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一种用于检测结直肠癌K-ras基因突变的核酸质谱的制备方法及其产品技术

技术编号:9829958 阅读:111 留言:0更新日期:2014-04-01 18:52
本发明专利技术公开了一种用于检测K-ras基因12、13密码子突变的方法,该方法基于质谱检测核酸酶切指纹图谱技术,包括PCR扩增、PCR产物纯化、逆转录和核酸酶切、酶切产物纯化、质谱仪检测等步骤。基于该方法,检测人K-ras基因12、13密码子是否存在突变,可为临床判断患者预后,决定用药方案提供参考。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种制备K‑ras基因12、13密码子突变的核酸指纹图谱的方法,包括如下步骤: (1)PCR反应:使用特异性PCR引物,扩增包含12、13密码子在内的K‑ras基因DNA序列; (2)PCR产物纯化:对步骤(1)得到的PCR产物进行纯化; (3)逆转录和核酸酶切:使用特定的逆转录酶和核酸酶,对步骤(2)得到的纯化产物进行逆转录和核酸酶切,获得一系列长度不一、丰度不一的核酸片段; (4)纯化:对步骤(3)得到的酶切产物进行纯化; (5)质谱仪检测:将步骤(4)得到的纯化产物上点在含有基质的靶片上,上质谱仪进行检测,得到K‑ras基因DNA片段(含12、13密码子)的核酸酶切指纹图谱。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张学记马庆伟赵洪斌张海燕林燕
申请(专利权)人:向华
类型:发明
国别省市:湖南;43

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