The invention discloses a loop mediated isothermal amplification combined with a lateral flow test strip method for detecting the spring viremia virus of the carp. The invention provides a loop mediated isothermal amplification primer set, from the upstream and downstream primers outside the outer primers and inner primers upstream and downstream primers in composition; nucleotide sequence of the upstream sequence of 1 outer primers for nucleotide sequence; the outer primers for the downstream sequence of 2 nucleotide sequence; the upstream primer sequence in 3; nucleotide sequence of the downstream primer sequence in 4. The present invention is detection of spring viremia of carp virus existing in the traditional technology of PCR (SVCV) method has higher practicability and convenience, can be detected in the practical field, is conducive to the prevention and control of spring viremia virus outbreak, has important significance for protecting aquaculture economic development in china.
【技术实现步骤摘要】
环介导等温扩增结合侧向流动试纸条法检测鲤春病毒血症病毒
本专利技术涉及病毒检测
,具体涉及一种环介导等温扩增结合侧向流动试纸条法检测鲤春病毒血症病毒。
技术介绍
鲤春病毒血症(Springviraemiaofcarp,SVC)是一种以出血为主要临床症状并伴有高度传染性的急性流行病,其病原为鲤春病毒血症病毒(Springviraemiaofcarpvirus,SVCV)。该病发病急、死亡率高,死亡率可高达90%,严重危害渔业生产,世界动物卫生组织OIE将其列为必须申报的重要疫病。2008年,农业部第1125号公告更是将该病列为“中华人民共和国进境动物一类传染病”,也是唯一一个被列为一类传染病的鱼类疫病,因此成为鱼类口岸检疫的第一类检疫对象。SVCV病毒粒子长90nm~180nm,宽60nm~90nm,有类脂囊膜,核衣壳中空,螺旋状对称,直径50nm。病毒基因组为单股、负链、不分节段的RNA,长约11019个核苷酸,主要包含5个基因:RNA聚合酶蛋白(RNApolymerase,L)、糖蛋白(Glycoprotein,G)、基质蛋白(Matrixprotein,M)、磷蛋白(Phosphoprotein,P)和核蛋白(Nucleoprotein,N)。该病毒对酸、热及脂溶剂敏感,pH值7~10时稳定,在13℃~22℃均可生长,最适生长温度为17℃。SVCV主要危害越冬以后的幼鲤和一龄以上的鲤鱼,死亡率较高。感染途径是以水体为媒介,通过鳃进入鱼体,再通过粪、尿排出体外。外伤也是一个重要的传播途径。无症状的带毒鱼体能持续数周不断地排出病毒,在低水温时病毒能在 ...
【技术保护点】
一种检测鲤春病毒血症病毒的环介导等温扩增成套引物,由上游外引物、下游外引物、上游内引物和下游内引物组成;所述上游外引物为如下(a1)或(a2):(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;所述下游外引物为如下(b1)或(b2);(b1)序列表的序列2所示的单链DNA分子;(b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;所述上游内引物为如下(c1)或(c2);(c1)序列表的序列3所示的单链DNA分子;(c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子;所述下游内引物为如下(d1)或(d2);(d1)序列表的序列4所示的单链DNA分子;(d2)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子。
【技术特征摘要】
1.一种检测鲤春病毒血症病毒的环介导等温扩增成套引物,由上游外引物、下游外引物、上游内引物和下游内引物组成;所述上游外引物为如下(a1)或(a2):(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;所述下游外引物为如下(b1)或(b2);(b1)序列表的序列2所示的单链DNA分子;(b2)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;所述上游内引物为如下(c1)或(c2);(c1)序列表的序列3所示的单链DNA分子;(c2)将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列3具有相同功能的DNA分子;所述下游内引物为如下(d1)或(d2);(d1)序列表的序列4所示的单链DNA分子;(d2)将序列4经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列4具有相同功能的DNA分子。2.根据权利要求1所述的成套引物,其特征在于:所述上游内引物或所述下游内引物的末端采用生物素标记。3.一种检测鲤春病毒血症病毒的试剂,由权利要求1或2所述的成套引物和探针组成;所述探针为如下(e1)或(e2);(e1)序列表的序列5所示的单链DNA分子;(e2)将序列5经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列5具有相同功能的DNA分子。4.一种检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒,包括权利要求1或2所述的成套引物或权利要求3所述的试剂。5.权利要求1或2所述的成套引物或权利要求3所述的试剂或权利要求4所述的试剂盒在检测或辅助检测鲤春病毒血症病毒中的应用;或,权利要求1或2所述的成...
【专利技术属性】
技术研发人员:肖勤,刘露,王建梅,李慧欣,
申请(专利权)人:北京科弘生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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