一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子及其应用制造技术

为了提供一种分子生物学快速筛选检测河豚毒素的方法，本发明专利技术提供了一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子，并建立一种简便、快速筛选检测河豚毒素的DNA适配子-染料直接法。所述适配子是应用SELEX技术，从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA（ssDNA），能特异结合河豚毒素。所述DNA适配子的核苷酸序列为如SEQIDNO.1所示；本发明专利技术将制备的DNA适配子应用于河豚毒素的分子生物学检测，检测限低。本发明专利技术的DNA适配子可通过PCR扩增或人工合成的方式制备，易于获得、长期保存。建立的河豚毒素DNA适配子-染料直接检测法，无需昂贵的仪器和复杂的操作，具有操作简便、成本低廉、快速、灵敏等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术具体涉及一种能特异结合河豚毒素的DNA适配子及其应用。
技术介绍
河豚毒素(tetrodotoxin，TTX)是毒性最强的非蛋白类神经毒素之一，存在于河豚等多种海洋生物以及蝾螈、火晰蜴、青蛙、蟾蜍等动物体内，某些细菌(如弧菌属、假单胞菌属等)也可分泌TTX。TTX的分子式为C11H17N3O8，相对分子量为319. 271，是一种小分子物质。TTX是钠离子通道阻断剂，直接影响神经肌肉兴奋性的传导，使得神经肌肉呈麻痹状态，甚至引起死亡。河豚毒素性质稳定，可使水源和食物等长期染毒，易经消化道吸收中毒，分散呈气溶胶状态的河豚毒素，亦可通过呼吸道吸入中毒。河豚毒素是一种强神经毒素，毒性大大超过包括有机磷毒剂在内的所有合成毒剂，它比氰化钠的毒性大1000多倍，国内外因食用河豚或织纹螺而导致河豚毒素中毒死亡的案例时有发生。此外，由于TTX已可人工化学合成，存在可能被恐怖分子利用的潜在威胁。这些使得对TTX的检测越来越被人们所重视。河豚毒素检测方法有很多，包括生物法、酶免疫分析法、气相色谱法、液相色谱法、液相-质谱联用法等，但目前还未见分子生物学快速筛选检测方法。适配子(aptamer本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种DNA适配子，其特征在于：所述适配子是应用SELEX技术，从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA，能特异结合河豚毒素。

【技术特征摘要】
1.一种DNA适配子，其特征在于所述适配子是应用SELEX技术，从人工合成的全长为78个碱基的ssDNA文库中筛选获得的单链DNA，能特异结合河豚毒素。2.根据权利要求1所述的一种DNA适配子，其特征在于所述DNA适配子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.如权利要求1所述的DNA适配子的应用，其特征在于将所述DNA适配子用于筛选检测河豚毒素。4.根据权利要求3所述的DNA适配子的应用，其特征在于将所述DNA适配子用于筛选检测河豚毒素是采用DNA适配子-染料法，能在2小时内快速筛选检测河豚毒素。5.根据权利要求4所述的DNA适配子的应用，其特征在于DNA适配子-染料法的具体步骤如下取5ML浓度为10pmol/L的DNA适配子的dsDNA于...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵碧英，杨方，陈文炳，王云才，缪婷玉，彭娟，
申请(专利权)人：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：