改良型腈水合酶制造技术
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改良型腈水合酶
本专利技术涉及改良型(变异型)的腈水合酶及其制造方法。进而涉及编码该酶的基因DNA、包含该基因DNA的重组载体、和具有该重组载体的转化体以及酰胺化合物的制造方法。
技术介绍
近年发现了酶腈水合酶、即具有将腈基水合并转换为酰胺基的腈水合活性的酶，公开了使用该酶或含有该酶的微生物菌体等通过腈化合物而制造对应的酰胺化合物的方法。已知该制造方法与现有的化学合成法相比较，由腈化合物向对应的酰胺化合物的转化率和选择率高。作为生产腈水合酶的微生物，可列举出例如：属于棒状杆菌属(Corynebacterium)、假单胞菌属(Pseudomonas)、红球菌属(Rhodococcus)、根瘤菌属(Rhizobium)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、假诺卡氏菌属(Pseudonocardia)等的微生物。其中，玫瑰色红球菌(Rhodococcusrhodochrous)J1株用于丙烯酰胺的工业生产中，其有用性已被证实。另外，编码该菌株所产生的腈水合酶的基因也已明确(参照专利文献1)。另一方面，不仅利用由自然界中存在的微生物分离的腈水合酶、其基因，还出于改变腈水...
【技术保护点】
一种蛋白质，其为以下(A)或(B)的蛋白质；(A)蛋白质，其特征在于，包含在野生型腈水合酶的氨基酸序列中下述(a)、(b)、(c)、(d)和(e)的氨基酸残基被置换为其他的氨基酸残基、进而选自由下述(f)～(q)所组成的组的至少一个氨基酸残基被置换为其他的氨基酸残基而成的氨基酸序列，并且具有腈水合酶活性；(a)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数167残基下游的氨基酸残基、(b)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数219残基下游的氨基酸残基、(c)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数57残基下游的氨基酸残基、(d)β亚基的氨基酸序列中，由...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.05.31 JP 2011-1212511.一种蛋白质，其为以下(A)的蛋白质；(A)蛋白质，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列为野生型腈水合酶的氨基酸序列的氨基酸残基被置换为如下所述其他的氨基酸残基而成的氨基酸序列，并且具有腈水合酶活性，所述野生型腈水合酶为来源于红球菌J1-H的腈水合酶，所述红球菌J1-H中α亚基的氨基酸序列为序列号4所示的氨基酸序列，β亚基的氨基酸序列为序列号2的所示氨基酸序列，被置换的氨基酸残基为下述氨基酸残基：(1)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(n)、和(i)的氨基酸残基和选自(p)或(p’)的氨基酸残基；(2)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(n)、(p)和(i)的氨基酸残基和选自(f)或(k)或(m)的氨基酸残基；(3)(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(n)、(p)和(f)的氨基酸残基；(a)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数第167位残基的氨基酸残基置换为丝氨酸、(b)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数第219位残基的氨基酸残基置换为丙氨酸、(c)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数第57位残基的氨基酸残基置换为蛋氨酸、(d)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始数第114位残基的氨基酸残基置换为酪氨酸、(e)β亚基的氨基酸序列中，由N末端的氨基酸残基开始...
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