本发明专利技术公开了一种稻米直链淀粉含量微控基因GBSSII的分子标记GBSSII-m，以水稻作为物种，所述分子标记引物选自下列引物对，其中的核苷酸序列为5′→3′，GBSSII-m正向：TGTCAGTCGCTGTCCTCGTA，反向：GATCTCATCCCATGCTAAGTTACT。本发明专利技术还同时公开了上述分子标记GBSSII-m的用途，用于水稻稻米直链淀粉含量鉴定和/或其后代辅助选择育种。当筛选日本晴和特青的后代时，选择后代中带型与日本晴带型一致的单株用于育种。
【技术实现步骤摘要】
稻米直链淀粉含量微控基因GBSSI I分子标记及应用
本专利技术属于农业生物技术工程，特别涉及与稻米直链淀粉含量调控基因GBSSII有关的分子标记GBSSI1-m及其获得方法和用途。
技术介绍
高产、优质一直是水稻育种长期追求的目标。经过长期的努力，尤其是杂交稻技术的利用，我国在水稻生产上取得了举世公认的成就。但是由于过去一直把如何解决人们的温饱问题放在第一位，故而水稻育种工作的重点大部分集中于水稻高产新品种的培育，从而导致优质稻米的育种严重滞后，特别是一些高产的杂交稻品质普遍偏差。导致稻米品质改良进展较慢的另一个主要原因是稻米品质遗传的复杂性和传统育种手段的局限性。稻米的品质性状包括外观品质、加工品质、蒸煮品质、营养品质和食味品质等诸多方面，而稻米蒸煮品质是评价稻米品质的最重要指标。蒸煮品质是指稻米在蒸煮过程中所表现出来的特性，主要由直链淀粉含量(Amylose Content, AC)、胶稠度(GelConsistency, GC)、糊化温度(Gelatinization Temperature, GT)三个理化指标来评价，其中AC是影响稻米品质最主要的理化指标。育种学家和遗传学家做了大量的工作以探寻稻米AC的遗传学基础，然而不同实验室的结果有着较大的差别。早期的研究表明稻米AC是由一个主效基因控制，并受到其他微效QTL的调控[1，2]。随后的研究发现Waxy (Wx)对于稻米AC的多少具有决定性的作用，可能就是控制AC的主效基因[3-5]。除在第6染体上检测到I个主效QTL外，不同研究检测到的微效QTL数目及位置很不一致。例如，Tan等在第1、2染色体上检测到了 两个微效QTLs [6] ,He等在第5染色体检测到了一个微效QTL[6]，Aluko等在第3和8染色体上分别检测到了微效QTLs[7]。黄祖六等研究发现除了第6染色体的Wx基因位点外，在第3染色体也检测到一个控制稻米AC的主效QTL ;另外5个微效QTLs分别位于第4、4、6、9、11染色体的不同座位上[8]。其他实验室在第4、6、7染色体也检测到了控制AC的QTLs [9]。吴长明等在第6染色体上并没有发现与AC有关的QTL位点，只是在第I，7，8，9，12染色体上发现5个QTL位点[10]。导致稻米品质改良进展较慢的另一个主要原因是在传统育种手段的局限性。传统育种方法主要是对有利目标性状进行定向选择和固定，培育出优良新品种，这具有很大的盲目性和不可预测性[11]。并且，个体选择的方法是对符合育种目标的农艺性状进行直接选择，即选择的是个体表现型而不是基因型。由于基因间存在一因多效、多因一效、调控基因以及修饰基因等的作用，个体的表现型与基因型往往存在较大差异，因而通过田间表型性状进行个体选择的准确性较差。分子标记辅助选择(Marker-gssisted Selection, MAS)技术给水稻育种提供了新的途径，与传统育种技术相结合可大大提闻育种效率，缩短育种周期。MAS的核心是把常规育种中的表型选择转化为基因型选择，它直接反映了 DNA的序列差异，不受基因表达的影响，结果可靠性强，并且不受植物的生长发育阶段及环境条件的影响[12]。上文中涉及的参考文献如下:1.Bollich C.ff., BD.1nheritance of amylose in two hybrid populations ofrice.Cereal Chem.1973，50，631_636(Bollich C.ff., BD.直链淀粉含量的在两个杂交群体的遗传，谷物化学? 1973.50:631-636)；2.McKenzie K.R., JN.Genetic analysis of amylose content, alkalispreading score, and grain dimensions in rice.Crop Sc1.1983, 23, 306-311(McKenzie K.R.，JN.水稻直链淀粉含量、碱消值和籽粒形态的遗传分析.作物科学?1983，23:306-311)；3.Sano Y.Differential regulation of waxy gene expression in riceendosperm.Theor.App1.Genet.1984, 68, 467-473 (Sano Y.水稻胚乳腊质基因表达的差异调控?理论和应用遗传? 1984，68:467-473)；4.Kumar 1.K., G S.Juliano, B 0.Genetic analysis of waxy locusin rice(Oryza sat iva L.).Theor.Appl.Genet.1987, 73,481-488 (Kumar1.K.，G S.Juliano, B 0.水稻胚乳蜡质基因位点的遗传分析.理论和应用遗传? 1987，73:481-488)；5.Kumar 1.K., GS.1nheritance of amylose content in rice(Oryza sativa L.).Euphytical988，38，261-269 (Kumar 1.K.，GS.水稻直链淀粉含量的遗传.欧洲植物学? 1988，38:261-269)；6.Tan Y.F., Li J.X., Yu S.B., et al.The three important traits for cookingand eating quality of rice grains are controlled by a single locus in an eliterice hybrid, Shanyou63.Theor.Appl.Genet.1999, 99, 642-648 (Tan Y.F., Li J.X., YuS.B.，等.优异杂交稻汕优63`稻米蒸煮食味品质的三个重要指标受单位点控制.理论和应用遗传? 1999，99:642-648)；7.Aluko G.，Martinez C., Tohme J., et al.QTL mapping of grain qualitytraits from the interspecific cross Oryza sativa x 0.glaberrima.Theor.Appl.Genet.2004, 109, 630-639 (Aluko G., Martinez C., Tohme J.，等.稻米杆粒性状在亚洲栽培稻和非洲栽培稻种间杂交群体中的QTL定位.理论和应用遗传.2004, 109:630-639)；8.黄祖六，和谭学林，Tragoonrung S.，et al.稻米直链淀粉含量基因座位的分子标记定位?作物学报2000，26，777-782 ；9.Lanceras J.C., Huang Z.L., Naivikul 0., et al.Mapping of genesfor cooking and eating qualities in Thai jasmine rice (KDML105).DNARes.2000, 7, 93-101 (Lanceras J.C., 本文档来自技高网...
【技术保护点】
稻米直链淀粉含量微控基因GBSSII的分子标记GBSSII?m，以水稻作为物种，其特征是：所述分子标记引物选自下列引物对，其中的核苷酸序列为5′→3′，GBSSII?m???正向：TGTCAGTCGCTGTCCTCGTA???????????反向：GATCTCATCCCATGCTAAGTTACT。
【技术特征摘要】
1.稻米直链淀粉含量微控基因GBSSII的分子标记GBSSI1-m，以水稻作为物种，其特征是:所述分子标记引物选自下列引物对，其中的核苷酸序列为5' —3'， GBSSI1-m 正向:TGTCAGTCGCTGTCCTCGTA 反向:GATCTCATCCCATGCTAAGTTACT。2.如权利要求1所述的分子标记GBSSI1-m的开发方法，其特征是包括以下步骤: 1)、以粳稻品种日本晴作为低直链淀粉含量基因供体亲本与作为高直链淀粉含量的籼稻特青进行杂交、回交和自交，从而获得作为后代...
【专利技术属性】
技术研发人员：曾大力，钱前，李家洋，田志喜，杨窑龙，张光恒，郭龙彪，高振宇，朱丽，胡江，董国军，胡兴民，颜美仙，
申请(专利权)人：中国水稻研究所，
类型：发明
国别省市：
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