改良型腈水合酶制造技术

本发明专利技术提供具有改良型腈水合酶活性的蛋白质，该蛋白质通过改变腈水合酶的氨基酸序列得到，与野生型腈水合酶活性相比耐热性提高；本发明专利技术还提供编码该蛋白质的基因DNA，具有该基因DNA的重组载体，具有该重组载体的转化体或转导体，提取自该转化体或转导体培养物的腈水合酶及其制备方法，以及酰胺化合物的制备方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及具有耐热性提高或底物特异性改变的改良型腈水合酶活性的蛋白质；编码该蛋白质的基因DNA ;具有该基因DNA的重组载体；具有该重组载体的转化体或转导体；提取自该转化体或转导体培养物的腈水合酶及其制备方法；以及使用了该培养物或该处理物的酰胺化合物的制备方法。
技术介绍
近年来，人们发现了具有腈水合活性的酶——腈水合酶，该酶可通过水合作用将腈基转换为酰胺基，并且公开了利用该酶或具有该酶的微生物菌体以腈化合物制备对应的酰胺化合物的方法。与以往的化学合成方法相比，这种制备方法因具有高度的由腈化合物转化成对应的酰胺化合物的转化率和选择率而为人所知。生产腈水合酶的微生物，可列举例如属于棒杆菌属(Corynebacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、红球菌属(Rhodococcus)、根瘤菌属(Rhizobium)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、假诺卡氏属(Pseudonocardia)等的微生物。其中玫瑰色红球菌(Rhodococcus rhodochrous) J-1株已用于丙烯酰胺的工业生产,其有效性已被证实。另外，编码生产该菌株的腈水合酶的基因也已查明本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白质，是野生型腈水合酶的β亚基的氨基酸序列上第93位谷氨酸残基被其他氨基酸残基取代并且具有耐热性腈水合酶活性的蛋白质，所述其他氨基酸残基是选自甘氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸以及酪氨酸中的任意一个氨基酸残基，所述野生型腈水合酶的β亚基的氨基酸序列如SED?ID?NO：2所示。

【技术特征摘要】
2004.05.26 JP 2004-156593;2004.08.18 JP 2004-23781.一种蛋白质，是野生型腈水合酶的β亚基的氨基酸序列上第93位谷氨酸残基被其他氨基酸残基取代并且具有耐热性腈水合酶活性的蛋白质， 所述其他氨基酸残基是选自甘氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、组氨酸、亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸以及酪氨酸中的任意一个氨基酸残基， 所述野生型腈水合酶的β亚基的氨基酸序列如SED ID Ν0:2所示。2.如权利要求1所述的蛋白质，进一步地，β亚基的第103位谷...

【专利技术属性】
技术研发人员：渡边文昭，氏原大，酒井美纪，汤不二夫，中村哲二，
申请(专利权)人：DiaNitrix株式会社，
类型：发明
国别省市：