一种牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌的制备方法，所述一种牛乳铁蛋白肽LFB和编码该蛋白的基因Lfcin?B，其DNA序列如序列表中1所示，该基因编码的蛋白的氨基酸序列如序列表中2所示。本发明专利技术根据酵母偏爱密码子重新设计新的Lfcin?B抗菌肽基因，合成其DNA序列转化于毕赤酵母中表达，形成抗菌肽基因的毕赤酵母工程菌，同时优化该菌发酵条件，达到高密度发酵和高效表达的效果。本发明专利技术的有益效果是：该工程菌发酵液对Gram+菌、Gram-菌及真菌等均有明显的抑制作用，将发酵液经处理的产品添加到猪的饲料中，均达到较好的实验结果，该抗菌肽制品能够代替抗生素，能够预防消化道疾病、促进生长、增加体重，可以作为畜禽饲料添加剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，具体地说是及应用。
技术介绍
抗菌肽是基因编码的肽类抗菌分子，是生物机体在抵御病原微生物的防御反应中所产生的一类抗微生物和一些恶性细胞的短肽。由于这类多肽具有广谱高效杀菌活性，因而最初被命名为“antibacterial peptides, ABP”,译为抗菌肽。它们不仅对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌有较强的杀灭作用，对某些真菌、原生动物，尤其是对耐药性细菌也具有杀灭作用，极有可能成为一种高效、低毒且无残留危害的抗菌、抗病毒、抗癌新药，甚至可以通过基因工程的方法将抗菌肽基因导入植物、动物和微生物体内，用于大批量生产或进行动植物的抗病育种。 1972年,瑞典科学家Boman等首先在果蝇中发现抗菌肽及其免疫功能。Steiner等人于1981年研究了来自天蚕蛹的抗菌多肽cecropins,该肽在昆虫天然免疫中发挥着重要的作用，它也被认为是第I个真正意义上的抗菌肽。随后，人们又在细菌、真菌、两栖类、哺乳动物、植物和人类中相继发现并分离得到了抗菌肽。牛乳铁蛋白肽(Bovine Lactoferricin,简写为Lfcin B)是经胃蛋白酶从牛乳铁蛋白(bLF本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌，其特征是一种抗菌肽基因Lfcin?B转化GS115、KM71和X33等毕赤酵母菌株而制得的工程菌。

【技术特征摘要】
1.一种牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌，其特征是一种抗菌肽基因Lfcin B转化GS115、KM71和X33等毕赤酵母菌株而制得的工程菌。2.根据权利要求1所述的牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌，其特征在于所述的载体是pPIC3.5K、pPIC9K、pPICZ a A、pGAPZ α A 等毕赤酵母表达载体。3.根据权利要求1所述的牛乳铁蛋白肽毕赤酵母工程菌，其特征在于所述的基因是抗菌肽基因 Lfcin B，其核苷酸序列如下:TTT MG TGT AGA AGA TGG CAA TGG AGA ATG MGAAG TTG GGT GCT CCA TCT ATT ACT TGT GTT AGAAGA GCT TTC。4.根据权利要求2所述的抗菌肽基因，其特征在于，经酵母偏爱密码子优化的DNA序列为:TTT AAG TGT AGA AGA TGG CAA TGG AGA ATG AAG AAG TTG GGT GCT CCA TCT ATTACT TGT GTT A...

【专利技术属性】
技术研发人员：李本涛，李帅伟，
申请(专利权)人：广州格拉姆生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：