【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药制剂领域，特别涉及。
技术介绍
河豚毒素（tetrodotoxin)是一种氨基全氢喹唑啉型化合物，具有笼型原酸酯结
【技术保护点】
一种制备河豚毒素的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤一：浸泡将河豚鱼肝或鱼子切成条或块后，用去离子水或纯化水浸泡，得到料液，浸泡至料液不再含毒为止；步骤二：沉降将步骤一所得的料液置于6～10℃沉降放置10～12小时，分出上清液，并将沉淀物离心并过滤除渣后再与上清液混合得到澄清液；步骤三：絮凝将步骤二所得的澄清液用氨水溶液调PH至7～9，加入絮凝剂溶液调节PH至4～6，搅匀，静置沉降，然后分出上清液，并将沉淀物经过高速离心并过滤除渣后再与上清液混合；步骤四：离子交换将步骤三混合所得的料液，上离子交换柱，交换至PH6.5～7.0,交换结束后用去离子水或纯化水冲柱至澄清，然后以醋酸溶液洗脱，收集含目标产物的组分，以氨水溶液调PH至5～7，减压浓缩得到浓缩液。步骤五：低压柱层析将步骤四所得的浓缩液和干硅胶拌好，上低压硅胶柱进行分离，并加入组成为正丁醇、醋酸和水的洗脱液进行洗脱，收集含目标产物的流出液部分，过滤得到滤液，减压浓缩得到浓缩液。步骤六：高效液相色谱柱将步骤五所得浓缩液注入平衡后的高效液相色谱柱,以醋酸溶液洗脱，收集含目标产物的流出液减压浓缩，得到浓缩液。步骤七：结晶将步骤六所得...
【技术特征摘要】
1. 一种制备河豚毒素的方法，其特征在于，具体包括如下步骤： 步骤一：浸泡 将河豚鱼肝或鱼子切成条或块后，用去离子水或纯化水浸泡，得到料液，浸泡至料液不 再含毒为止； 步骤二：沉降 将步骤一所得的料液置于6?10°C沉降放置10?12小时，分出上清液，并将沉淀物离 心并过滤除渣后再与上清液混合得到澄清液； 步骤三：絮凝 将步骤二所得的澄清液用氨水溶液调PH至7?9,加入絮凝剂溶液调节PH至4?6,搅 匀，静置沉降，然后分出上清液，并将沉淀物经过高速离心并过滤除渣后再与上清液混合； 步骤四：离子交换 将步骤三混合所得的料液，上离子交换柱，交换至PH6. 5?7. 0,交换结束后用去离子 水或纯化水冲柱至澄清，然后以醋酸溶液洗脱，收集含目标产物的组分，以氨水溶液调PH 至5?7,减压浓缩得到浓缩液。 步骤五：低压柱层析 将步骤四所得的浓缩液和干硅胶拌好，上低压硅胶柱进行分离，并加入组成为正丁醇、 醋酸和水的洗脱液进行洗脱，收集含目标产物的流出液部分，过滤得到滤液，减压浓缩得到 浓缩液。 步骤六：高效液相色谱柱 将步骤五所得浓缩液注入平衡后的高效液相色谱柱，以醋酸溶液洗脱，收集含目标产 物的流出液减压浓缩，得到浓缩液。 步骤七：结晶 将步骤六所得的浓缩液用氨水溶液调PH至8?9,冷藏，析出结晶，滤出，用无水乙醇洗 涤，常温减压干燥即得河豚毒素高纯单体结晶。2. 根据权利要求1所述的制备河豚毒素的方法，其特征在于， 所述步骤一中，所述河豚鱼肝或鱼子是切成1?2cm的条或块，置不锈钢浸泡槽中加 1?2倍的去离子水或纯化水在6?10°C浸泡，并适时搅拌，18?24小时后将料液从不锈 钢浸泡槽的下口放出至储料槽或沉降罐中。3. 根据权利要求2所述的制备河豚毒素的方法，其特征在于， 所述步骤三中，是将步骤二所得的澄清液用25 %的氨水溶液调PH至7?9，加絮凝剂 溶液至PH4?6,以50?300rpm/min的速度搅拌5?lOmin，在温度为6?10°C下静置沉 降18?24小时，分出上清液后，将沉淀物经过高速离心机，在转速为5000?10000rpm/min 下离心20?40分钟，并过滤除渣后再与上清液混合。4. 根据...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。