一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，该方法包括以下步骤：在酒醅中加入香茅醇和超纯水浸泡60-150min后，超声20-40min，离心得上清液，取上清液于试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入有机溶剂，振荡3-5min，静置5-10min后离心，有机相与水相分层，留取有机相即得。本发明专利技术具有操作简便快速、有机溶剂用量少、劳动强度小、定量准确等特点，适用于酒醅中挥发性风味物质的定性及定量分析。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，该方法包括以下步骤：在酒醅中加入香茅醇和超纯水浸泡60-150min后，超声20-40min，离心得上清液，取上清液于试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入有机溶剂，振荡3-5min，静置5-10min后离心，有机相与水相分层，留取有机相即得。本专利技术具有操作简便快速、有机溶剂用量少、劳动强度小、定量准确等特点，适用于酒醅中挥发性风味物质的定性及定量分析。【专利说明】
本专利技术属于分析检测
，具体涉及一种针对固态发酵酒醅挥发性风味物质快速简便提取方法。
技术介绍
中国白酒是世界上六大蒸馏酒之一，其采用的固态酒醅发酵和固态蒸馏操作方法。酒醅发酵过程中，各种物质不断地产生与消失，逐渐生成了醇、酸、酯、醛、酮等多种物质成分。酒醅中的挥发性成分直接地构成了白酒的风味物质，从而决定白酒的独特风味和品质。目前，对白酒酒醅的微量挥发性成分的研究主要有以下三种方法:a)利用顶空固相微萃取方法分析酒醅中的挥发性化合物的组成和含量，如专利号为201110427384.1、为“一种快速测定曲或酒醅或发酵醪中氨基甲酸乙酯的方法”所用方法，该技术存在所需设备价格昂贵、操作程序复杂、萃取头等耗材用量大、检测样品成本高等缺点山)采用大量有机溶剂的多次反复萃取、再将有机相收集起来除水、浓缩，然后进样分析，该方法操作复杂、萃取时间长，劳动强度大，所需有机溶剂量大，对实验人员伤害大，因此不适合对大量样品的萃取分析。同时由于步骤繁多，每步操作都会造成挥发性风味物质的损失，进而不能对样品微量物质含量进行定量等后续分析；c)直接利用水或乙醇水浸提后直接进样，如专利申请号为201110147621.9、为“快速检测糟醅香味成分的方法”所述，虽然该方法简便快速，但是直接用乙醇溶液浸泡后进样对色谱柱损伤大，且提取风味物质成分少(仅分析出16种物质)，再由于没有加入内标，定量效果差。因此本领域需要一种新的快速简便的方法来提取、定量及分析酒醅中的微量挥发性物质成分。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种快速简便提取酒醅挥发性风味物质的方法，解决现有技术操作复杂、设备要求高、成本昂贵、检测不稳定或有机溶剂使用量大、劳动强度大、定量不准确等问题。本专利技术是通过以下技术方案实现的:—种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，包括以下步骤:a)浸泡与超声提取:取5_15g酒醅，加入5-10 μ I香茅醇内标和35_45ml的超纯水，浸泡60-150min后，超声提取20_40min，离心得上清液；b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液15_25ml置于50ml带塞磨口试管中，力口入氯化钠直至溶液饱和；再加入2-6ml有机溶剂，盖上瓶塞，振荡3-5min，静置5_10min后离心，有机相与水相分层，取l_3ml有机相检测备用；c)挥发性风味物质测定:物质定性采用NIST08Databas、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱进行比对，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量。上述步骤a)中，超纯水需煮沸10_20min后冷却使用。上述步骤a)、b)中，离心条件为 5000-18000r/min，5-15min。优选地，上述离心条件为8000-10000r/min，8-12min。上述步骤b)中，有机溶剂为乙醚、戊烷或两者的混合液。本专利技术有益效果如下:1、操作快速简便、劳动强度小、溶剂用量少、设备要求低，达到快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的要求，与采用有机溶剂反复萃取的方法相比，简单有效。2、本专利技术操作过程简便，在超纯水超声提取的同时加入香茅醇，与样品一同提取，可以较为准确定量样品中各物质浓度，从而可以真实的反应样品中各挥发性风味物质的含量，同步操作即减少了程序步骤，更使挥发性风味物质成分的损失大大减少。若萃取后加入，则定量的是提取得到溶液中各物质浓度，从而要考察提取率，才能定量样品中各物质浓度。3、采用本专利技术的提取方法，有利于对后续酒醅挥发性风味物质成分的检测，尤其适用于固态酿造酒醅挥发性风味物质成分的定性与定量分析。从检测结果来看，能有效分析出30种物质，大大高于仅采用水或有机溶剂提取的方法，且标准偏差低于12%，说明本方法有效、可行。【专利附图】【附图说明】图1是运用本专利技术提取的酒醅挥发性风味物质总离子色谱图。【具体实施方式】下述实例将有助于理解本专利技术，但不限制本专利技术的内容。本专利技术实施例中材料和设备的选用说明:香茅醇购于美国Sigma公司；NaCl (分析纯)、乙醚(色谱纯)、戊烷(色谱纯)购于上海国药集团。气相色谱-质谱联用仪使用美国安捷伦科技有限公司的7890A-5975CGC-MS。实施例1a)浸泡与超声提取:取IOg酒醅，加入8 μ I香茅醇内标和煮沸15min后冷却的超纯水40ml，浸泡120min后，超声提取30min，然后在10000r/min条件下离心12min，得上清液；b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液20ml，置于50ml带塞磨口试管中，加入氯化钠使溶液达到饱和；再加入5ml乙醚，盖上瓶塞，振荡4min，静置5min后离心，有机相与水相分层，取2ml有机相检测备用；c)挥发性风味物质定性与定量:物质定性米用NIST 08Databas (AgilentTechnologieslnc.)、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱比对，要求匹配度大于85% ;出窖酒醅挥发性风味物质总离子色谱图见图1 ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量，见表I。为了验证该方法的稳定性，对出窖酒醅进行重复提取(n=5)，结果见表I。从表中可以看出，各物质的相对标准偏差(RSD)均小于8%。表1出窖酒醅风味物质的相对含量【权利要求】1.，其特征在于:包括以下步骤: a)浸泡与超声提取:取5-15g酒醅，加入5-10μ I香茅醇内标和35_45ml的超纯水，浸泡60-150min后，超声提取20_40min，离心得上清液； b)有机溶剂萃取:取上述离心所得上清液15-25ml置于50ml带塞磨口试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入2-6ml有机溶剂，盖上瓶塞，振荡3-5min，静置5_10min后离心，有机相与水相分层，取l_3ml有机相检测备用； c)挥发性风味物质测定:物质定性采用NIST08Databas、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱进行比对，要求匹配度大于85% ;定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量。2.根据权利要求1所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)中，超纯水需煮沸10-20min后冷却使用。3.根据权利要求1所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)、b)中，离心条件为5000-18000r/min, 5_15min。4.根据权利要求3所述的快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于:所述步骤a)、b)中，离心条件为8000-10000r/min, 8_12min。5.根据权利要求1所述的快速简便提本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速简便提取酒醅中挥发性风味物质的方法，其特征在于：包括以下步骤：a)浸泡与超声提取：取5‑15g酒醅，加入5‑10μl香茅醇内标和35‑45ml的超纯水，浸泡60‑150min后，超声提取20‑40min，离心得上清液；b)有机溶剂萃取：取上述离心所得上清液15‑25ml置于50ml带塞磨口试管中，加入氯化钠直至溶液饱和；再加入2‑6ml有机溶剂，盖上瓶塞，振荡3‑5min，静置5‑10min后离心，有机相与水相分层，取1‑3ml有机相检测备用；c)挥发性风味物质测定：物质定性采用NIST08Databas、AMDIS图谱库中标准离子碎片图谱进行比对，要求匹配度大于85%；定量方法采用半定量方法，将待测物质丰度与内标物质丰度相比，根据内标物质浓度计算各挥发性风味物质成分含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈良强，林琳，杨帆，王和玉，汪地强，王莉，
申请(专利权)人：贵州茅台酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：贵州;52