全长cDNA核酸线性扩增方法及试剂盒技术

本发明专利技术涉及分子生物学领域，具体公开了一种全长cDNA核酸线性扩增方法，通过mRNA分离纯化；逆转录合成第一链cDNA；第一链cDNA3'末端延伸，获得全长第一链cDNA；全长第一链cDNA富集纯化；双链cDNA的合成等步骤，合成两端序列已知的全长cDNA。本发明专利技术的全长cDNA核酸线性扩增方法灵敏度高、方法简单，适用于全长cDNA的高效合成。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及分子生物学领域，具体公开了一种全长cDNA核酸线性扩增方法，通过mRNA分离纯化；逆转录合成第一链cDNA；第一链cDNA3'末端延伸，获得全长第一链cDNA；全长第一链cDNA富集纯化；双链cDNA的合成等步骤，合成两端序列已知的全长cDNA。本专利技术的全长cDNA核酸线性扩增方法灵敏度高、方法简单，适用于全长cDNA的高效合成。【专利说明】全长cDNA核酸线性扩增方法及试剂盒
本专利技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种全长cDNA核酸线性扩增方法。
技术介绍
基因表达水平和模式的变化驱动着生物体内主要的生物学过程。分离和克隆基因是研究基因结构、功能以及表达的基础。以往建立和筛选cDNA以及DNA文库来分离克隆目的基因的经典方法繁琐而且工作量大。PCR技术的出现极大的提高了分离克隆目的基因的效率，RT-PCR、锅柄PCR、连接介导PCR等技术为扩增已知序列旁侧的未知DNA片段提供了捷径，可以根据已知序列信息设计基因转化引物，以反转录的第一链cDNA为模板通过PCR分别扩增3’端和5’端序列并克隆，然后拼接出全长序列。经典的是cDNA末端的快速扩增本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种cDNA核酸扩增方法，其步骤为：（1）mRNA分离纯化；（2）逆转录合成5’端序列已知的第一链cDNA；（3）5’端序列已知的第一链cDNA?3“末端延伸，获得全长第一链cDNA；（4）全长第一链cDNA富集纯化；（5）双链cDNA的合成或RNA的转录。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：唐荣，苏丽，唐冬梅，
申请(专利权)人：上海欧孚生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：