单分散、低生物毒性金纳米棒。将所得到的金纳米棒修饰探针DNA本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种单分散、低生物毒性金纳米棒的制备方法及用于过敏源检测，包括1)金种的制备：加十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)溶液于烧瓶中，搅拌，滴加HAuCl4溶液，注入NaBH4溶液，反应一段时间，2)金纳米棒的制备：将新配制的生长液加入到三角烧瓶中，加阴离子表面活性剂，搅拌，加入HAuCl4和抗坏血酸溶液，然后加入1)所制备的金种溶液，混合，水浴加热反应一段时间，冷却，过滤除去析出的CTMAB沉淀，3)金纳米棒的修饰：移取一定量的2)所制备的金纳米棒于离心管中，加入PBS缓冲溶液和探针DNA溶液，混合，在冰箱中放置一段时间，4)过敏源的测定：在3)所制备的修饰探针DNA的金纳米棒溶液中，加入靶标DNA，混合，室温下反应一段时间，然后在荧光光度计上测定同步荧光，根据同步荧光光谱峰强度代于线性回归方程计算过敏源含量。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李在均，黄颖娟，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。