阿尔茨海默病的诊断制造技术

本发明专利技术涉及活的对象中阿尔茨海默病的诊断和监测。尤其是，本发明专利技术涉及包括测量取自怀疑患有阿尔茨海默病之人对象的非神经元细胞中的差异基因表达，其中待测量的基因为位于mTOR信号传导通路中的基因。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及活的对象中阿尔茨海默病的诊断和监测。尤其是，本专利技术涉及包括测量取自怀疑患有阿尔茨海默病之人对象的非神经元细胞中的差异基因表达，其中待测量的基因为位于mTOR信号传导通路中的基因。【专利说明】阿尔茨海默病的诊断
本专利技术涉及活的对象中阿尔茨海默病的诊断和监测。尤其是，尽管不是全部，本专利技术涉及包括测量取自怀疑患有阿尔茨海默病的人对象的非神经元细胞中差异基因表达的方法。本专利技术还涉及监测人细胞中mTOR信号传导的方法。
技术介绍
阿尔茨海默病是老年人中最常见的痴呆形式。由于全世界人口的老龄化，该疾病的发病率在未来几年内将显著上升。因此，迫切需要开发出更好的诊断工具和对确认患有该疾病的人群的新治疗方案。阿尔茨海默病是一种慢性的神经变性紊乱，其特征是海马以及大脑颞叶和额叶内的皮质层神经元的选择性丧失。该疾病的病理特点包括淀粉样斑(其在脑中累积)和由受累神经元中存在的过磷酸化tau蛋白构成的神经纤维缠结(neurofibrillarytangle)。阿尔茨海默病中发生的神经退化过程伴随有进行性认知损伤，其最终导致患病个体的痴呆。对于活着的患者的阿尔茨海默病，目前并没有可接受的“金标准”诊断检测。这反映了确诊患者的困难，其将在死后检查时才确定为患有该疾病。阿尔茨海默病的临床诊断典型地基于临床标准的评价，例如NINCDS / ADRDA标准(McKhann, G.等，(1984)，Neurology34:939-944)。这些标准高度敏感，但是特异性低。尤其是，不满足这些标准的相当比例的患者在死后检查中发现患有阿尔茨海默病。迄今采用的这些临床诊断标准的问题在于，通常只有在痴呆已开始发生时患者才被诊断出来。然而，在该疾病的这一阶段，任何治疗都不大可能能够逆转由神经变性过程所导致的损害。为了改善对阿尔茨海默病患者的处理，需要在该疾病的更早期阶段就能诊断的方法和工具，理想的是甚至在出现认知症状之前。对此，有足够的证据表明，在临床痴呆诊断之前，阿尔茨海默病的神经病变已经发生了好几年，甚至可能是十年(Forlenza等，(2010) BMC Medicine8:89)。基于这些发现,阿尔茨海默病进展的持续性分为以下三个阶段:(i)无症状的阿尔茨海默病(临床前阶段)；(ii)阿尔茨海默病引起的轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MCI)(痴呆前阶段);和(iii)临床上判定为阿尔茨海默病(痴呆)。允许对患有无症状疾病的个体进行鉴定的诊断工具和技术在改善阿尔茨海默病的处理中的价值是无法估量的。而且，其对于能够鉴定将发展成为临床上判定为阿尔茨海默病的具有MCI的患者也是非常有益的。目前用于鉴定MCI的诊断标准在确定处于发展为阿尔茨海默病相关痴呆之风险的患者中具有相对低的预测价值。已经采取了措施以修订阿尔兹海默症的诊断标准，以考虑在早得多的阶段(尤其是在临床前阶段)诊断患该病个体的需要(Sperling等，(2010)Criteria for preclinicalAlzhemier's disease。对此,着眼于使用生物标志物以在早期检测疾病方面的研究目前很活跃(Gustaw-Rothenberg 等，(2010)Biomark.Med.4(I):15-26)。目前为止，研究人员集中于测量人体液(主要是脑脊液)中的生物标志物，以及可以采用先进的神经成像方法进行检测的生物标志物。然而，这些方法并不特别适于方便、大规模的诊断检测。就疾病进展的分子变化而言，已表明阿尔茨海默病与神经元异常再进入细胞分裂周期有关。该变化看来是在形成淀粉样β斑和神经纤维缠结之前的疾病发生中的早期事件。总之，这些发现使得研究人员假设异常细胞周期调节是阿尔茨海默病的病因而不是其结果(Nagy, (2005) J.cell.Mol.Vol.9,N0.3 =531-541) 0而且，这些细胞周期变化的检测被认为可以用于辅助早期诊断阿尔茨海默病，甚至是针对无症状个体。在这方面，已经观察到，并不是细胞周期再进入本身导致阿尔茨海默病，而是阿尔茨海默病患者的神经元不能对所述细胞周期再进入进行恰当响应。尤其是，由于Gl / S调节检查点的缺陷，阿尔茨海默病患者的神经元不能启动Gl期阻滞以及接下来的再分化。此外，Gl / S过渡期的该调节缺陷已经在阿尔茨海默病个体的除神经元之外的细胞(例如淋巴细胞)中发现。国际申请W002 / 073212描述了一种诊断阿尔茨海默病的方法，其基于筛选非神经元细胞在Gl / S期检查点是否存在细胞周期调节缺陷，例如从怀疑患有疾病的个体中分离出来的淋巴细胞培养物。尤其是，淋巴细胞对Gl抑制剂的差异敏感性用于检测阿尔茨海默病患者的细胞中的细胞周期调控缺陷。
技术实现思路
对细胞周期抑制剂(尤其是mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin))的差异敏感性现已被利用，以鉴定用于诊断和监测阿尔茨海默病的新方法，尤其是在该疾病的早期。因此，根据本专利技术的第一方面，提供了一种在活的人对象中辅助诊断阿尔茨海默病的方法，该方法包括:筛选取自人对象的非神经元细胞与对照非神经元细胞相比的对细胞分裂抑制剂的差异响应，其中通过分析由所述抑制剂诱导的、表I和2中所示的一个或更多个基因的基因表达的相对改变来测量所述差异响应。根据本专利技术的第二方面，提供了一种评价人对象阿尔茨海默病进展风险的方法，该方法包括:筛选取自人对象的非神经元细胞与对照非神经元细胞相比的对细胞分裂抑制剂的差异响应，其中通过分析由所述抑制剂诱导的、表I和2中所示的一个或更多个基因的基因表达的相对改变来测量所述差异响应。可以通过以下确定取自人对象的非神经元细胞对细胞分裂抑制剂的差异响应:(a)对取自怀疑患有阿尔茨海默病的人对象的非神经元细胞诱导细胞分裂；(b)将(a)中分裂中的非神经元细胞分为两组(pool)，并用细胞分裂抑制剂处理一组细胞；(c)针对经细胞分裂抑制剂处理的细胞组和未处理的细胞组测定表I和2中所示的一个或更多个基因的表达水平；(d)比较(C)中分析的经细胞分裂抑制剂处理的细胞组和未处理的细胞组的一个或更多个基因的表达水平，以确定抑制剂诱导的基因表达的任何相对改变；(e)针对对照非神经元细胞重复步骤(a)-(d)；(f)将取自待测人对象的非神经元细胞中所观察到的抑制剂诱导的基因表达的任何相对改变与对照非神经元细胞中所观察到的抑制剂诱导的基因表达的任何相对改变相比较，以确定测试非神经元细胞与对照非神经元细胞之间在抑制剂诱导的相对基因表达改变上的差异，其中所述差异指示阿尔茨海默病。优选地，对照非神经元细胞来源于具有正常认知和/或神经心理测试结果的健康个体。针对取自患有阿尔茨海默病的人对象的非神经元细胞所观察到的与对照非神经元细胞相比的基因表达的差异响应可以进一步用于鉴定可用于治疗阿尔茨海默病的化合物或评价为治疗特定个体的阿尔茨海默病而研发的药理活性物。因此，根据本专利技术的第三方面，提供了一种鉴定具有治疗阿尔茨海默病之潜在药理活性的化合物的方法，该方法包括:在存在和不存在测试化合物的情况下，筛选非神经元细胞对细胞分裂抑制剂的差异响应，所述细胞显示在Gl / S过渡期的细胞周期调节缺陷，其中通过比较表I和2中所示的一个或更多个基因的经抑制剂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：兹苏桑纳·纳吉，
申请(专利权)人：伯明翰大学，
类型：
国别省市：