本发明专利技术涉及一种通过分离纯化测定黄酒酵母生长曲线的方法，包括以下步骤：（1）分离纯化的步骤（2）吸光度的测定：测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50℃烘干10小时称重；（3）加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温，于520m下测定吸光度；吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=1.2289X-0.4568，R2=0.9966，X为标准葡萄糖浓度(mg/mL)，y为吸光度。本发明专利技术能够准确测定酵母的生长曲线、掌握酵母的生产状态，为酿造优质黄酒奠定基础。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及，属于黄酒酿造的技 术领域。
技术介绍
酵母不仅是黄酒酿造中的糖化剂，小部分发酵剂，同时还赋予黄酒独特的风味。由 于酵母在黄酒酿造中占有极其重要的地位，其质量的优劣，直接影响到黄酒的质量和产量， 因此被形象地喻为"酒之骨"。因此，准备测定酵母的生长曲线、掌握酵母的生产状态是十 分必要的。本专利技术由此产生。
技术实现思路
针对现有技术的上述技术问题，本专利技术的目的是提供一种通过分离纯化测定黄酒 酵母生长曲线的方法，准确测定酵母的生长曲线、掌握酵母的生产状态，为酿造优质黄酒奠 定基础。 为达到上述目的，本专利技术是通过以下技术方案实现的： ，包括以下步骤： (1) 分离纯化的步骤： a、 取保藏菌株，在麦芽汁加2%琼脂灭菌平板上划线分离，30°C培养两天，再重复划线 分离一次，然后转接到相同培养基的斜面上，于冰箱中保藏； b、 取斜面中菌株接入250mL灭菌麦汁中，lOOrpm、温度30°C摇床培养每隔2小时取样 5mL，其中lmL用测定吸光度法确定生长曲线，另外4mL用于菌体干重法确定生长曲线； (2) 吸光度的测定：取样lmL稀释20倍于620m处测定吸光度，以同样稀释度的麦汁作 为空白； 所述的测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分 钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50°C烘干10小时称 重； (3) 加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温，于520m下 测定吸光度； 吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=l. 2289X-0. 4568， R2=0. 9966, X为标准葡萄糖浓度（mg/mL)，y为吸光度； (4) 接种酵母于170ml麦芽汁培养基中，同时做一空白对照，30°C培养，以此为起始时 间，记录起始溶液的细胞数，并在培养，2,4,6,8,10，12,14,16, 20, 22, 24小时测定酵母菌 在660nm处的吸光值；然后以酵母菌细胞吸光质作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制生长曲 线。 本专利技术的有益效果如下： 本专利技术，能够准确测定酵母的生长曲 线、掌握酵母的生产状态，为酿造优质黄酒奠定基础。【附图说明】 图1为本专利技术的酵母的生长曲线图。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但本专利技术的保护范围并不限于 此。 本专利技术通过分离纯化测定黄酒酵母生长曲线的方法，包括以下步骤： (1) 分离纯化的步骤： a、 取保藏菌株，在麦芽汁加2%琼脂灭菌平板上划线分离，30°C培养两天，再重复划线 分离一次，然后转接到相同培养基的斜面上，于冰箱中保藏； b、 取斜面中菌株接入250mL灭菌麦汁中，lOOrpm、温度30°C摇床培养每隔2小时取样 5mL，其中lmL用测定吸光度法确定生长曲线，另外4mL用于菌体干重法确定生长曲线； (2) 吸光度的测定：取样lmL稀释20倍于620m处测定吸光度，以同样稀释度的麦汁作 为空白； 所述的测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分 钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50°C烘干10小时称 重； (3) 按下表1加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温， 于520m下测定吸光度；吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=l. 2289X-0. 4568， R2=0. 9966, X为标准葡萄糖浓度（mg/mL)，y为吸光度； (4) 接种酵母于170ml麦芽汁培养基中，同时做一空白对照，30°C培养，以此为起始时 间，记录起始溶液的细胞数，并在培养，2,4,6,8,10，12,14,16, 20, 22, 24小时测定酵母菌 在660nm处的吸光值；然后以酵母菌细胞吸光质作纵坐标，生长时间作横坐标，制得如图1 所示的生长曲线。 本专利技术，能够准确测定酵母的生 长曲线、掌握酵母的生产状态，为酿造优质黄酒奠定基础。 上述实施例仅用于解释说明本专利技术的专利技术构思，而非对本专利技术权利保护的限定， 凡利用此构思对本专利技术进行非实质性的改动，均应落入本专利技术的保护范围。【主权项】1. ，其特征在于包括以下步骤： (1) 分离纯化的步骤： a、 取保藏菌株，在麦芽汁加2%琼脂灭菌平板上划线分离，30°C培养两天，再重复划线 分离一次，然后转接到相同培养基的斜面上，于冰箱中保藏； b、 取斜面中菌株接入250mL灭菌麦汁中，lOOrpm、温度30°C摇床培养每隔2小时取样 5mL，其中ImL用测定吸光度法确定生长曲线，另外4mL用于菌体干重法确定生长曲线； (2) 吸光度的测定：取样ImL稀释20倍于620m处测定吸光度，以同样稀释度的麦汁作 为空白； 所述的测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分 钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50°C烘干10小时称 重； (3) 加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温，于520m下 测定吸光度； 吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=l. 2289X-0. 4568， R2=0. 9966,X为标准葡萄糖浓度（mg/mL)，y为吸光度； (4) 接种酵母于170ml麦芽汁培养基中，同时做一空白对照，30°C培养，以此为起始时 间，记录起始溶液的细胞数，并在培养，2,4,6,8,10，12,14,16, 20, 22, 24小时测定酵母菌 在660nm处的吸光值；然后以酵母菌细胞吸光质作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制生长曲 线。【专利摘要】本专利技术涉及，包括以下步骤：（1）分离纯化的步骤（2）吸光度的测定：测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50℃烘干10小时称重；（3）加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温，于520m下测定吸光度；吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=1.2289X-0.4568，R2=0.9966，X为标准葡萄糖浓度(mg/mL)，y为吸光度。本专利技术能够准确测定酵母的生长曲线、掌握酵母的生产状态，为酿造优质黄酒奠定基础。【IPC分类】G01N21/31【公开号】CN104931443【申请号】CN201510353721【专利技术人】张苏敏, 张新华, 何绍木, 鲁志康 【申请人】绍兴文理学院【公开日】2015年9月23日【申请日】2015年6月25日本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种通过分离纯化测定黄酒酵母生长曲线的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）分离纯化的步骤：a、取保藏菌株，在麦芽汁加2％琼脂灭菌平板上划线分离，30℃培养两天，再重复划线分离一次，然后转接到相同培养基的斜面上，于冰箱中保藏；b、取斜面中菌株接入250mL灭菌麦汁中，100rpm、温度30℃摇床培养每隔2小时取样5mL，其中1mL用测定吸光度法确定生长曲线，另外4mL用于菌体干重法确定生长曲线；（2）吸光度的测定：取样1mL稀释20倍于620m处测定吸光度，以同样稀释度的麦汁作为空白；所述的测定方法为菌体干重法：离心管编号干燥称重，取样4mL于4000rpm离心5分钟，弃去上清夜，稀盐酸洗涤菌体，离心后继续用蒸馏水洗涤离心，于50℃烘干10小时称重；（3）加入各组分于25mL比色管中，定容至25mL，沸水浴5分钟，冷却到室温，于520m下测定吸光度；吸光度与标准葡萄糖浓度的线性表达式为y=1.2289X‑0.4568，R2=0.9966，X为标准葡萄糖浓度(mg/mL)，y为吸光度；（4）接种酵母于170ml麦芽汁培养基中，同时做一空白对照，30℃培养，以此为起始时间，记录起始溶液的细胞数，并在培养，2，4，6，8，10， 12，14，16，20，22，24小时测定酵母菌在660nm处的吸光值；然后以酵母菌细胞吸光质作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制生长曲线。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张苏敏，张新华，何绍木，鲁志康，
申请(专利权)人：绍兴文理学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33
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