分泌表达抗菌肽Metchnikowin大肠杆菌基因工程菌的构建方法技术

技术编号:8677923 阅读:539 留言:0更新日期:2013-05-08 22:14
本发明专利技术公开了一种构建上述分泌表达抗菌肽Metchnikowin大肠杆菌基因工程菌的方法,包括将抗菌肽Metchnikowin基因连接,构建重组pET-22b质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。本发明专利技术的有益效果在于,高效稳定的分泌表达,下游DP水解位点使得切割蛋白成本低,更安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
抗菌肽是在诱导条件下,生物体免疫防卫系统产生的小分子活性肽类,广泛分布于植物,动物以及人类。抗菌肽是由基因编码、由核糖体合成的。目前已经发现、鉴定的抗菌肽已超过千种,大多带净正电荷。从结构上看可以分为α-螺旋型、折叠型、富含二硫键的、富含脯氨酸等多种类型。抗菌肽抑菌谱广,有些抗菌肽还可以特异性地抑制某些肿瘤细胞的生长。抗菌肽可以用于医药卫生、食品添加剂、饲料添加剂等方面。抗菌肽与传统抗生素抑菌机理不同,抗菌肽的作用方式主要是选择性地攻击病原物的细胞膜,相应地病原物不易产生针对抗菌肽的耐药性,因此使用抗菌肽可以解决细菌耐药性问题。同时又由于它是一种肽,可以被消化道消化、吸收对人体无害,无残留,因此,抗菌肽在医药、畜牧业、农业等方面都有十分广泛的应用前景。抗菌肽在生物体内含量极低,生产成本居高不下,严重影响其广泛应用;研究开发其大规模生产方法具有十分积极的意义。目前,生产抗菌肽的方法主要有三种:1.直接从生物体中提取天然抗菌肽:抗菌肽广泛存在于低等到高等动物的特定组织中,但是含量非常少,且提取工艺复杂,成本昂贵,难以满足大规模生产的要求;2.化学方法合成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种构建所述分泌表达抗菌肽Metchnikowin大肠杆菌基因工程菌的方法,其特征在于,包括将抗菌肽Metchnikowin基因连接,构建重组pET?22b质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。

【技术特征摘要】
1.一种构建所述分泌表达抗菌肽Metchnikowin大肠杆菌基因工程菌的方法,其特征在于,包括将抗菌肽Metchnikowin基因连接,构建重组pET_22b质粒,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。2.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述抗菌肽Metchnikowin基因含有核苷酸序列 SEQ ID:N0 1、SEQ ID:N02,含有氨基酸序列 SEQ ID N03:SEQ ID N04。3.根据权利要求1所述的构建方法,其特征在于,所述抗菌肽Metchnikowin基因是通过扩增获得的,以含有Metchnikowin基因序列的质粒为模板,在其下游设计EcoRI酶切位点,其引物为:MF:5’ -CATCGTCATCAGGGTCCG-3’ ;MR:5,...

【专利技术属性】
技术研发人员:查向东恽辉余忠丽程林春赵大伟耿玉静
申请(专利权)人:安徽希普生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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