血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂及其应用。本发明专利技术涉及药物领域，具体涉及具有抑制血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶，能预防和治疗类风湿性关节炎的多肽。其序列为Val-Cys-Cys-Ser-Thr–Arg-Glu是全新的序列，本发明专利技术的有益效益是可用于治疗类风湿性关节炎，具有潜在的新药开发价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗类风湿性关节炎的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂。
技术介绍
: 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是临床最常见的炎性关节病和主要致残因素之一。在全世界约为0.5%-1.0%，RA的发病在我国约为0.4%。RA可发生于任何年龄，随着年龄的增长，发病率也随之增高。女性高发年龄为45-55岁，性别与RA发病关系密切，男女之比约1:3。新生血管生成，在正常生理条件下，受到高度调节，在生殖、胚胎发育、组织修复和创伤愈合中是必不可少的过程。血管生成在多种病理条件下也发生，例如RA。RA的病理过程中，血管新生是一种标志性的组织学改变，新生血管形成伴随滑膜增生和炎细胞浸润，是RA中血管翳形成及关节破坏的基础。原来应该没有血管存在的关节软骨因某种异常变化，而形成新的血管，使得软骨受到侵蚀，造成关节变形或疼痛。新生血管引起类风湿关节炎患者滑膜组织发生异常变化，正常人的关节滑膜内层仅1-2层细胞组成，而RA患者的滑膜内层通常有4-10层细胞(有时甚至超过20层)。这些细胞不仅在数量上异常增多，而且在功能上处于异常活跃的状态，它们可以分泌大量的细胞因子、信号分子和蛋白酶，加速关节破坏的进程。血管内皮生长因子受体2 (VEGFR2)亦称含激酶插入域的受体(KDR)，属于受体酪氨酸激酶超家族。VEGFR2在新生血管生成过程中起着主要的作用。其配体VEGF通过刺激细胞表面VEGFR2活化内皮细胞，发生生化信号的复杂级联与细胞外基质组分和可溶性因子相互作用，导致腔管形成并且分化成成熟的血管。另外，这些被活化的细胞经过细胞增殖过程，来提高细胞粘附分·子的表达，增加蛋白水解酶的分泌，增加细胞迁移和侵袭。目前，靶向KDR的抑制剂已成为开发新兴抗血管新生药物的研究热点。尽管如此，并没有成熟开发的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂问世，用于治疗RA。
技术实现思路
: 本专利技术目的是针对设计一种血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂，可以用于治疗RA。本专利技术技术方案是提供一种血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂1，其序列为Val-Cys-Cys-Ser-Thr-Arg-Glu,及在制备治疗类风湿性关节炎药物中的应用。本专利技术的原理在于血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂与VEGFR2结合，抑制VEGFR2产生生理或病理的效应，起到抑制血管内皮细胞增殖，迁移，血管腔管形成，以及相关细胞因子分泌，从而起到治疗类风湿关节炎的作用。有益结果: 本专利技术中的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I序列Val-Cys-Cys-Ser-Thr _ Arg-Glu,可以革巴向抑制血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶，抑制VEGFR2产生的生理或病理的效应，达到治疗类风湿性关节炎的效果。专利技术人经过大量实验获知血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I能够抑制佐剂型大鼠类风湿关节炎和DBA/1小鼠胶原型类风湿性关节炎的发展，体内实验证明具有显著的治疗类风湿型关节炎的效果，并且副作用少。说明本专利技术设计的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I科学、合理、可行有效，能作为治疗类风湿性关节炎药物。附图说明附图1多肽抑制剂分子构像示意图。1.Val缬氨酸，2.Cys半胱氨酸，3.Cys半胱氨酸，4.Ser丝氨酸，5.Thr苏氨酸，6.Arg精氨酸，7.Glu谷氨酸。具体实施例方式实施例1 多肽的化学合成方法 多肽用Fmoc化学方法合成。合成反应 从C端向N端进行，Rink介质(可在AdvancedChemTech公司购得)上有自由氨基，顺序连接Glu, Arg, Thr, Ser, Cys, Cys和Val。每一步连接过程中，氨基酸残基都要活化，活化混合物中有4倍于介质上自由氨基的HBTU，HOBt,DIEA和Fmoc-氨基酸。每次氨基酸的连接反应之后，都用一个吡啶/醋酸/N-甲基咪唑(4:1:0.5)的混合物来封闭未连接的自由氨基,封闭反应10 min。每次氨基酸的连接反应之后，下一个氨基酸连接之前，都要把介质上的Fmoc-基团去掉,去Fmoc-基团使用含20%哌啶的二甲基甲酰胺，需15分钟。最后，当所有氨基酸残基顺序连接之后，多肽用98%三氟乙酸从介质上切割下来，切割在室温下进行2小时。应用上述化学条件可合成并获得多肽,序列为Val-Cys-Cys-Ser-Thr-Arg-Glu,该序列为全新序列。实施例2 血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用 构建胶原型小鼠关节炎动物模型，研究血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)的治疗作用。采用小鼠作为受试动物，SPF级DBA/1小鼠90只(由上海西普尔-必凯实验动物有限公司(Sino-British SIPPR Lab.Animal Ltd)提供，动物生产许可证号码:SCXK (沪)2008-0016)，雄性，7-8周龄，体重为18-22 g，随机分成6组，分别是正常对照组，模型对照组，多肽抑制剂I低中高3个剂量组(0.4,0.8，1.6 mg/kg)和阳性药对照组(甲氨蝶呤2 mg/kg)。除正常组外，第O天各实验组建立小鼠CIA模型，方法是鸡软骨II型胶原(ell)用0.1 mol/1醋酸溶解成4 mg/ml的溶液，于4°C冰箱过夜。实验当天用II型胶原与含 4 mg/ml Myeobaeterium tuberculosis strain H37Rv 的完全弗氏佐剂(CFA)等体积充分乳化，待DBA/1小鼠麻醉后，于其尾部皮内每只注射乳化剂50 μ 进行致敏，21 d后用4 mg/ml的II型胶原(c II )与不完全弗氏佐剂(IFA)等体积充分乳化后以相同剂量的乳化剂于尾部进行再次免疫。造模第30 d起皮下注射给药:多肽4的3个剂量组(0.4，0.8，1.6mg/kg ):每日两次，连续10天；阳性药对照组(甲氨蝶呤2 mg/kg ):每五天一次，连续3次；正常对照组和模型对照组(生理盐水):连续10天。分别于造模后第21天至第70天每3天称量体重、关节评分、分别检测左右后足足踝直径来观察药物对小鼠胶原型关节炎的影响。结果:造模后小鼠与正常小鼠相比较，免疫后第27天，CIA小鼠足爪红肿，关节炎指数评分增高，模型组第45-60天为肿胀高峰，模型组自第35天开始体重几乎不增加，后期还略微有下降。血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I在胶原诱导小鼠关节炎动物模型体内免疫保护作用具体结果如下: 血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I对小鼠胶原型关节炎左足足爪肿胀度的影响，阳性对照组、血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I高、中、低剂量组左后足踝直径与模型组比较，均有极显著性差异(P〈0.01)实验结果具有统计学意义。血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I对小鼠胶原型关节炎右足足爪肿胀度的影响，阳性对照组、血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂I高、中、低剂量组右后足踝直径与模型组比较，均有极显著性差异(P〈0.01)，实验结本文档来自技高网...
【技术保护点】
血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂1，其特征在于其序列为Val?Cys?Cys?Ser?Thr?Arg?Glu。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：罗瑞雪，
申请(专利权)人：苏州普罗达生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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