一种药物组合物指纹图谱的测定方法技术

本发明专利技术公开了一种药物组合物指纹图谱的测定方法，通过高效液相色谱法测定该药物组合物的指纹图谱从而有效监控该药物质量。该方法包括以下步骤：（a）供试品溶液制备：取药物适量，置于量瓶中，加入甲醇与水的混合溶液超声溶解，定容，滤过，即为供试品溶液；（b）色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为乙腈，检测波长240-300nm；（c）测定：吸取上述供试品溶液注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到该药物组合物指纹图谱。该检测方法操作方便，效率高效，重复性和稳定性好，易于掌握。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了，通过高效液相色谱法测定该药物组合物的指纹图谱从而有效监控该药物质量。该方法包括以下步骤：（a）供试品溶液制备：取药物适量，置于量瓶中，加入甲醇与水的混合溶液超声溶解，定容，滤过，即为供试品溶液；（b）色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为乙腈，检测波长240-300nm；（c）测定：吸取上述供试品溶液注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到该药物组合物指纹图谱。该检测方法操作方便，效率高效，重复性和稳定性好，易于掌握。【专利说明】
本专利技术涉及医药
，具体涉及一种药物组合物的指纹图谱的测定方法。
技术介绍
中药指纹图谱是借助于波谱或色谱技术获得的中药化学成分的光谱图或色谱图，是一种综合的、可量化的鉴别手段，是当前符合中药特色的评价中药真实性、稳定性和一致性的质量控制模式之一。目前，美国FDA、英国和印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用植物学会均接受色谱指纹图谱的质控方法。由于中药复方指纹图谱整张图谱是由不同峰群组成，每一峰群都代表一组生物信息，且各种生物信息之间的相互协同及拮抗作用，正好体现了中药复方的配伍和组方理论。此外,这些峰群或峰群之间通过对机体主病及主证的治疗，体现了控制某张中药复方指纹图谱，就可确保其相应药效。目前中药指纹图谱的建立方法主要有:光谱法，如紫外光谱法(UV)、红外光谱法(IR);色谱法，如薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、毛细管电泳法；以及其他方法，如X射线衍射法、核磁共振法等。其中高效液相色谱法(HPLC)具有分析速度快，定量精密度高，检测器种类多，稳定性好等特点，不受样品挥发度和热稳定性的限制，比气相色谱法等其他方法应用范围更广，是构建指纹图谱的主要方法之一。抑郁症是一种常见的精神疾病，主要表现为情绪低落、兴趣减低、悲观、思维迟缓、自责自罪、饮食睡眠差、担心或感到全身多处不适、严重者可出现自杀念头和行为。目前，抑郁症已迅速成为全球疾病中给人类造成严重负担的第二位重要疾病，对患者及其家属造成的痛苦和对社会造成的损失是其他疾病所无法比拟的。舒肝解郁胶囊是国内首个SFDA批准的用于治疗抑郁的中成药。主要的功效为健脾安神，适用于轻、中度单相抑郁症属肝郁脾虚证者，症见情绪低落、兴趣下降、迟滞、入睡困难、早醒、多梦、紧张不安、急躁易怒、食少纳呆、胸闷、疲乏无力、多汗、疼痛、舌苔白或腻，脉弦或细。该药是在吸取中医有关治疗抑郁的经验基础上，借鉴国内外现代医学治疗抑郁的最新研究成果配方而得。舒肝解郁胶囊的作用机制是通过其有效成分透过血脑屏障对海马神经元的萎缩以及中枢局部组织的生化失调产生重要的保护作用。有临床报道舒肝解郁胶囊对轻中度抑郁有效率为68.10%，远较安慰剂的29.0%高，差异具有统计学意义，临床总体疗效评估也证实了舒肝解郁胶囊抗抑郁疗效明显优于安慰剂，并且其安全性及耐受性良好。因此，舒肝解郁胶囊是一种疗效和安全性俱佳的纯中药制剂。舒肝解郁胶囊由贯叶金丝桃、刺五加两味中药组成。贯叶金丝桃已经有2400年的使用历史，近年来对金丝桃的研究热点放在抗抑郁功效方面。贯叶金丝桃醇提取的主要成分为6类:萘并二蒽酮类(naphtho1-anthrones)、间苯三酌.类(phloroglucinols)、黄酮类(fIavonoids)、双黄酮类(biflavones)、苯丙烯酸类(phenylpropanes)、原花青素(proanthocyanidins)。另外,还有少量的单宁酸、氧杂蒽酮、挥发油和氨基酸等。刺五加始见于《神农本草经》，2010年版《中国药典》记载其有“益气健脾，补肾安神”的功效。文献报道其主要的化学成分有刺五加皂苷、黄酮类、多糖类、三萜皂苷类、木脂素和咖啡酰奎宁酸类等。由于舒肝解郁胶囊使用的药材贯叶金丝桃和刺五加均具有复杂的化学成分。因此，建立一种舒肝解郁胶囊的指纹图谱测定方法，特别是通过高效液相色谱法测定指纹图谱信息，从药物物质群整体的角度给予其质量控制具有非常重要的意义。目前对于舒肝解郁胶囊指纹图谱的测定尚未见报道。由于舒肝解郁胶囊所用药材刺五加和贯叶连翘中的药物活性成分都比较多，因此这两种药物同时检测(即检测舒肝解郁胶囊)时得到的指纹图谱必须清晰表现出刺五加和贯叶连翘中各自的有效活性成分，避免不同成分的峰出现重叠，这就给其指纹图谱的建立带来了不小的困难。现有技术中有大量报道刺五加或贯叶连翘指纹图谱的检测方法，然而，我们通过实验得知现有技术关于刺五加或贯叶连翘HPLC指纹图谱检测条件不能用于舒肝解郁胶囊指纹图谱的测定，其存在不能有效分离刺五加和贯叶连翘中各自的有效活性成分，检测时间长，效率低，操作复杂等缺点。例如CN1796992A公开了一种刺五加注射液指纹图谱检测方法，使用0.1 %磷酸水溶液为流动相A，30%乙腈水溶液为B进行梯度洗脱，该方法中刺五加主要有效成分紫丁香苷在35分钟以后出峰，所需检测时间较长。罗国安等对刺五加注射液指纹图谱进行了研究，使用0.2%甲酸水溶液为流动相A，35%乙腈水溶液为B进行梯度洗脱，检测波长270nm，该方法中主要有效成紫丁香苷B在34分钟左右出峰，所需检测时间也较长。国家药典委员会于2011年公示的《刺五加注射液质量标准草案》中的刺五加指纹图谱检测方法以乙腈-水(30:70)为流动相A，0.5%甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱，检测波长270 nm,其紫丁香苷在40分钟左右出峰，所需检测时间任然较长。刘朝燊中对贯叶连翘提取物指纹图谱进行了研究，采用甲醇为流动相A，水缓冲盐(94.9%水，5%甲醇，0.1 %磷酸，三乙胺调pH=4.50)为流动相B，乙腈为流动相C进行梯度洗脱，检测波长254nm，该方法有效将贯叶连翘提取物中活性成分分离，但其流动相配制相对复杂。CN200710118972.0公开了一种贯叶连翘总黄酮制备成的制剂的HPLC指纹图谱检测方法，使用乙腈为流动相A，0.1-1.0%磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，该方法中所述贯叶连翘总黄酮中含量最多的有效成分芦丁在23分钟左右出峰，槲皮素在52分钟左右出峰，整个检测时间较长。麻秀芳等开展的贯叶连翘药材化学成分指纹图谱研究，采用1%醋酸水溶液为流动相A，含有1%醋酸的乙腈溶液为甲酸溶液为流动相B，检测波长265 nm，其芦丁在46分钟左右出峰，其检测时间也较长。
技术实现思路
本专利技术提供了，包括以下步骤:(a)供试品溶液制备:取药物适量，置于量瓶中，加入甲醇与水的混合溶液超声溶解，定容，滤过，即为供试品溶液；(b)色谱条件:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为乙腈，检测波长240-300nm ；(c)测定:吸取上述供试品溶液注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到该药物组合物指纹图谱；所述药物组合物选自舒肝解郁胶囊、贯叶连翘提取物或刺五加提取物。所述(a)步骤中优选检测波长为240-300nm，流速为0.5ml/min，柱温为25_35°C，进样体积为1-1Oul ;进一步优选检测波长为265nm,流速为0.5ml/min,柱温为30°C,进样体积为5ul ；所述(a)步骤中优选本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物指纹图谱的测定方法，其特征在于包括以下步骤：（a）供试品溶液制备：取药物适量，置于量瓶中，加入甲醇与水的混合溶液超声溶解，定容，滤过，即为供试品溶液；（b）色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料；采用梯度洗脱，流动相A为甲酸水溶液，流动相B为乙腈，检测波长240?300nm；（c）测定：吸取上述供试品溶液注入液相色谱仪，按照高效液相色谱法测定，得到该药物组合物指纹图谱；所述药物组合物选自含有贯叶连翘和刺五加的舒肝解郁胶囊、贯叶连翘提取物或刺五加提取物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：柯潇，邬智刚，乔怀耀，
申请(专利权)人：成都康弘药业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：