5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的分离制造技术

技术编号:8903512 阅读:247 留言:0更新日期:2013-07-11 00:30
本发明专利技术属于基因工程技术领域,具体涉及一种抗草甘膦基因5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,所述的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所述,该基因编码的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所述。5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因是从深海细菌Janibacter?limosus菌株的基因组文库中克隆得到,包含该基因质粒的重组大肠杆菌LZD001保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为CCTCC?NO:M2011493。经过生物学实验验证,证明该基因对草甘膦具有一定的耐受性。

【技术实现步骤摘要】
5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因的分离
本专利技术属于基因工程领域,具体涉及一种来源于深海海洋微生物基因组的5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的分离鉴定,其编码基因为AroA,通过遗传转化的方法,将该基因转入宿主细胞中,使宿主细胞获得耐受草甘膦的能力。本专利技术涉及该基因的核苷酸序列和氨基酸序列。技术背景N-膦酰甲基甘氨酸,即草甘膦(glyphosate),是大家熟知的一种内吸传导型的广谱灭生性除草剂,具有对人和牲畜低毒,在土壤中残留量低,使杂草难以产生抗性等特点,基于这些特点,草甘膦在全世界范围内得到广泛的应用。草甘膦能够抑制植物或微生物体中芳香族氨基酸合成过程中的一种重要的酶的活性,即5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS),这种酶催化莽草酸途径(shikimatepathway)的倒数第二步,将磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的酰基部分转移到莽草酸三磷酸(shikimate-3-phophate)的第5位轻基形成5_烯醇式莽草酸_3_磷酸(EPSP)和无机磷。由于草甘膦与PEP具有相类似的结构,可形成EPSP合成酶d-P 草甘膦复合物,阻遏PEP与酶的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种5?烯醇丙酮莽草酸?3?磷酸合酶基因,其核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO:1所述。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘子铎赵艳林拥军邵宗泽
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:

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