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一种低产尿素的工业黄酒酵母代谢工程菌及其构建方法技术

技术编号:9901460 阅读:151 留言:0更新日期:2014-04-10 12:52
本发明专利技术公开一种低产尿素的工业黄酒酵母代谢工程菌,该工程菌构建方法如下:构建URA3基因敲除组件,分别转化a型和α型单倍体黄酒酵母,得尿嘧啶缺陷型菌株;构建含有PGK1p强启动子和URA3基因的高表达组件,并分别转化所述a型和α型尿嘧啶缺陷型菌株,通过同源重组整合入该菌株基因组,在其DUR1,2基因起始密码前插入PGK1p强启动子,获得DUR1,2基因高表达的原养型单倍体工程菌株,重新融合为二倍体,即得低产尿素的工业黄酒酵母代谢工程菌。本发明专利技术工程菌为原养型,生长和发酵能力与亲本菌株相差无几,可明显降低发酵液中尿素和EC的含量,不引入外源基因,生物安全性高,具有良好的工业化应用前景。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种低产尿素的工业黄酒酵母代谢工程菌,其特征在于构建方法为:构建URA3基因敲除组件,分别转化a型和α型单倍体黄酒酵母,得尿嘧啶缺陷型菌株;构建含有PGK1p强启动子和URA3基因的高表达组件,并分别转化所述a型和α型尿嘧啶缺陷型菌株,通过同源重组整合入该菌株基因组,在其DUR1,2基因起始密码前插入PGK1p强启动子,获得DUR1,2基因高表达的原养型单倍体工程菌株,重新融合为二倍体,即得低产尿素的工业黄酒酵母代谢工程菌。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:陆健吴殿辉陈坚李晓敏谢广发申超
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:江苏;32

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