定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条及使用其的试纸卡制造技术

本实用新型专利技术提供了一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条及使用其的试纸卡，试纸条包括底板、吸水纸、硝酸纤维素膜、结合垫和样品垫；其中，所述硝酸纤维素膜粘覆于底板的中间部位，且其上间隔设置有由胃蛋白酶原II单克隆抗体Ⅱ涂层形成的检测线和由兔抗鼠IgG抗体涂层形成的质控线，所述检测线靠近所述结合垫，所述质控线靠近所述吸水纸；所述结合垫处喷涂有标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体Ⅰ的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层；所述吸水纸、所述硝酸纤维素膜、所述结合垫以及所述样品垫之间，依次与且仅与相邻部位相接触且部分重叠。本实用新型专利技术所述试纸条可用于单人次定量检测，解决了现有技术中试剂盒无法单人次少批量检测的问题。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

Time resolved immunochromatographic test paper for quantitative detection of pepsinogen II and test paper card using the same

The utility model provides a quantitative detection of pepsinogen II time-resolved immunochromatographic test strip and the card strip comprises a bottom plate, absorbent paper, nitrocellulose membrane, combined with pad and a sample pad; wherein the nitrocellulose membrane is covered on the bottom of the middle part, and the interval set the control line and a detection line formed by pepsinogen II II monoclonal antibody coating and by Rabbit anti rat IgG antibody coating formation, the detection line close to the bonding pad, the control line near the absorbent paper; the combination of pad coating containing lanthanide polymer microspheres are labeled with nano coating pepsinogen II monoclonal antibody 1; the absorbent paper, the cellulose nitrate film, the binding between the pad and the sample pad, and in turn and only with adjacent parts in contact with some Overlap. The test paper strip of the utility model can be used for single time quantitative detection, and solves the problem that the reagent box can not be detected in single and small batches in the prior art.

【技术实现步骤摘要】
定量检测胃蛋白酶原N的时间分辨免疫层析试纸条及使用其的试纸卡
[0001 ] 本技术涉及一种定量检测胃蛋白酶原II含量的试纸条，尤其涉及一种定量检测胃蛋白酶原II含量的时间分辨荧光免疫层析试纸条，属于体外试剂诊断
。
技术介绍
胃蛋白酶原(Pesinogen，PG)是胃液中胃蛋白酶的无活性前体。血清PG水平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能，胃蛋白酶原II (简称PGII)来源于全胃腺和远端十二指肠Brunner氏腺，胃粘膜合成的PGII约为总量的25%。PGII大部分进入消化道，少量进入血液循环，因此被称为“反映胃部状态和功能的指针”，其水平的变化可以直接反映胃粘膜和十二指肠状态和细胞数量的改变。国内外临床研究指出，PGII与胃底粘膜病变的相关性较大，其升高与胃底腺管萎缩、肠上皮化生或假幽门腺化生、异性增生有关。测定PGII含量有助检测出十二指肠溃疡、萎缩性胃炎，胃炎，胃癌等其他消化道疾病，供临床检测和体检筛查需要，GII检测作为非侵入性方法，降低患者痛苦，简便、经济、具有普查价值。对于胃蛋白酶原II的检测，目前临床常用的方法包括:乳胶增强免疫比浊法，酶联免疫法(ELISA)，化学发光法，时间分辨免疫法，但是这些方法都有各自的特点及不足。乳胶增强免疫比浊法，操作简单，可以全自动化，但是，其灵敏度不高，无法实现精确定量；ELISA法和时间分辨免疫法定量准确，但手工操作，过程复杂，中国专利文献CN202854148U公开了一种胃蛋白酶原I时间分辨荧光免疫检测试剂盒，该试剂盒内组成包括:抗PG I单克隆抗体包被板，PG I标准品，Eu标抗PG I单克隆抗体，缓冲液，增强液，浓缩洗板液。其利用标记物的荧光和高效的单克隆抗体，达到血清不需要稀释直接反应检测，减轻工作量的目的。但该试剂盒的试剂不适合单人份和较小批量检测用。中国专利文献CN101762705A公开了一种检测锗瘟病毒的胶体金免疫层析试纸条，由吸水纸、硝酸纤维素膜、胶体金垫、样品垫和支持物组成，所述的硝酸纤维素膜含有一条由抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体HQQ6包被而成的检测线和由兔抗鼠IgG抗体包被而成的质控线,所述的胶体金垫结合由胶体金标记的抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体6E10。该胶体金免疫层析技术利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细层析作用，使抗原抗体在固相膜上反应，然后用胶体金标记的抗体显色，阳性反应在膜上呈现红色，阴性反应则不出现红色。该采用胶体金免疫层析技术的试纸条虽然使用方便、可用于单份小批量检测，但其只适用于定性测量，并不适用于定量测量，因此其不适用于测定胃蛋白酶原II。
技术实现思路
为解决现有技术中胃蛋白酶原II时间分辨荧光免疫检测试剂盒，无法实现单人次少批量检测的问题，及胶体金免疫层析法只能定性不能定量检测的问题，进而提供一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条。为此，本技术采取的技术方案为:—种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，包括，底板以及沿所述底板的长度方向顺次粘覆于所述底板上的吸水纸、硝酸纤维素膜、结合垫和样品垫；其中，所述硝酸纤维素膜粘覆于所述底板的中间部位，且其上设置有相间隔的由胃蛋白酶原II单克隆抗体II涂层形成的检测线和由兔抗鼠IgG抗体涂层形成的质控线，所述检测线靠近所述结合垫，所述质控线靠近所述吸水纸；所述结合垫处喷涂有标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层；所述吸水纸、所述硝酸纤维素膜、所述结合垫以及所述样品垫之间，依次与且仅与相邻部位相接触且部分重叠。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述含有镧系元素的高分子纳米微球的直径为10-500nm。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述含有镧系元素的高分子纳米微球的直径为100-300nm。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述结合垫上喷涂的标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层为标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有铕离子的高分子纳米微球涂层。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述质控线与所述检测线平行设置，且所述质控线与所述检测线之间的距离为0.5cm-l.0cm0上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述吸水纸位于所述硝酸纤维素膜的上方，且所述吸水纸与所述硝酸纤维素膜相重叠的部分沿所述底板长度方向的长度为2mm。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述结合垫位于所述硝酸纤维素膜的上方，且所述结合垫与所述硝酸纤维素膜相重叠的部分沿所述底板长度方向的长度为2mm。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述样品垫位于所述结合垫的上方，且所述样品垫与所述结合垫相重叠的部分沿所述底板长度方向的长度为2mm ；所述结合垫沿所述底板长度方向的长度大于4mm。本技术还提供了一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试剂卡，包括上述的试纸条以及包覆所述试纸条的外壳；所述外壳包括底座和卡盖，所述卡盖上设置有观察口和加样口，以露出试纸条的局部区域；所述加样口开口于所述样品垫上部，以露出部分或全部所述样品垫区域；所述观察口开口于所述硝酸纤维素膜上部，以露出全部所述检测线和所述质控线。上述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试剂卡中，所述外壳为塑料外壳。与现有技术相比，本技术具有如下优点:(I)本技术所述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条将时间分辨荧光免疫技术、双抗体夹心测抗原与具体试纸结构相结合，形成了一种可用于单人次定量检测胃蛋白酶原II的试纸条，解决了现有技术中胃蛋白酶原II试剂盒无法单人次少批量检测的问题。采用本技术所述试纸条检测胃蛋白酶原II时灵敏度高，批内、批间误差小，为临床使用提供了极大便利。(2)本技术所述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条中，所述结合垫上喷涂有标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的镧系元素微球涂层，解决了将胃蛋白酶原II单克隆抗体I的直接标记于荧光元素进行检测时，荧光信号微弱，造成检测不准确的问题，含有镧系元素的高分子纳米微球减少了镧系元素在样品溶液中的猝灭，提高了镧系元素发出的荧光强度，进而提高了检测的精确度。(3)本技术所述定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸，由定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条和塑料卡壳组成，不仅利于检测操作更利于试纸条的存放和携带。【附图说明】为了使本技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本技术的具体实施例并结合附图，对本技术作进一步详细的说明，其中图1为本技术所述试纸条的沿其长度方向的剖面图；图2为本技术所述试纸条的平面图；图3为本技术所述试纸卡的平面图。其中，附图标记为1-底板，2-硝酸纤维素膜，3-吸水纸，4-样品垫，5-结合垫，6_质控线，7_检测线，8-卡盖，9-加样口，10-观察口。【具体实施方式】图1为本技术一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条沿其长度方向的剖面图，图2为所述试纸条的平面图，由图1和图2可以看出所述试纸条包括底板I以及沿所述底板I的长度方向顺次粘覆本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，包括，?底板（1）以及沿所述底板（1）的长度方向顺次粘覆于所述底板（1）上的吸水纸（3）、硝酸纤维素膜（2）、结合垫（5）和样品垫（4）；其中，?所述硝酸纤维素膜（2）粘覆于所述底板（1）的中间部位，且其上设置有相间隔的由胃蛋白酶原II单克隆抗体Ⅱ涂层形成的检测线（7）和由兔抗鼠IgG抗体涂层形成的质控线（6），所述检测线（7）靠近所述结合垫（5），所述质控线（6）靠近所述吸水纸（3）；?所述结合垫（5）处喷涂有标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体Ⅰ的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层；?所述吸水纸（3）、所述硝酸纤维素膜（2）、所述结合垫（5）以及所述样品垫（4）之间，依次与且仅与相邻部位相接触且部分重叠。

【技术特征摘要】
1.一种定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，包括， 底板(I)以及沿所述底板(I)的长度方向顺次粘覆于所述底板(I)上的吸水纸(3)、硝酸纤维素膜(2)、结合垫(5)和样品垫(4);其中， 所述硝酸纤维素膜(2 )粘覆于所述底板(I)的中间部位，且其上设置有相间隔的由胃蛋白酶原II单克隆抗体II涂层形成的检测线(7)和由兔抗鼠IgG抗体涂层形成的质控线(6),所述检测线(7)靠近所述结合垫(5)，所述质控线(6)靠近所述吸水纸(3); 所述结合垫(5)处喷涂有标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层； 所述吸水纸(3)、所述硝酸纤维素膜(2)、所述结合垫(5)以及所述样品垫(4)之间，依次与且仅与相邻部位相接触且部分重叠。2.根据权利要求1所述的定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，其特征在于，所述含有镧系元素的高分子纳米微球的直径为10-500nm。3.根据权利要求2所述的定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，其特征在于，所述含有镧系元素的高分子纳米微球的直径为100-300nm。4.根据权利要求3所述的定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，其特征在于，所述结合垫(5)上喷 涂的标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有镧系元素的高分子纳米微球涂层为标记有胃蛋白酶原II单克隆抗体I的含有铕离子的高分子纳米微球涂层。5.根据权利要求1-4任一所述的定量检测胃蛋白酶原II的时间分辨免疫层析试纸条，其特征在于，所述质控线(6 )与所述检测线(7 )平行设置，且所...

【专利技术属性】
技术研发人员：周衍，黄飚，邹霈，吕坤祥，蒋叶华，王翌，张珏，张艺，周彬，
申请(专利权)人：江苏省原子医学研究所，
类型：实用新型
国别省市：