一种罗丹明B人工抗原及其制备方法和应用技术

本发明专利技术属于免疫学检测技术领域，具体涉及一种罗丹明B人工抗原及其制备方法和应用。由于罗丹明B分子结构本身含有羧基，因此不需要另行引入活性基团。本发明专利技术将罗丹明B分子直接以碳二亚胺为偶联剂，在N-羟基琥珀酰亚胺存在的情况下与载体蛋白偶联从而得到罗丹明B的人工抗原。由于在最大程度上保持了其结构的稳定性，因此将其免疫动物后有助于提高抗体的质量。整个方法简单易行，操作简便，人工抗原得率和纯度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫学检测
，具体涉及一种罗丹明B人工抗原及其制备方法和应用。
技术介绍
罗丹明B (Rhodamine B)俗称玫瑰红，花粉红，是一种邻苯二酚类的碱性荧光染料，由于其具有很好的荧光性质，目前已广泛应用于环境监测、有色玻璃、特色烟花爆竹和生物学染色等领域。罗丹明B的结构如图1所示。近些年来，实验研究表明:罗丹明B可以明显减少人纤维原细胞的数量，抑制其增殖；同时，它还可以抑制人血管内皮细胞和平滑肌细胞的增殖。另外，经动物试验发现:罗丹明B能引起皮下组织生肉瘤，具有潜在的致癌和致突变能力。欧美等国家和地区从1993年起明令禁止其在食品加工中使用。我国卫生部也在2008年将其列入首批食品中可能违法添加的非食用物质名单之中。但是由于其价廉易得、色泽鲜亮持久等特点，仍然有一些不法食品生产、加工商违规、违法使用罗丹明染料。这一方面给国家的食品安全带来了很大的隐患；另一方面，也给消费者的身心健康带来严重威胁。目前，国内外对食品中罗丹明B的常用检测方法是高效液相色谱法(HPLC)、高效液相-质谱联用法(HPLC-MS)。但是由于色谱法的样品前处理复杂繁琐，需要精密昂贵的检测器本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种罗丹明B的人工抗原，其结构为：其中，载体蛋白直接与罗丹明B分子中的羧基通过脱水缩合形成酰胺键而共价偶联。FDA00002893038800011.jpg

【技术特征摘要】
1.一种罗丹明B的人工抗原，其结构为:2.根据权利要求1所述一种罗丹明B人工抗原的合成方法，其特征在于合成步骤为: (1)将罗丹明B96mg、N,N- 二环己基碳二亚胺41.2mg、N-轻基琥拍酰亚胺46mg混合，溶解于400ul无水N，N- 二甲基甲酰胺中，室温密封搅拌过夜； (2)将混合液离心，IOOOrpm,5分钟，然后吸取上层反应液，将其缓慢逐滴加入到冰浴的IOuM的BSA溶液中，4°C搅拌反应过夜； (3)将反应液转移至透析袋中，以PBS为透析液4°C透析7天，每12小时换一次透析液，以除去未反应的罗...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈萍萍，徐加发，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：