携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的菌株、构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌，其特征在于：所述菌株为地衣芽孢杆菌(pHY300-vgb)[Bacillus?licheniformis(pHY300-vgb)]，该菌株保藏在位于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC?NO：M2011345。本发明专利技术的目的在于提供一种能高产杆菌肽的携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的菌株、构建方法及应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌工程菌株。
技术介绍
杆菌肽为淡黄色或类白色粉末，无嗅，味苦，是由10种氨基酸、12个氨基酸残基构成的多肽类抗生素，可有效抑制革兰氏阳性病原菌和部分革兰氏阴性菌。杆菌肽通过组氨酸的咪唑基和噻唑环，与多种金属离子如Cu2+、Ni2+、Co2+、Zn2+和Mn2+等生成络合物，其中以锌盐形式存在的杆菌肽，抑菌活性得到一定程度的增强，且稳定性最好。杆菌肽拥有在肠道内几乎不吸收，排泄迅速，体内不残留等优点，因此被广泛添加于饲料中。杆菌肽的作用机理是:一、其络合物能吸附在细菌的细胞壁上，阻碍脱磷酸化作用，影响磷脂的运转和向胞壁支架输送粘肽复合物，导致细胞壁合成受到抑制，细胞逐渐死亡；二、结合敏感菌细胞膜脂蛋白中的游离磷酸盐，导致细胞膜损伤，通透性增加，各种离子、氨基酸、嘧啶、嘌呤等外流；三、干扰敏感菌细胞内原浆蛋白的合成。目前,杆菌肽主要生产菌株为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其通过微生物发酵法生产,微生物发酵过程中，氧气对好氧微生物的生长繁殖和进行能量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌，其特征在于：所述菌株为地衣芽孢杆菌(pHY300?vgb)[Bacillus?licheniformis(pHY300?vgb)]，该菌株保藏在位于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC?NO：M2011345，保藏日期为2011年10月12日。

【技术特征摘要】
1.一种携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌，其特征在于:所述菌株为地衣芽孢杆菌(pHY300_vgb) [Bacillus licheniformis (pHY300_vgb)],该菌株保藏在位于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO:M2011345，保藏日期为2011年10月12日。2.—种权利要求1所述携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的构建方法，其特征在于:质粒pDG1730-vgb+经BamH I和Hind III双酶切得到的1246bp vgb片段，该片段含有芽孢杆菌编码乙酰高丝氨酸内酯(AHL)自身诱导物(Al)合成酶IuxS基因的启动子Pluxs和vgb ORF ;质粒pHY300PLK经BamH I和Hind III双酶切得到4870bp线性质粒片段；1246bp vgb片段与4870bp线性质粒片段经DNA连接酶连接作用，得到表达载体pHY300-vgb ;将表达载体pHY300-vgb转入大肠杆菌进行保存，其后通过电转化转入原始菌株——地衣芽孢杆菌(B.licheniformis DW2)，以四环素抗性为筛选标记，筛选得到地衣芽抱杆菌(pHY300-vgb) [Bacillus licheniformis (pHY300-vgb)]。3.—种权利要求1或2所述携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的应用，其特征在于:它在杆菌肽发酵中的应用。4.根据权利要求3所述携带透明颤菌血红蛋白基因的地衣芽孢杆菌的应用，其特征在于:地衣芽孢杆菌(pHY300-vgb)在杆菌肽发酵中的应用步骤包括:A菌种活化，B种子发酵...

【专利技术属性】
技术研发人员：李俊辉，楼丽君，赖建平，
申请(专利权)人：绿康生化股份有限公司，
类型：发明
国别省市：