【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及ー种具有生物活性和代谢稳定性的含有血管内皮抑制素的复合物和缓释制剂以及它的制备方法。本专利技术还提供含有这种血管内皮抑制素复合物和缓释制剂的药物组合物以及含有这种血管内皮抑制素复合物的试剂盒。本专利技术还提供使用本专利技术中的血管内皮抑制素复合物、缓释制剂、药物组合和试剂盒来预防、诊断、治疗肿瘤,及制备抗肿瘤药物的方法。
技术介绍
新生血管形成是指新的毛细血管在原有的血管上的生成。肿瘤的生长和迁移依赖于新生血管的生成,将肿瘤中的微血管内皮细胞作为癌症治疗的靶点为治疗肿瘤提供了一种治疗方式(Folkman J.N Engl J Med 1971 ;285:1182-1186)。血管内皮抑制素(Endostatin)是胶原XVIII羧基端的一段分子量大小为20kDa的酶切产物。1997年美国哈佛大学Judah Folkman教授等人在血管内皮瘤细胞的培养基中发现此蛋白,它具有抑制血管内皮细胞増殖、迁移,和体内血管生成的活性。进ー步实验发现重组血管内皮抑制素可以抑制老鼠体内多种肿瘤的生长、转移,甚至能完全治愈肿瘤,而且不产生耐药性。其发挥活性的机理在于它通过抑制血管内皮细胞的生长,抑制了肿瘤组织附近的新生血管的生成,使得肿瘤组织得不到生长所必需的大量营养和氧气,最后停止生长或坏死(Folkman J.et al.Cell 1997 ;88:277-285 ;Folkman J.et al.Nature 1997 ;390:404-407)。通过基因工程制备的`重组人血管内皮抑制素可以作为肿瘤治疗药物,其临床试验表明它可以有效的抑制肿瘤生长。在中国 ...
【技术保护点】
一种修饰物与血管内皮抑制素形成的复合物,所述复合物具有比血管内皮抑制素更长的体内半衰期。
【技术特征摘要】
1.一种修饰物与血管内皮抑制素形成的复合物,所述复合物具有比血管内皮抑制素更长的体内半衰期。2.权利要求1的复合物,所述修饰物与血管内皮抑制素通过共价键连接。3.权利要求2的复合物,所述修饰物选自高分子聚合物、蛋白质分子或其片段、肽链、小分子或其他任何形式的化学物质。4.权利要求3的复合物,所述高分子聚合物选自聚烯醇类化合物、聚醚类化合物、聚こ烯吡咯烷酮、聚氨基酸(包括聚丙氨酸)、ニこ烯基醚与马来酸酐的共聚物、N-(2-羟丙基)-甲基丙烯酰胺(N-(2_Hydroxypropyl)-methacrylamide)、葡聚糖及葡聚糖衍生物如硫酸葡聚糖、纤维素及纤维素的衍生物(包括甲基纤维素和羧甲基纤维素)、淀粉及淀粉衍生物、聚鹿糖、聚氧こ基多醇(polyoxyethylated polyol)、肝素或肝素片段、聚烃基こニ醇及其衍生物、聚烃基こニ醇和其衍生物的共聚物、聚こ烯基こ醚、聚羟こ基天冬酰月安(a, P-Poly((2-hydroxyethyl)-DL-aspartamide))> 聚羧酸脂(polycarboxylates)>氧化こ烯和甲醒的共聚物(poly oxyethylene-oxymethylenes)、聚丙烯酰吗啉(polyacryloyl morpholines)、氨基化合物与氧化烯烃的共聚物、聚透明质酸,聚环氧化物(polyoxiranes)、こニ酸与丙ニ酸的共聚物、聚1,3_こニ醇次甲基醚、こ烯和顺丁烯ニ酰肼的共聚物、多聚唾液酸、环糊精或其他药学上可接受的高分子聚合物。5.权利要求4的复合物,所述聚醚类化合物选自聚烷撑ニ醇(HO((CH2)xO)nH).聚丙ニ醇、聚氧化こ烯(HO((CH2)2O)nH),聚こ烯醇((CH2CHOH)n)或它们的衍生物。6.权利要求4的复合物,所述聚烯醇类化合物选自聚こニ醇(包括单甲基聚こニ醇、单羟基聚こニ醇)、聚こ烯醇、聚丙烯醇、聚丁烯醇或它们的衍生物。7.权利要求6的复合物,所述聚烯醇类化合物为聚こニ醇。8.权利要求7的 复合物,所述聚こニ醇优选单甲基聚こニ醇。9.权利要求7或8的复合物,其特征为ー个血管内皮抑制素分子和一个或多个聚こニ醇分子偶联。10.权利要求7-9任一项的复合物,血管内皮抑制素与聚こニ醇偶联的位点是血管内皮抑制素的N-末端a -氨基、半胱氨酸残基侧链的巯基、天冬氨酸残基侧链的羧基、谷氨酸残基侧链的羧基、C-末端羧基中的ー种或是它们的组合。11.权利要求7-10任一项的复合物,其特征为ー个血管内皮抑制素分子与一个聚こニ醇分子偶联,偶联位点为血管内皮抑制素N-末端的a-氨基。12.权利要求7-10任一项的复合物,其特征为血管内皮抑制素分子与一个或多个聚こニ醇分子偶联,偶联的位点是血管内皮抑制素分子N-末端的a -氨基。13.权利要求7-10任一项的复合物,其特征为血管内皮抑制素分子与一个或多个聚こニ醇分子偶联,偶联方法为在血管内皮抑制素分子内部或其N-末端或C-末端附加半胱氨酸或是含有半胱氨酸的肽链,使得偶联位点为附加的半胱氨酸残基侧链上的巯基。14.权利要求7-10任一项的复合物,其特征为血管内皮抑制素分子与ー个或多个聚こニ醇分子偶联,偶联的位点是血管内皮抑制素天冬氨酸或谷氨酸残基侧链上的羧基或C-末端的羧基。15.权利要求7-14任一项的复合物,所述聚こニ醇分子是线性的或是分叉的。16.权利要求7-14任一项的复合物,所述聚こニ醇分子的平均分子量位于1,000到.100,000道尔顿之间,优选5,000到40,000道尔顿之间。17.权利要求3的复合物,所述蛋白选自血管内皮抑制素、白蛋白、免疫球蛋白、甲状腺结合蛋白、转甲状腺蛋白、转铁蛋白、纤维蛋白原或它们的片段及其组合。18.权利要求17的复合物,所述复合物是血管内皮抑制素和ー个或多个血管内皮抑制素偶联形成ニ聚体或多聚体,该偶联物可以是通过化学修饰得到的,或是通过融合表达得到的,或是通过其他方法得到的,其中的血管内皮抑制素优选人血管内皮抑制素或其片段。19.权利要求17的复合物,所述复合物是白蛋白偶联的血管内皮抑制素,其特征为一个血管内皮抑制素分子和ー个或多个白蛋白偶联,该偶联物可以是通过化学修饰得到的,或是通过融合表达得到的,或是通过其他方法得到的,其中的白蛋白优选人血清白蛋白或其片段。20.权利要求17的复合物,所述复合物是免疫球蛋白Fe片段偶联的血管内皮抑制素,其特征为ー个血管内皮抑制素分子和ー个或多个免疫球蛋白Fe片段偶联,该偶联物可以是通过化学修饰得到的,或是通过融合表达得到的,或是通过其他方法得到的,其中的Fe片段优选人免疫球蛋白IgG中的Fe区域的片段。21.权利要求3中的复合物,所述复合物是小分子或是小肽或是其他化合物修饰的血管内皮抑制素,其特征是该复合物具有同体内其他分子或成分反应或结合的活性,使得该聚合物可以在体内和其他成分形成更大的复合物。22.权利要求20中的复合物,所 述复合物带有具有反应活性的基团,可以和血液成分的氣基、轻基、疏基反应形成共价键。23.权利要求21中的复合物,所述具有反应活性的基团是马来酰亚胺,它可以和血液成分,例如白蛋白中的巯基反应。24.权利要求20中的复合物,和血液某些成分,例如白蛋白、免疫球蛋白有较强的亲和力,能相互形成更大的复合物。25.权利要求3中的复合物,所述复合物是其他分子或是小肽修饰的血管内皮抑制素,例如血管内皮抑制素被糖基化、磷酸化或酰基化的产物,其中修饰的位点是原来蛋白序列中存在的氧基酸残基,或是通过突变产生的氨基酸残基。26.权利要求1的复合物,所述修饰物与血管内皮抑制素通过非共价键相互作用,该复合物具有特定的组成式,其中的修饰物可以是蛋白、小分子或其他化学物质。27.管内皮抑制素或权利要求1-26任...
【专利技术属性】
技术研发人员:罗永章,韩庆,雷清新,常国栋,付彦,
申请(专利权)人:清华大学,北京普罗吉生物科技发展有限公司,
类型:发明
国别省市:
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