一种新合成的猪抗菌肽基因及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种新合成的猪抗菌肽基因（S-Hepcidin），其核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明专利技术根据毕赤酵母对密码子的偏好性，在不改变猪天然抗菌肽（Hepcidin）氨基酸序列的前提下，对其基因序列进行改造，并与真核表达载体pGAPZαA连接，转化大肠杆菌（DH5α）和毕赤酵母(Pichiapastoris)感受态细胞，经一系列处理后筛选出髙拷贝重组酵母菌并扩大培养，离心收集上清液，用Tricine-SDS-PAGE电泳检测结果显示，在2.76kDa处有目的条带，表明改造后的猪抗菌肽基因在毕赤酵母中成功表达。采用液态微生物培养测定重组蛋白的生物活性，结果显示：重组蛋白对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用，为今后该抗菌肽在替代抗生素进行畜产品的安全生产及其在铁代谢调节方面的研究奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗菌肽
，具体涉及一种新合成的猪抗菌肽基因、制备方法及其应用。
技术介绍
猪体内的抗菌肽(!fepcidin)是一种主要由肝脏合成的富含半胱氨酸的小分子多肽，属防御素蛋白家族。2000年，Krause等首先从人血液中分离纯化得到了 Hepcidin小肽，当时将其称为肝脏表达的抗菌多肽(liver expressed antimicrobial peptide,LEAP-1)。2001年，Park等在人尿液中意外发现了这一小肽，因其由肝脏合成并具有抑菌活性而将其命名为 Hepcidin (hep= hepatic, cidin= antimicrobial activity),并发现该小妝对真菌白色念珠菌{Candida、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)和黑曲霉(A niger)，以及细菌大肠杆菌疋· coli)、金黄色葡萄球菌(5 aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和B组链球菌(group B Streptococcus)均有明显的抑菌活性。此后,从鱼类到人类等众多脊椎动物肝脏中均检测到其同源基因。近几年的研究证实，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种新合成的猪抗菌肽基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种新合成的猪抗菌肽基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹清强，狄元冉，常娟，李庆华，郑秋红，
申请(专利权)人：河南德邻生物制品有限公司，河南农业大学，
类型：发明
国别省市：